蛹虫草子实体中N6-(2-羟乙基)-腺苷的分离纯化及抗肿瘤作用 被引量：24

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作者 朱丽娜 薛俊杰 +3 位作者 刘艳芳 周帅 张劲松 唐庆九 《食用菌学报》 北大核心 2013年第1期62-65,共4页

为明确蛹虫草(Cordyceps militaris)核苷类化合物HPLC图谱中未知峰化学成分,运用NKA-II大孔吸附树脂、C-18柱分离纯化和结晶等方法,从蛹虫草子实体水提物中得到了未知峰的结晶粉末,通过1 HNMR,13 CNMR、ESI-MS等波谱分析,鉴定出化合物为... 为明确蛹虫草(Cordyceps militaris)核苷类化合物HPLC图谱中未知峰化学成分,运用NKA-II大孔吸附树脂、C-18柱分离纯化和结晶等方法,从蛹虫草子实体水提物中得到了未知峰的结晶粉末,通过1 HNMR,13 CNMR、ESI-MS等波谱分析,鉴定出化合物为N6-(2-羟乙基)-腺苷。该化合物对K562肿瘤细胞具有抑制作用,半数抑制有效浓度为0.1μmol/mL。 展开更多

关键词 蛹虫草 核苷 n6-(2-羟乙基)-腺苷 K562肿瘤细胞

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细脚棒束孢E3菌株产N^6-(2-羟乙基)腺苷的培养基及前体物筛选 被引量：4

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作者 雷帮星 何劲 +4 位作者 李世楠 曾祥羽 康冀川 文庭池 桂江伟 《食用菌学报》 北大核心 2013年第2期46-51,共6页

为研究有利于E3菌株产N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的培养基组分、前体物及氨基酸,以查氏培养基作为基础培养基,液体静置发酵,分别对碳氮源、无机盐、前体物和氨基酸进行筛选,结果表明:碳、氮源最好的是淀粉和... 为研究有利于E3菌株产N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的培养基组分、前体物及氨基酸,以查氏培养基作为基础培养基,液体静置发酵,分别对碳氮源、无机盐、前体物和氨基酸进行筛选,结果表明:碳、氮源最好的是淀粉和(NH4)2HPO4;无机盐只有钾盐能促进菌株产生HEA,效果最好的是KH2PO4;前体物和氨基酸中腺苷和腺嘌呤促进菌株累积HEA能力相同,精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、组氨酸、色氨酸、L-谷氨酸和丝氨酸等均能促进菌株产HEA,精氨酸效果最好,菌丝体中HEA含量达2068.21±55.34μg/g,HEA产量达13.10±1.48mg/L。 展开更多

关键词 细脚棒束孢E3菌株 n6 (2-羟乙基)腺苷 培养基

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细脚棒束孢E3菌株产N6-(2-羟乙基)腺苷的液体发酵条件优化 被引量：4

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作者 雷帮星 何劲 +3 位作者 康冀川 余信 桂江伟 文庭池 《食用菌学报》 北大核心 2014年第2期63-66,共4页

以N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的产量为评价指标,查氏培养基为基础培养基,分别筛选液体静置发酵的光照、温度、时间、培养基初始pH、装液量和接种量,结果表明:有利于细脚棒束孢(Isaria tenuipes)E3菌株产HEA... 以N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的产量为评价指标,查氏培养基为基础培养基,分别筛选液体静置发酵的光照、温度、时间、培养基初始pH、装液量和接种量,结果表明:有利于细脚棒束孢(Isaria tenuipes)E3菌株产HEA的发酵条件为黑暗或荧光、黄光,培养温度为25~28℃,培养时间为110d,培养基的初始pH为6.0~7.0,装液量为50%,接种量为2.5%。 展开更多

关键词 细脚棒束孢 n6-(2-羟乙基)腺苷 发酵

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不同大孔树脂对粉被虫草中N^6-(2-羟乙基)腺苷的分离特性研究 被引量：1

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作者 唐远江 雷帮星 +1 位作者 康冀川 刘玉秋 《山地农业生物学报》 2015年第6期53-57,78,共6页

