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拟南芥ProNAS4-GUS转基因植株的构建及表达模式
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作者 贾亚峰 樊婷婷 +3 位作者 吴席 马倩 张震 王婷婷 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期508-511,共4页
为了进一步研究NAS4基因的表达模式及其在缺铁胁迫下的响应模式,文章利用从野生型拟南芥中提取的基因组DNA作为模板,克隆获得NAS4启动子片段,将片段与pART27-GUS质粒进行酶切处理,然后将片段与质粒进行连接,将连接产物通过热激转化法转... 为了进一步研究NAS4基因的表达模式及其在缺铁胁迫下的响应模式,文章利用从野生型拟南芥中提取的基因组DNA作为模板,克隆获得NAS4启动子片段,将片段与pART27-GUS质粒进行酶切处理,然后将片段与质粒进行连接,将连接产物通过热激转化法转入大肠杆菌中,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定获得阳性菌株。质粒测序正确后将重组质粒通过电击转化法转入农杆菌中,经过PCR鉴定得到阳性菌株后,用浸花法侵染野生型拟南芥;通过抗性筛选和PCR鉴定得到ProNAS4-GUS转基因植株,并对获得的转基因植株进行GUS染色分析,发现NAS4基因在幼苗的根部和叶脉中都有所表达。实验结果为研究NAS4基因在植物缺铁胁迫下的响应模式奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 nas4基因 重组质粒 转基因植株 GUS染色分析
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