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松萝酸对A549和NCI-H358细胞增殖、凋亡及自噬的影响
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作者 李新伟 王延婷 +2 位作者 李瑞雪 白慧敏 刘锦龙 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期455-462,共8页
目的 探究松萝酸(UA)对肺癌A549和NCI-H358细胞增殖、细胞周期、凋亡和自噬的影响。方法 CCK-8法检测UA对两种肺癌细胞增殖抑制作用。流式细胞术检测UA对两种肺癌细胞周期阻滞作用。DCFH-DA探针法和流式细胞术检测UA诱导两种肺癌细胞生... 目的 探究松萝酸(UA)对肺癌A549和NCI-H358细胞增殖、细胞周期、凋亡和自噬的影响。方法 CCK-8法检测UA对两种肺癌细胞增殖抑制作用。流式细胞术检测UA对两种肺癌细胞周期阻滞作用。DCFH-DA探针法和流式细胞术检测UA诱导两种肺癌细胞生成活性氧(ROS)。Western blot检测两种肺癌细胞经UA及UA+ROS抑制处理后凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3和Cleaved-Caspase-3及自噬相关蛋白LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达情况。结果 (1) UA降低了两种细胞存活率,且抑制A549细胞增殖能力强于NCI-H358细胞。(2) UA将A549细胞阻滞在G0/G1期,NCI-H358细胞阻滞在G2/M期和S期。(3) UA诱导两种细胞ROS含量增加,NCI-H358细胞ROS增加量多于A549细胞,ROS抑制剂会减少UA诱导的细胞内ROS增多。(4) UA引起了两种肺癌细胞凋亡相关蛋白Bax和Cleaved-caspase-3高表达及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,其对A549促凋亡和自噬作用强于NCI-H358;抑制ROS后,两种肺癌细胞的Bax和Cleaved-Caspase-3表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低,其中NCI-H358细胞降低更多。结论 UA抑制肺癌A549和NCI-H358细胞增殖,诱导细胞周期阻滞,并引起癌细胞发生细胞凋亡与自噬,且UA对A549细胞抑制杀伤作用强于NCI-H358细胞。这其中诱生细胞ROS参与了UA对两种肺癌细胞的作用,相比A549细胞,ROS可能更多介导UA诱导NCI-H358细胞凋亡和自噬发生。 展开更多
关键词 UA A549 nci-H358 细胞周期 活性氧 凋亡 自噬
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GC-NCI-MS分析水果蔬菜中多种拟除虫菊酯农药残留 被引量:16
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作者 林竹光 刘勇 +3 位作者 金珍 谭君 范玉兰 陈渊川 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期520-524,共5页
用气相色谱-负化学离子化质谱法(GC-NC I-MS)同时分析了水果蔬菜中7种拟除虫菊酯农药残留.试样用正己烷和丙酮混合提取剂提取与F lorisil硅藻土层析柱净化后,以δ-六六六为内标物,采用GC-NC I-MS的选择离子监测方式(SIM)对7种农药残留... 用气相色谱-负化学离子化质谱法(GC-NC I-MS)同时分析了水果蔬菜中7种拟除虫菊酯农药残留.试样用正己烷和丙酮混合提取剂提取与F lorisil硅藻土层析柱净化后,以δ-六六六为内标物,采用GC-NC I-MS的选择离子监测方式(SIM)对7种农药残留进行定性与定量分析.结果表明,此方法快速、简便、灵敏度高和选择性好;7种拟除虫菊酯农药残留的检测限为0.05~1.00μg.kg-1,平均回收率为74.6%~109%,相对标准偏差为9.9%~30%. 展开更多
关键词 拟除虫菊酯 农药残留 水果蔬菜 相对标准偏差 平均回收率 同时分析 气相色谱 定量分析 监测方式 nci 层析柱 硅藻土 提取剂 正己烷 质谱法 离子化 内标物 六六六 灵敏度 检测限 试样 GC
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噬菌体随机肽库淘选肺癌细胞NCI-H1299特异性结合多肽 被引量:5
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作者 石磊 潘雪刁 +7 位作者 王军业 潘琴 巫玮 金桂芳 房思练 侯炳忠 何兴祥 臧林泉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期300-304,共5页
目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二... 目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为PhageZS6。细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS6对NCI-H1299具有高亲和力。结论利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 多肽 肺癌 nci—H1299 减性筛选