为选择合适的大孔树脂分离粉被虫草中的N6-(2-羟乙基)腺苷(HEA),通过静态吸附与解吸附试验对4种大孔树脂吸附和解吸附HEA的效果进行比较,并对洗脱条件进行优化。结果表明DM-130树脂对HEA的吸附量最大、解吸率较高;该树脂的最佳动态吸附... 为选择合适的大孔树脂分离粉被虫草中的N6-(2-羟乙基)腺苷(HEA),通过静态吸附与解吸附试验对4种大孔树脂吸附和解吸附HEA的效果进行比较,并对洗脱条件进行优化。结果表明DM-130树脂对HEA的吸附量最大、解吸率较高;该树脂的最佳动态吸附条件是上样量为2倍树脂床体积(BV),吸附时间为6 h;最佳动态洗脱条件是依次用3 BV蒸馏水,1 BV 5%乙醇和3.5 BV 10%乙醇冲洗柱床。在该条件下,经HPLC分析测定,洗脱液中HEA的峰面积百分比达到89.15%。 展开更多

关键词 大孔树脂 n6-(2-羟乙基)腺苷 吸附 解吸附

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蝉花中N^(6)-(2-羟乙基)-腺苷提取工艺优化及结构鉴定 被引量：1

5

作者 艾仁丽 谭艾娟 吕世明 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2023年第2期65-74,共10页

在单因素实验基础上,采用响应面法考察液料比、水浴温度、水浴时间对提取物中N6-(2-羟乙基)-腺苷[N^(6)-(2-hydroxyethyl) adenosine,HEA]含量的影响,优化出HEA的最佳提取工艺:以超纯水为溶剂、液料比118∶1、超声时间25 min、水浴温度2... 在单因素实验基础上,采用响应面法考察液料比、水浴温度、水浴时间对提取物中N6-(2-羟乙基)-腺苷[N^(6)-(2-hydroxyethyl) adenosine,HEA]含量的影响,优化出HEA的最佳提取工艺:以超纯水为溶剂、液料比118∶1、超声时间25 min、水浴温度24℃、水浴时间3.8 h,获得提取物中HEA含量为(0.836±0.030) mg·g^(-1)。采用大孔树脂、酸性氧化铝层析柱和半制备高效液相色谱仪(semi preparative high performance liquid chromatography,SP-HPLC)分离纯化提取液中HEA,采用核磁共振及电喷雾电离质谱(electrospray ionization mass spectrometry,ESI-MS)和核磁共振氢谱(proton nuclear magnetic resonance spectroscopy,^(1)H NMR)鉴定分离出的物质为HEA,经高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析其纯度为99.32%。 展开更多

关键词 n^(6)-(2-羟乙基)-腺苷(HEA) 高效液相色谱法(HPLC) 响应面法(RSM) 结构鉴定

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HPLC法检测蝉拟青霉中N6-(2-羟乙基)-腺苷含量

6

作者 李慧雯 艾仁丽 谭艾娟 《湖北农业科学》 2022年第19期114-118,共5页

为了建立蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)5704s中N6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA)含量测定方法,以去离子水为溶剂,采用超声辅助水浴法提取HEA,基于HPLC法测定其含量。经优化确定色谱条件为Agilent ZORBAX Extend-C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5... 为了建立蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)5704s中N6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA)含量测定方法,以去离子水为溶剂,采用超声辅助水浴法提取HEA,基于HPLC法测定其含量。经优化确定色谱条件为Agilent ZORBAX Extend-C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸),梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果显示,HEA浓度为0.25~100.00μg/mL时,峰面积和HEA含量之间线性关系良好,R^(2)=0.9999,仪器的检出限为0.25μg/mL,平均回收率为97.73%~108.95%,RSD为0.37%~1.29%,测得样品中HEA含量为0.78 mg/g。该方法简便、快捷、准确、稳定,适用于蝉拟青霉5704s菌丝体中HEA的测定。 展开更多

关键词 蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae) n6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA) HPLC 检测

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蛹虫草N6-(2-羟乙基)腺苷与多糖组合给药对小鼠睡眠的影响 被引量：4

