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基于NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路探讨肝复胶囊抗慢性肝损伤的作用机制
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作者 李敏仪 黄以蓉 +5 位作者 彭凯 彭继 谢锋 王祁 高璐 李敏 《山西医科大学学报》 2025年第1期28-35,共8页
目的 研究肝复胶囊(Ganfu capsule,GFC)对CCl4诱导的慢性肝损伤(chronic liver injury,CLI)大鼠模型的影响及作用机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组(2×10^(-4) g/kg)及肝复胶囊低(GFC-L,0.781 3 g/kg... 目的 研究肝复胶囊(Ganfu capsule,GFC)对CCl4诱导的慢性肝损伤(chronic liver injury,CLI)大鼠模型的影响及作用机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组(2×10^(-4) g/kg)及肝复胶囊低(GFC-L,0.781 3 g/kg)、中(GFC-M,1.562 5 g/kg)、高(GFC-H,3.125 g/kg)剂量组,每组10只。空白组不做处理,其余组大鼠均背部皮下注射40%CCl4花生油混合溶液造模,除首剂量按5 mL/kg外,每次注射剂量为3 mL/kg,每周2次,持续12周。造模4周后,给药组大鼠开始灌胃相应药物,空白组和模型组灌胃等量生理盐水,每日1次,持续8周。12周末,称量各组大鼠体质量后,处死大鼠,腹主动脉取血,收集大鼠肝脏。HE及Masson染色观察肝组织病理变化;生化试剂盒检测大鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST);ELISA检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6水平;Western blot法检测各组大鼠肝组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck-like protein containing a caspase activating recruitment domain,ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)蛋白表达。结果 与模型组比较,GFC各剂量组和秋水仙碱组大鼠体质量显著增加,肝组织炎症浸润及胶原蛋白沉积减少,血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05),肝组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达下调(P<0.05),高剂量GFC改善CLI大鼠疗效优于秋水仙碱。结论 GFC可能通过下调NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路,抑制炎症因子的表达,从而缓解CCl4诱导的肝脏炎症损伤,发挥保护肝脏作用。 展开更多
关键词 肝复胶囊 慢性肝损伤 nlrp3 asc caspase-1 炎症
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NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18轴在大鼠脓毒症急性肾损伤中的作用 被引量:4
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作者 穆晓琨 毕琳 《安徽农业科学》 CAS 2015年第32期93-95,159,共4页
[目的]观察盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture,CLP)所致的脓毒症诱导急性肾损伤(AKI)后大鼠不同时间点的血清及肾组织中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18的表达情况。[方法]建立大鼠CLP诱导的脓毒症AKI模型,并于手术后不同时... [目的]观察盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture,CLP)所致的脓毒症诱导急性肾损伤(AKI)后大鼠不同时间点的血清及肾组织中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18的表达情况。[方法]建立大鼠CLP诱导的脓毒症AKI模型,并于手术后不同时间点用ELISA试剂盒方法测定血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平及IL-1β/IL-18的表达量;采用Western blotting法检测肾脏组织NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18蛋白水平,并对肾脏组织进行HE染色病理分析。[结果]CLP诱导的脓毒症大鼠血清BUN和Scr水平显著增高,肾小管坏死也显著增加,均于CLP术后24 h达到高峰,与假手术组大鼠相比差异显著(P<0.05或P<0.01);大鼠肾脏组织中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18及血清IL-1β/IL-18水平也随着损伤程度的加重表现出升高趋势,与假手术组相比差异均达到显著水平。[结论]大鼠脓毒症AKI后肾组织或血清中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18蛋白水平表达增加,表明NLRP3炎症小体的激活可能对脓毒症AKI及其病理改变有促进作用。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 nlrp3/asc/caspase-1/IL-1β/IL-18轴
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撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛通过NLRP3/ASC/Caspase-1途径诱导IPEC-J2细胞焦亡 被引量:2
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作者 肖金龙 王浩 +8 位作者 万全 沈珏 张博 赵维薇 邓静 王喜 赵汝 肖鹏 高洪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5218-5227,共10页