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鸦胆子油乳抑制肺癌NCI-H460细胞的增殖及其机制 被引量:22
4
作者 张晓娇 王雪莲 +2 位作者 赵峰 安春丽 王晓娜 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期519-523,共5页
目的:探讨鸦胆子油乳在体外对人大细胞肺癌NCI-H460细胞的抑制作用及其机制。方法:以不同质量浓度鸦胆子油乳(2.5、5.0、10、20、40、80μg/ml)处理NCI-H460细胞,24、48、72h后收集细胞,MTT法检测鸦胆子油乳对NCI-H460细胞增殖的抑制作... 目的:探讨鸦胆子油乳在体外对人大细胞肺癌NCI-H460细胞的抑制作用及其机制。方法:以不同质量浓度鸦胆子油乳(2.5、5.0、10、20、40、80μg/ml)处理NCI-H460细胞,24、48、72h后收集细胞,MTT法检测鸦胆子油乳对NCI-H460细胞增殖的抑制作用;吉姆萨染色后光学显微镜下观察NCI-H460细胞形态学改变;流式细胞仪测定NCI-H460细胞凋亡率;caspase-3酶活性试剂盒检测NCI-H460细胞caspase-3酶活性。结果:鸦胆子油乳可剂量和时间依赖性抑制NCI-H460细胞的增殖,80μg/ml鸦胆子油乳作用72h时的抑制率达(91.07±1.60)%。鸦胆子油乳作用后,NCI-H460细胞呈现典型凋亡形态学改变;流式细胞术检测结果显示,10、20和40μg/ml鸦胆子油乳作用48h后,NCI-H460细胞凋亡率分别为(45.23±4.30)%、(54.14±3.09)%和(61.57±7.28)%(P<0.01)。鸦胆子油乳可剂量依赖性上调NCI-H460细胞caspase-3酶活性,40μg/ml鸦胆子油乳时caspase-3酶活性为(1.07±0.07)μmol/μg,是对照组的4.97倍(P<0.01)。结论:鸦胆子油乳可能通过活化caspase-3诱导NCI-H460细胞凋亡,抑制NCI-H460细胞增殖。 展开更多
关键词 肺癌 nci-H460细胞 鸦胆子油乳 凋亡 CASPASE-3
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金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446细胞增殖的影响 被引量:15
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作者 孙黎 程建贞 +3 位作者 罗强 张秀昌 白雪梅 安芳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第5期981-983,共3页
目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响。方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响。②采用流式细胞术观察... 目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响。方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响。②采用流式细胞术观察0.793、1.586、3.172g/L金莲花黄酮对K562细胞周期的影响。结果:①金莲花黄酮在0.793~12.688g/L范围内对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用,且抑制作用呈剂量依赖性(F=6.72,9.81,8.54,4.83,P均<0.05)。②金莲花黄酮可使K562G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(F=12.56,20.86,P均<0.05)。结论:金莲花黄酮对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株的增殖均有很强的抑制作用;金莲花黄酮可使体外培养的K562细胞周期阻滞在G0/G1期,可能是其抑制K562肿瘤细胞增殖的机制。 展开更多
关键词 金莲花黄酮 K562 HELA Ec-109 nci-H446 增殖
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气-质联用法(EI.PCI.NCI)在系统毒物分析中的应用 被引量:2
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作者 沈敏 孙亚娟 +3 位作者 沈保华 向平 严伟民 张玉荣 《法医学杂志》 CAS CSCD 1993年第3期97-102,共6页
本文应用电子轰击质谱(EI),正、负化学电离质谱(PCI.NCI)技术,建立了315种常见毒,药物的气一质联用系统分析方法。并建立了 EIMS、PCIMS、NCIMS 质谱图谱库。司法鉴定实践表明使用气相保留指数,特征碎片和 EI、PCI、NCI 图谱库检索等多... 本文应用电子轰击质谱(EI),正、负化学电离质谱(PCI.NCI)技术,建立了315种常见毒,药物的气一质联用系统分析方法。并建立了 EIMS、PCIMS、NCIMS 质谱图谱库。司法鉴定实践表明使用气相保留指数,特征碎片和 EI、PCI、NCI 图谱库检索等多指标的系统分析方法,是未知物鉴定的强有力的工具。 展开更多