7

作者 聂开美 杜思邈 +4 位作者 陈梅 李成溪 吴玉乾 陈玉皎 曹军 《食药用菌》 2021年第3期216-221,共6页

为开发出预防和治疗失眠的食用菌保健食品或药品,以蛹虫草为原料获得虫草多糖和N6-(2-羟乙基)腺苷,采用45%的虫草多糖配比55%的N6-(2-羟乙基)腺苷组合给药小白鼠,通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验等,观察组合给药对小... 为开发出预防和治疗失眠的食用菌保健食品或药品,以蛹虫草为原料获得虫草多糖和N6-(2-羟乙基)腺苷,采用45%的虫草多糖配比55%的N6-(2-羟乙基)腺苷组合给药小白鼠,通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验等,观察组合给药对小鼠镇静催眠的的影响,并进一步开展小鼠急性毒性实验初步考察配比给药的安全剂量。结果:N6-(2-羟乙基)腺苷与虫草多糖在实验配比条件下给药,可改善小鼠睡眠质量,与单独N6-(2-羟乙基)腺苷给药相比,提高了小鼠入睡率。 展开更多

关键词 蛹虫草 n6-(2-羟乙基)腺苷 虫草多糖 药理作用 睡眠

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植物细胞分裂素ortho-Topolin Riboside对人白血病细胞株THP-1的抗癌活性及机制初探

8

作者 邓营营 李茗达 +4 位作者 郭祎 崔宝程 黄姣 王黎 崔昌浩 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第6期299-304,共6页

本研究以人急性髓性白血病细胞株THP-1为研究对象,初步探讨其抗癌活性及作用机制。通过光学显微镜观察N6-2-苄胺羟基腺苷(oTR)作用后THP-1细胞形态学和数目变化;CCK-8法检测oTR对THP-1细胞的增殖抑制作用,并用核苷转运体拮抗剂和腺苷受... 本研究以人急性髓性白血病细胞株THP-1为研究对象,初步探讨其抗癌活性及作用机制。通过光学显微镜观察N6-2-苄胺羟基腺苷(oTR)作用后THP-1细胞形态学和数目变化;CCK-8法检测oTR对THP-1细胞的增殖抑制作用,并用核苷转运体拮抗剂和腺苷受体拮抗剂预处理细胞检测oTR进入细胞的方式;用流式细胞仪分析oTR作用对THP-1细胞凋亡和分化的影响。结果表明,oTR可显著(P<0.05)抑制THP-1细胞的增殖能力,且呈浓度依赖性;核苷转运体拮抗剂Dipyridamole预处理THP-1细胞后,可明显逆转oTR的增殖抑制作用,而4种腺苷受体拮抗剂(DPCPX、SCH58261、MRS1754和MRA1191)则无显著影响;oTR可诱导处理组细胞亚倍体峰比例显著(P<0.05)高于对照组,且细胞髓系分化标志蛋白CD11b表达明显升高。以上结果表明细胞分裂素oTR通过核苷转运体途径进入THP-1细胞,显著(P<0.05)抑制细胞的增殖,并可诱导THP-1细胞发生凋亡和髓系分化。 展开更多

关键词 n6-2-苄胺羟基腺苷 抗肿瘤活性 白血病 THP-1细胞

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小菜蛾腺苷受体基因PxAdoR克隆及杀虫靶标作用

9

作者 方鸣 柴一秋 +3 位作者 陈官菊 章金明 吕要斌 黄勃 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期712-720,共9页

利用蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera代谢产物N6-（2-羟乙基）腺苷（HEA）作用于小菜蛾Plutella xylostella L.获得差异表达的片段,采用RT-PCR和RACE技术从小菜蛾中克隆全长1828 bp的小菜蛾腺苷受体（Plutella xylostella adenosine ... 利用蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera代谢产物N6-（2-羟乙基）腺苷（HEA）作用于小菜蛾Plutella xylostella L.获得差异表达的片段,采用RT-PCR和RACE技术从小菜蛾中克隆全长1828 bp的小菜蛾腺苷受体（Plutella xylostella adenosine receptor,Px Ado R）基因,通过生物信息学软件预测和分析蛋白质结构,Px Ado R为分子量49.2 k D,没有信号肽,疏水性不稳定蛋白,具有7次跨膜螺旋结构的一类G蛋白偶联受体（G protein coupled receptor,GPCRs）。利用HEA及哺乳动物腺苷受体A2a R抑制剂SCH58261处理小菜蛾2龄幼虫,结果显示联合使用HEA和SCH58261后36~60 h,可使HEA引起的小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率显著降低（42.7%~53.9%,P〈0.05）;而联合用药后36、48、60 h小菜蛾2龄幼虫体重增长抑制率由43.3%、38.3%、46.2%显著降低（P〈0.05）到13.2%、10.3%、8.6%。本研究表明SCH58261能显著降低HEA引起的小菜蛾2龄幼虫的死亡率和体重增长抑制率,HEA可能是通过Px Ado R而起作用,Px Ado R基因可以作为新的杀虫靶点用于害虫控制研究。 展开更多

