[目的]研究不同提取方法对佛手多糖理化性质及乙醇脱氢酶活性的影响,为改进佛手多糖生产方式和佛手多糖解酒研究提供依据。[方法]分别采用传统水提法、超声辅助法、微波辅助法、超声-微波协同提取法和复合酶法提取佛手多糖,探讨5种提取...[目的]研究不同提取方法对佛手多糖理化性质及乙醇脱氢酶活性的影响,为改进佛手多糖生产方式和佛手多糖解酒研究提供依据。[方法]分别采用传统水提法、超声辅助法、微波辅助法、超声-微波协同提取法和复合酶法提取佛手多糖,探讨5种提取方法对多糖得率、糖醛酸含量、分子量、单糖组成、红外光谱和乙醇脱氢酶活性的影响。[结果]水提法和超声-微波协同提取多糖得率最高,分别为(4.26±0.21)%和(4.15±0.14)%。不同方法提取的佛手多糖分子量大小存在差异,其中复合酶法提取多糖平均分子量为617.85 k D,约是水提多糖分子量的4倍。5种多糖均呈现出典型的吡喃型多糖和α型糖苷键吸收,单糖组成均以阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖为主。超声-微波协同提取多糖对乙醇脱氢酶激活能力最强,可达(46.58±1.76)%,而传统水提多糖抑制乙醇脱氢酶活性。[结论]超声-微波协同提取佛手多糖得率高且所需时间短,对乙醇脱氢酶激活能力强,推测乙醇脱氢酶激活能力与多糖分子量大小、半乳糖醛酸连接方式有关。展开更多
在谷氨酸棒状杆菌( Corynebacterium glutamicum )SNK118中表达NADP +依赖型的3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因,提高胞内NADPH水平,以提高 L -精氨酸( L -Arginine)和 L -鸟氨酸(L-Ornithine)发酵产量。通过NCBI数据库检索,选取了3个不同来...在谷氨酸棒状杆菌( Corynebacterium glutamicum )SNK118中表达NADP +依赖型的3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因,提高胞内NADPH水平,以提高 L -精氨酸( L -Arginine)和 L -鸟氨酸(L-Ornithine)发酵产量。通过NCBI数据库检索,选取了3个不同来源的3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因。经测定酶活力,最终选择糖丁基梭菌( Clostridium saccharobutylicum) DSM13864来源的NADP +依赖型的3-磷酸甘油醛脱氢酶基因( CsgapC )。构建了产 L -精氨酸的重组菌SNK118/pXMJ19- CsgapC,当摇瓶发酵70 h时产 L -精氨酸11.55 g/L,糖酸转化率0.13 g/g,与对照菌SNK118/pXMJ19相比,精氨酸产量和糖酸转化率分别提高了26%和10.2%。在 L -鸟氨酸生产菌株SNK118Δ argF Δ argR 中重组表达 CsgapC,重组菌SNK118Δ argF Δ argR /pXMJ19- CsgapC 摇瓶发酵70 h产 L -鸟氨酸27.76 g/L,糖酸转化率0.274 g/g,与对照菌SNK118Δ argF Δ argR /pXMJ19相比, L -鸟氨酸产量和糖酸转化率分别提高了20.1%和15.6%。结果表明,异源表达 CsgapC 有助于提高谷氨酸棒杆菌发酵生产 L -精氨酸和 L -鸟氨酸的水平。展开更多
文摘[目的]研究不同提取方法对佛手多糖理化性质及乙醇脱氢酶活性的影响,为改进佛手多糖生产方式和佛手多糖解酒研究提供依据。[方法]分别采用传统水提法、超声辅助法、微波辅助法、超声-微波协同提取法和复合酶法提取佛手多糖,探讨5种提取方法对多糖得率、糖醛酸含量、分子量、单糖组成、红外光谱和乙醇脱氢酶活性的影响。[结果]水提法和超声-微波协同提取多糖得率最高,分别为(4.26±0.21)%和(4.15±0.14)%。不同方法提取的佛手多糖分子量大小存在差异,其中复合酶法提取多糖平均分子量为617.85 k D,约是水提多糖分子量的4倍。5种多糖均呈现出典型的吡喃型多糖和α型糖苷键吸收,单糖组成均以阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖为主。超声-微波协同提取多糖对乙醇脱氢酶激活能力最强,可达(46.58±1.76)%,而传统水提多糖抑制乙醇脱氢酶活性。[结论]超声-微波协同提取佛手多糖得率高且所需时间短,对乙醇脱氢酶激活能力强,推测乙醇脱氢酶激活能力与多糖分子量大小、半乳糖醛酸连接方式有关。