关键词 气-质联用法 PCI 毒物分析 系统分析方法 电子轰击质谱 化学电离质谱 EIMS 保留指数 司法鉴定 图谱库 多指标 nci
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周氏克金岩方有效成分槲皮素促进肺癌细胞NCI-H460凋亡的相关机制研究 被引量:8
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作者 黄震洲 陈美娟 +3 位作者 熊飞 姜淼 尹莲 张旭 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期235-237,共3页
目的观察周氏克金岩方有效成分槲皮素诱导肺癌细胞NCI-H460凋亡的相关作用机制。方法采用Hoechst33258染色及透射电镜(TEM)观察槲皮素诱导细胞凋亡的形态学变化,结合Western blot法检测槲皮素对细胞内EGFR-Ras-Raf-MEK/ERK1/2及凋亡相... 目的观察周氏克金岩方有效成分槲皮素诱导肺癌细胞NCI-H460凋亡的相关作用机制。方法采用Hoechst33258染色及透射电镜(TEM)观察槲皮素诱导细胞凋亡的形态学变化,结合Western blot法检测槲皮素对细胞内EGFR-Ras-Raf-MEK/ERK1/2及凋亡相关通路的影响。结果各浓度的槲皮素处理细胞24h后,以25、50μmol/L 2个药物浓度处理组的凋亡特征更为显著,荧光显微镜下可见细胞核或细胞质内浓染致密的颗粒块状荧光;在25μmol/L槲皮素处理细胞48h后在透射电镜的观察图片中也呈现出了细胞凋亡的特征;Western blot法对信号通路相关蛋白的检测结果表明,12.5μmol/L的槲皮素能显著抑制c-Raf的活化,而在25μmol/L下能促进caspase-3和caspase-7的活化。结论槲皮素能通过抑制c-Raf的激活,抑制EGFR-Ras-Raf-MEK/ERK1/2信号通路,同时诱导肺癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 周氏克金岩方 槲皮素 nci-H460细胞 ras通路 凋亡
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南方红豆杉水提物对HER2阳性人NCI-N87胃癌移植瘤生长及凋亡作用 被引量:10
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作者 王亚坤 裴静波 +2 位作者 谢长生 戴飞飞 孙孝超 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第8期1949-1952,I0009,共5页
目的:探讨南方红豆杉水提物对HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,及诱导凋亡的作用。方法:通过建立人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤模型,采用随机数字法将80只裸鼠随机分为8组:生理盐水对照组,南方红豆杉低、中、高剂量组,西... 目的:探讨南方红豆杉水提物对HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,及诱导凋亡的作用。方法:通过建立人胃癌NCI-N87细胞裸鼠移植瘤模型,采用随机数字法将80只裸鼠随机分为8组:生理盐水对照组,南方红豆杉低、中、高剂量组,西药赫赛汀组,南方红豆杉低、中、高剂量联合赫赛汀组;给药处理后颈椎脱臼法处死裸鼠,剥离瘤组织,称瘤重、测量瘤径,计算移植瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算瘤重得抑瘤率;TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,计算凋亡指数。结果:同对照组比较治疗组均可抑制肿瘤生长(P<0.05),且联合组表现出比单药组更为显著的抑制作用;中剂量联合组对肿瘤的抑制作用优于红豆杉高剂量及赫赛汀单药组(P<0.05)。对照组凋亡细胞数少,凋亡率低,低、中、高剂量单药组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较(P<0.05);各剂量联合用药组凋亡细胞数目较多,与单药组比较均有明显差异(P<0.05),中剂量联合组差异性最为显著(P<0.01)。结论:南方红豆杉水提物对HER2阳性高表达NCI-N87胃癌裸鼠移植瘤的生长有抑制作用,联合赫赛汀可以增强其增殖抑制效果,中剂量联合组显著提高赫赛汀的抑瘤作用;南方红豆杉水提物可以促进胃癌细胞的凋亡,联合赫赛汀能增强其诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 南方红豆杉水提物 nci-N87胃癌细胞 移植瘤 凋亡
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苦杏仁苷抑制人肺癌NCI-H1299细胞体外侵袭的机制 被引量:19
