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基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株
1
作者
夏梦岩
张卓然
+1 位作者
秦成
赵静
《中国动物检疫》
CAS
2002年第5期22-25,共4页
目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物 ,引物1的5'端用生物素标记 ;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针 ,并对之进行5'端地高辛标记...
目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物 ,引物1的5'端用生物素标记 ;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针 ,并对之进行5'端地高辛标记。生物素化的双链扩增产物被固相的链霉亲和素捕获后经变性成为生物素化单链。然后微孔中加入地高辛标记的探针进行杂交 ,并用抗 -地高辛 -碱性磷酸酶显色。结果所建立的方法快速、简便、特异 ,敏感性比琼脂糖电泳法高约3～4倍 ,批内CV为9.88 % ,批间CV为18.31%。结论所建立的方法优化PCR条件后可作为新城疫病毒感染诊断。
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关键词
基因扩增产物微孔杂交法
检测
新城疫病毒
致病毒株
免疫酶技术
固相杂交
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题名
基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株
1
作者
夏梦岩
张卓然
秦成
赵静
机构
解放军
大连医科大学
辽宁省商检局
出处
《中国动物检疫》
CAS
2002年第5期22-25,共4页
文摘
目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物 ,引物1的5'端用生物素标记 ;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针 ,并对之进行5'端地高辛标记。生物素化的双链扩增产物被固相的链霉亲和素捕获后经变性成为生物素化单链。然后微孔中加入地高辛标记的探针进行杂交 ,并用抗 -地高辛 -碱性磷酸酶显色。结果所建立的方法快速、简便、特异 ,敏感性比琼脂糖电泳法高约3～4倍 ,批内CV为9.88 % ,批间CV为18.31%。结论所建立的方法优化PCR条件后可作为新城疫病毒感染诊断。
关键词
基因扩增产物微孔杂交法
检测
新城疫病毒
致病毒株
免疫酶技术
固相杂交
Keywords
ndv eia pcr solid phase hybridization
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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作者
出处
发文年
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1
基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株
夏梦岩
张卓然
秦成
赵静
《中国动物检疫》
CAS
2002
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