旨在研究撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛(highly pathogenic virulence island,HPI)诱导IPEC-J2细胞焦亡的机制,本研究以LPS+ATP为阳性对照,将实验室前期筛选的E.coli HPI及通过CRISPR/Cas9基因敲除技术构建完成的E.coliΔHPI感染IPEC-J... 旨在研究撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛(highly pathogenic virulence island,HPI)诱导IPEC-J2细胞焦亡的机制,本研究以LPS+ATP为阳性对照,将实验室前期筛选的E.coli HPI及通过CRISPR/Cas9基因敲除技术构建完成的E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞,观察细胞损伤情况;RT-qPCR测定各组作用0.5、3、6、9、12 h后细胞内焦亡通路中关键因子NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、消皮素D(gasderminD,GSDMD)及炎性因子白介素-18(IL-18)、白介素-1β(IL-1β)的mRNA转录水平;激光共聚焦观察NLRP3/Caspase-1炎性复合体组装及表达情况;Western blot测定GSDMD及其活化形式GSDMD-N蛋白表达水平,PI染色检测胞膜完整性。结果表明:LPS+ATP处理显著促进细胞焦亡的发生,阴性对照组细胞正常生长、轮廓清晰,E.coli感染组及LPS+ATP组细胞出现变形、脱落、边界模糊等明显细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),且HE染色显示,E.coliHPI感染相较于E.coliΔHPI感染对细胞的损伤更严重;E.coli HPI组中的焦亡通路关键因子及炎性因子mRNA水平在3~9 h均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于E.coliΔHPI组;NLRP3/Caspase-1炎性复合体在细胞质中发生组装,且E.coli HPI组NLRP3/Caspase-1蛋白荧光强度、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达水平及PI染色阳性率均极显著(P<0.01)高于E.coliΔHPI组;E.coli HPI组的CPE、HE染色、焦亡通路关键因子及炎性因子mRNA水平、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达量、NLRP3/Caspase-1共定位情况均与LPS+ATP组相似。结果提示,撒坝猪源E.coliHPI通过上调NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路中关键因子mRNA水平,诱导NLRP3/Caspase-1炎性复合体的组装,促进焦亡标志蛋白GSDMD及GSDMD-N的表达,并对IPEC-J2细胞膜进行打孔,从而诱导细胞发生焦亡。 展开更多
关键词 大肠杆菌 高致病性毒力岛 焦亡 猪小肠上皮细胞 nlrp3/asc/caspase-1通路
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恩格列净灌胃对急性心肌梗死小鼠心功能的改善作用及其机制 被引量:4
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作者 李彬 于翔 《山东医药》 CAS 2022年第23期40-44,共5页
目的 观察钠—葡萄糖共转运蛋白2(SGLT-2)抑制剂恩格列净对急性心肌梗死(AMI)小鼠心功能的改善作用,并探讨其可能的机制。方法 将34只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组11只、模型组11只和治疗组12只,模型组和治疗组采用结扎冠状动脉前降支... 目的 观察钠—葡萄糖共转运蛋白2(SGLT-2)抑制剂恩格列净对急性心肌梗死(AMI)小鼠心功能的改善作用,并探讨其可能的机制。方法 将34只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组11只、模型组11只和治疗组12只,模型组和治疗组采用结扎冠状动脉前降支的方法建立AMI模型,假手术组冠脉动脉前降支只穿线不结扎;治疗组建模后4 h给予恩格列净10 mg/(kg·d)灌胃治疗,假手术组及模型组给予等量0.5%羟乙基纤维素灌胃,连续7 d。采用超声心动图检查各组心功能[左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)],TUNEL染色检测心肌组织细胞凋亡率,ELISA法检测血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)、C反应蛋白(CRP)水平,Western blotting法检测心肌组织NLRP3、ASC、Caspase-1、cleaved Caspase-1、IL-1β、IL-18表达。结果 各组小鼠LVIDd比较P>0.05。与假手术组比较,治疗组和模型组小鼠LVIDs均升高(P均<0.05)。与假手术组比较,治疗组和模型组小鼠LVEF、FS均降低,血清NLRP3、IL-1β、IL-18、CRP水平均升高,心肌组织NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达均升高,且模型组变化更明显(P均<0.05)。模型组小鼠心肌组织细胞凋亡率明显高于假手术组和治疗组(P均<0.05),假手术组和治疗组比较无统计学差异(P>0.05)。假手术组和模型组血清Caspase-1水平及各组心肌组织Caspase-1表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 恩格列净可改善AMI小鼠的心功能、减少其心肌细胞凋亡,其机制可能与抑制NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路、减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 心功能 SGLT-2 恩格列净 nlrp3/asc/caspase-1信号通路 动物实验
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