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作者 孙卓琳 刘京伟 匡长春 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期479-482,共4页
探讨天然产物苦杏仁苷对人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞体外侵袭与转移的抑制作用及其机制。采用MTS法检测苦杏仁苷对肿瘤细胞生长的影响;采用Transwell小室和划痕试验检测苦杏仁苷对细胞侵袭和迁移能力的影响;采用Western blot和RT-PCR... 探讨天然产物苦杏仁苷对人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞体外侵袭与转移的抑制作用及其机制。采用MTS法检测苦杏仁苷对肿瘤细胞生长的影响;采用Transwell小室和划痕试验检测苦杏仁苷对细胞侵袭和迁移能力的影响;采用Western blot和RT-PCR试验检测苦杏仁苷对MMP-2/9、integrinβ1、integrinβ4、整合素连接激酶(ILK)、黏附斑激酶(FAK)、p-FAK和β-catenin的表达水平,以及Akt和RICTOR的磷酸化水平的影响。结果表明:苦杏仁苷可显著抑制H1299细胞体外增殖,0.5和1 mg/m L苦杏仁苷作用H1299细胞48 h后,肿瘤细胞侵袭、迁移能力显著下降,MMP-2/9、integrinβ1/4、ILK、FAK、β-catenin蛋白和mRNA表达,MMP-2/9活性以及FAK、Akt和RICTOR磷酸化水平显著下调(P均<0.05)。 展开更多
关键词 苦杏仁苷 非小细胞肺癌 肿瘤转移 nci-H1299 整合素连接激酶 黏附斑激酶
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siRNA对肺癌细胞株NCI-H460 bcl-2基因表达的影响 被引量:6
10
作者 胡海燕 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期174-179,共6页
目的:研究siRNA (smallinterferenceRNA)对大细胞肺癌细胞株NCI -H4 6 0bcl- 2基因表达的影响。方法:利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl - 2基因为靶标的siRNA ,通过脂质体将合成的siRNA转入NCI-H4 6 0细胞株,设置转... 目的:研究siRNA (smallinterferenceRNA)对大细胞肺癌细胞株NCI -H4 6 0bcl- 2基因表达的影响。方法:利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl - 2基因为靶标的siRNA ,通过脂质体将合成的siRNA转入NCI-H4 6 0细胞株,设置转染bcl- 2反义药物G3139和空白两对照组。用MTT法检测siRNA对细胞生长的作用;流式细胞仪检测细胞周期的改变和Bcl- 2蛋白表达;RT -PCR检测bcl- 2mRNA水平。结果:siRNA组与对照组细胞存活率均有显著性差异(P <0 0 5 ) ;siRNA组bcl- 2的mRNA明显低于对照组和反义组(P <0 0 5 ) ;siRNA组Bcl- 2蛋白阳性率明显低于对照组和反义组,siRNA组以及反义组细胞阻滞于S期。结论:体外转录合成的siRNA可抑制NCI-H4 6 0细胞bcl- 2基因的表达,抑制率可达5 0 %以上。 展开更多
关键词 小干扰RNA BCL-2基因 大细胞肺癌细胞株 nci—H460
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异甘草素诱导NCI-H157细胞凋亡及对ERS相关基因表达的影响 被引量:4
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作者 刘丽 沈洪 +3 位作者 姜鹏君 陈劼 刘青 张旭 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期264-268,共5页
目的研究异甘草素对人非小细胞肺癌NCI-H157细胞增殖、凋亡及细胞内质网应激相关基因ATF4、DDIT3和TNFRSF10B表达的影响。方法体外培养NCI-H157细胞,给予异甘草素处理,MTT法检测不同浓度的异甘草素对NCI-H157细胞的增殖抑制率,流式细胞... 目的研究异甘草素对人非小细胞肺癌NCI-H157细胞增殖、凋亡及细胞内质网应激相关基因ATF4、DDIT3和TNFRSF10B表达的影响。方法体外培养NCI-H157细胞,给予异甘草素处理,MTT法检测不同浓度的异甘草素对NCI-H157细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测不同浓度异甘草素对肿瘤细胞的凋亡发生率,实时定量PCR检测NCI-H157细胞在不同浓度异甘草素处理后ATF4、DDIT3和TNFRSF10B基因mRNA的表达。结果在一定浓度范围内,异甘草素能显著抑制人肺癌NCI-H157细胞的增殖,并呈时间与剂量依赖性。异甘草素能显著诱导NCI-H157细胞凋亡的发生,并上调ATF4、DDIT3和TNFRSF10B基因在细胞内的表达(P〈0.05-0.01)。结论异甘草素能够抑制人肺癌NCI-H157细胞的增殖,诱导凋亡发生,且与激活内质网应激反应有关。 展开更多
关键词 异甘草素 nci-H157 增殖 凋亡 内质网应激
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志苓胶囊对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞凋亡及h-TERT、CD44表达的影响 被引量:4
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作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 郑志宏 潘明继 胡建达 刘庭波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1382-1386,共5页
目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33... 目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33258荧光染色法检测凋亡细胞,RT-PCR、Western blot、流式细胞仪分别检测bcl-2、bax、hTERT基因mRNA和相应蛋白表达水平变化以及黏附分子CD44的表达变化。结果NCI-H446经不同的药物组处理后,倒置显微镜、Hochest33258荧光染色可观察到细胞凋亡形态学改变,bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平均有不同程度下降,bax基因表达水平则有不同程度增强,复方组改变最明显,各药物组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。中药组和西药组hTERT基因和蛋白表达水平未见明显改变,复方组表达水平下调,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。各药物组CD44表达水平降低,其中复方组降低水平最明显(P<0.01)。结论志苓胶囊可能通过下调NCI-H446细胞bcl-2、hTERT基因和CD44分子表达,增强bax基因表达,从而诱导NCI-H446细胞凋亡,抑制细胞黏附、转移。 展开更多
关键词 小细胞肺癌细胞株nci-H446 志苓胶囊 凋亡 HTERT CD44
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噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究 被引量:1
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作者 王军业 石磊 +4 位作者 戴淑琴 潘琴 巫玮 臧林泉 戎铁华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期868-872,共5页
目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物... 目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物信息学分析、比对;利用ELISA、细胞免疫化学、组织免疫化学方法测定多肽的亲和力和特异性。结果:经过三轮减性筛选发现,随机挑选的9个单克隆中,其中1个对NCI-H1299和A549均具有较高亲和力,将其命名为ZS-9,测序结果为CAT AAT AAG CAT CTT CCG TCT ACG CAG CCT CTT GCG,根据测序结果推导出ZS-9的氨基酸序列HNKHLPSTQPLA,生物信息学分析表明ZS-9的氨基酸序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性,表明我们筛选到一种新的肺癌相关抗原的配体。结论:利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞NCI-H1299和A549具有较高亲和力的多肽ZS-9,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 肺肿瘤 nci—H1299细胞 多肽ZS-9
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UbcH10基因沉默联合紫杉醇干预对NCI-H226细胞增殖活性和凋亡的影响 被引量:2
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作者 赵黎明 王良哲 +3 位作者 娄丽蓉 孙光远 方正 修清玉 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期891-895,共5页
目的观察小干扰RNA(siRNA)介导的UbcH10基因沉默联合紫杉醇处理对人肺鳞癌细胞株NCI-H226细胞增殖活性和凋亡的影响。方法化学合成针对UbcH10基因的siRNA-UbcH10序列,脂质体转染siRNA至NCI-H226细胞(siRNA转染组),转染后24 h,采用Real-T... 目的观察小干扰RNA(siRNA)介导的UbcH10基因沉默联合紫杉醇处理对人肺鳞癌细胞株NCI-H226细胞增殖活性和凋亡的影响。方法化学合成针对UbcH10基因的siRNA-UbcH10序列,脂质体转染siRNA至NCI-H226细胞(siRNA转染组),转染后24 h,采用Real-Time PCR和Western blotting分别检测UbcH10 mRNA和蛋白的表达水平,以未予任何转染细胞作为空白对照,以阴性序列转染细胞作为阴性对照。以紫杉醇(1μmol/L)处理siRNA转染及未转染NCI-H226细胞(siRNA+紫杉醇组和紫杉醇组),分别于转染后24、48 h收集细胞,MTT比色法检测细胞增殖;转染后24 h收集细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡;以未经紫杉醇处理的siRNA转染、阴性序列转染和未予转染的NCI-H226细胞作为siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。结果Real-Time PCR和Western blotting检测结果显示:转染后24 h,siRNA转染组UbcH10 mRNA和蛋白的表达较空白对照组和阴性对照组显著下调(P<0.01)。MTT比色法检测结果显示,siRNA转染组细胞增殖抑制率显著高于紫杉醇组和对照组(P<0.05),而siRNA+紫杉醇组细胞增殖抑制率显著高于siRNA转染组(P<0.05)。siRNA转染组细胞凋亡率显著高于紫杉醇组和对照组(P<0.05),而siRNA+紫杉醇组细胞凋亡率显著高于siRNA转染组(P<0.05),紫杉醇组与对照组细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 UbcH10基因沉默可显著增强NCI-H226细胞对于化疗药物紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 UbcH10基因沉默 小干扰RNA 紫杉醇 nci-H226细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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新化合物D261抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖及其作用机制 被引量:3
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作者 王萍 宋玉仙 +1 位作者 窦静杰 侯亚义 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期442-443,共2页
肺癌是当今恶性肿瘤死亡率最高的癌症。早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗。但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现。因此,亟需新的抗肿瘤药物。天然产物是小分子新药的主要来源。我们在对天然小分... 肺癌是当今恶性肿瘤死亡率最高的癌症。早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗。但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现。因此,亟需新的抗肿瘤药物。天然产物是小分子新药的主要来源。我们在对天然小分子化合物的筛选过程中发现D261(从固体发酵物中提取,纯度大于95%)具有潜在的抗肿瘤活性,且对非小细胞肺癌的抑制作用最显著。因此,本文对D261影响非小细胞肺癌NCI-H460及其相关机制作了初步探讨。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 nci-H460细胞 细胞增殖 凋亡 细胞周期 周期蛋白
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绿脓菌素通过PKC-NF-κB信号传导通路诱导人NCI-H292细胞表达IL-8 被引量:2
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作者 柴文戍 闫秀丽 +1 位作者 魏风芹 王敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期686-689,共4页
目的探讨绿脓菌素(PCN)对人气道上皮细胞株(NCI-H292细胞)表达IL-8的诱导作用及通过蛋白激酶C(PKC)和核因子κB(NF-κB)的调控机制。方法采用ELISA法对PCN诱导NCI-H292细胞分泌IL_8进行分析,应用Western blot检测NF-κB的蛋白... 目的探讨绿脓菌素(PCN)对人气道上皮细胞株(NCI-H292细胞)表达IL-8的诱导作用及通过蛋白激酶C(PKC)和核因子κB(NF-κB)的调控机制。方法采用ELISA法对PCN诱导NCI-H292细胞分泌IL_8进行分析,应用Western blot检测NF-κB的蛋白表达,观察PKC和NF-κB阻断剂对IL-8表达的影响。结果PCN可促进NCI-H292细胞IL-8的分泌,而且具有明显的量效关系。PKC阻断剂钙感光蛋白(Cal C)及NF-κB阻断剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)均能抑制IL-8的表达(P〈0.01)。PCN能直接诱导并迅速活化NF-κB,60~90min表达明显。结论PCN可能通过PKC信号通路促进NF-κB的活化,从而启动IL-8的高效表达。 展开更多
关键词 绿脓菌素(PCN) nci-H292细胞 蛋白激酶C(PKC) 核因子κB(NF-κB) IL-8
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bcl-2反义寡核苷酸增强NCI-H460细胞对紫杉特尔和放射线的敏感性 被引量:4
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作者 何冬梅 张洹 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期476-479,共4页
目的研究bcl2反义寡核苷酸作用于非小细胞肺癌细胞株NCI H460后,细胞对紫杉特尔、放射线敏感性的变化。方法紫杉特尔与bcl2反义寡核苷酸或无义寡核苷酸联合作用NCI H460细胞后,MTT法测紫杉特尔半数抑制率(IC50);NCI H460经bcl2反义寡核... 目的研究bcl2反义寡核苷酸作用于非小细胞肺癌细胞株NCI H460后,细胞对紫杉特尔、放射线敏感性的变化。方法紫杉特尔与bcl2反义寡核苷酸或无义寡核苷酸联合作用NCI H460细胞后,MTT法测紫杉特尔半数抑制率(IC50);NCI H460经bcl2反义寡核苷酸或无义寡核苷酸作用后,再用放射线照射,MTT法测定细胞生长抑制率;免疫荧光标记观测细胞Bcl2蛋白水平。结果靶向bcl2mRNA蛋白编码区反义寡核苷酸与紫杉特尔联合作用于NCI H460细胞后紫杉特尔的IC50值为(0.101±0.009)μmol/L,与不加寡核苷酸组紫杉特尔的IC50值[(0.183±0.018)μmol/L]或无义寡核苷酸联用紫杉特尔的IC50值[(0.179±0.016)μmol/L]相比,统计学上具有显著性差异(P<0.05)。bcl2反义寡核苷酸与放射线联合作用NCI H460细胞,显著抑制细胞的生长,并呈时间依赖性,分别与单用放射线及bcl2无义寡核苷酸联合放射线组相比,统计学上有显著性差异(P<0.05)。bcl2反义寡核苷酸分别与紫杉特尔、放射线作用于NCI H460细胞后显著抑制Bcl2蛋白表达,分别与单用紫杉特尔、放射线或无义寡核苷酸联用紫杉特尔、放射线相比,统计学上具有显著性差异(P<0.05)。结论靶向bcl2mRNA的反义寡核苷酸能增强NCI H460细胞对紫杉特尔、放射线的敏感性。 展开更多
关键词 bcl-2 反义寡核苷酸 nci-H460细胞 紫杉特尔 放射线 敏感性
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LPS协同PLA经JNK信号通路诱导NCI-H292细胞分泌IL-6、IL-8 被引量:2
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作者 陈冰 张玲玲 +1 位作者 刘玉文 范晓云 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期185-188,共4页
目的:研究多聚左旋精氨酸(PLA)和脂多糖(LPS)协同诱导气道上皮细胞NCI-H292分泌白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的信号通路机制。方法:将NCI-H292细胞分为空白组、PLA组、LPS组、PLA+LPS组,采用Western Blot检测各组JNK的磷酸化水平,并... 目的:研究多聚左旋精氨酸(PLA)和脂多糖(LPS)协同诱导气道上皮细胞NCI-H292分泌白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的信号通路机制。方法:将NCI-H292细胞分为空白组、PLA组、LPS组、PLA+LPS组,采用Western Blot检测各组JNK的磷酸化水平,并比较SP-600125作用与否对JNK磷酸化和IL-6、IL-8表达量的影响。结果 :PLA、LPS诱导NCI-H292 JNK磷酸化水平增加(P<0.05),两者有协同作用(P<0.01);LPS协同PLA诱导NCI-H292分泌IL-6、IL-8(P<0.05);SP-600125抑制PLA、LPS、PLA+LPS诱导的JNK磷酸化(P<0.05)和IL-6、IL-8分泌(P<0.05)。结论:JNK信号通路参与LPS协同PLA诱导NCIH292分泌IL-6和IL-8的过程。 展开更多
关键词 多聚左旋精氨酸 脂多糖 JNK信号通路 白介素-6 白介素-8 nci-H292
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山柰酚通过Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导非小细胞肺癌NCI-H1650细胞发生自噬进而影响其增殖 被引量:6
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作者 朱志明 周绮纯 +7 位作者 王娟娟 邓芷茵 唐青 吴万垠 王晰 万信良 莫瀚丹 王苏美 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期965-972,共8页
目的:探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法:常规培养NCI-H1650细胞,用不同浓度山柰酚处理细胞,用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响,用自噬双标记腺病毒mCherry-EGF... 目的:探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法:常规培养NCI-H1650细胞,用不同浓度山柰酚处理细胞,用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响,用自噬双标记腺病毒mCherry-EGFR-LC3感染实验检测山柰酚对NCI-H1650细胞发生自噬的影响,用WB法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中自噬相关蛋白及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达,用qPCR法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中Met mRNA的表达。采用荧光素酶标记A549-luc细胞建立裸鼠移植瘤模型后用山柰酚进行处理,用活体动物成像技术观察移植瘤生长情况,用WB法检测移植瘤组织中自噬相关蛋白以及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果:山柰酚能显著抑制NCI-H1650细胞的增殖能力(P<0.05),山柰酚处理后NCI-H1650细胞内的自噬小体数量明显增加(P<0.05)、自噬标志蛋白LC3B和beclin1表达均明显上调(均P<0.05)、P62表达明显下调(P<0.05),山柰酚可明显抑制NCI-H1650细胞中Met mRNA和蛋白的表达(均P<0.05)、抑制p-PI3K p85、PI3K p85、p-Akt和p-mTOR蛋白表达(均P<0.05)。山柰酚抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.05)和影响其体内自噬、Met/PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达(均P<0.05)。结论:山柰酚通过影响Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导NSCLC NCI-H1650细胞发生自噬,进而抑制其增殖能力。 展开更多
关键词 山柰酚 非小细胞肺癌 nci-H1650细胞 A549细胞 细胞自噬 Met/PI3K/Akt/mTOR通路 增殖
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辣椒素对人大细胞肺癌NCI-H460细胞的影响 被引量:2
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作者 任公平 吕正鑫 +1 位作者 孙琳林 NA Hui 《医药导报》 CAS 2016年第2期132-136,共5页
目的观察辣椒素对人大细胞肺癌细胞NCI-H460增殖、迁移与侵袭能力的影响,探讨其抗非小细胞肺癌的可能机制。方法体外培养NCI-H460细胞,实验组以不同终浓度辣椒素进行处理,对照组加入等体积二甲亚砜,其余条件与实验组完全一致。采用平板... 目的观察辣椒素对人大细胞肺癌细胞NCI-H460增殖、迁移与侵袭能力的影响,探讨其抗非小细胞肺癌的可能机制。方法体外培养NCI-H460细胞,实验组以不同终浓度辣椒素进行处理,对照组加入等体积二甲亚砜,其余条件与实验组完全一致。采用平板克隆形成实验、划痕修复实验、Transwell小室细胞侵袭实验,观察辣椒素对NCI-H460细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并采用Western blot分析检测E-cadherin和N-cadherin、Vimentin、Snail的表达。结果100,200,300μmol·L-1辣椒素下NCI-H460细胞克隆形成率分别为(91.17±24.38)%,(43.22±12.91)%和(15.71±4.26)%,对照组为(99.53±21.25)%;25,50,100μmol·L-1辣椒素对NCI-H460细胞迁移率分别为(85.83±17.43)%,(37.92±10.16)%和(21.08±6.39)%,对照组为(93.04±20.23)%;NCI-H460细胞侵袭穿膜细胞数分别为(99.0±18.2),(75.0±17.9)和(52.0±14.1),对照组为(107.0±20.4);中、高浓度辣椒素可显著抑制NCI-H460细胞增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),显著上调E-cadherin表达水平,并显著下调N-cadherin、Vimentin、snail表达水平(P<0.05)。结论辣椒素能明显抑制NCI-H460细胞增殖,降低迁移和侵袭能力,其机制可能与上调E-cadherin表达并与其下调Ncadherin、Vimentin、Snail表达有关。 展开更多
关键词 辣椒素 增殖 迁移 侵袭 nci-H460细胞
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