关键词 腺苷受体 基因克隆 腺苷受体抑制剂 蛋白结构 n6-(2-羟乙基)腺苷

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METTL3通过IGF2BP2依赖性方式参与m6A修饰调控HBV复制的机制

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作者 余玲 张自力 +3 位作者 曾蓉 张节 王鹏 潘万龙 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期442-449,共8页

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。... 目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。方法以HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15及其亲本细胞HepG2为模型,斑点杂交分析m6A修饰水平,RT-qPCR和Western blot检测METTL3、IGF2BP2表达。生物信息学及免疫共沉淀分析METTL3与m6A阅读蛋白及其相互作用。将METTL3质粒、METTL3 siRNA和(或)IGF2BP2 siRNA转染至HepG2.2.15细胞,分别记为OE-METTL3、si-METTL3、si-IGF2BP2、OE-METTL3+si-IGF2BP2、si-METTL3+si-IGF2BP2、Control组;qPCR检测HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA拷贝数,RT-qPCR或Western blot检测HBV pgRNA、METTL3、IGF2BP2表达。结果与HepG2细胞相比,在HepG2.2.15细胞中m6A修饰富集,METTL3、IGF2BP2表达水平升高(P<0.05)。与Control组相比,在OE-METTL3组中m6A修饰富集增强,IGF2BP2表达水平升高(P<0.05),HBV复制相关指标(HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA)升高(P<0.01);在si-METTL3组中则相反。生物信息学分析及免疫共沉淀显示METTL3与IGF2BP2为互作蛋白。与Control组相比,在si-IGF2BP2组中m6A修饰富集减弱,METTL3表达水平降低(P<0.01),HBV复制相关指标降低(P<0.01)。在OE-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较OE-METTL3组降低(P<0.001)。在si-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较si-METTL3组、si-IGF2BP2组降低(P<0.05)。结论METTL3依赖IGF2BP2富集m6A通过增强HBV rcDNA转化为cccDNA,进而增强pgRNA逆转录复制病毒。 展开更多

关键词 甲基转移酶样3 胰岛素样生长因子2 mRnA结合蛋白2 n6-甲基腺苷 乙型肝炎病毒

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三维全息原子场作用矢量用于HEPT类抗艾滋病药物的QSAR研究 被引量：11

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作者 仝建波 周鹏 +4 位作者 张生万 梁桂兆 田菲菲 李美萍 李声时 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期721-725,共5页

采用本实验室新近提出的三维全息原子场作用矢量表征34个1-[(2-羟乙氧)甲基]-6-苯硫基胸腺嘧啶(HEPT)类抗艾滋病药物结构并与其活性建立定量构效关系模型.采用逐步回归对变量进行筛选后,运用多元线性回归(multiplelinearregression,MLR... 采用本实验室新近提出的三维全息原子场作用矢量表征34个1-[(2-羟乙氧)甲基]-6-苯硫基胸腺嘧啶(HEPT)类抗艾滋病药物结构并与其活性建立定量构效关系模型.采用逐步回归对变量进行筛选后,运用多元线性回归(multiplelinearregression,MLR)建模的复相关系数(Rcu2m)、交互校验的复相关系数(Qcu2m)和模型的标准偏差(SD)分别为Rcu2m=0.928、Qcu2m=0.883与SD=0.43,均优于Hancsh报道的值(Rcu2m=0.911、Qcu2m=0.863与SD=0.45).模型具有良好的稳定性和预测能力,表明三维全息原子场作用矢量能较好表征该类分子结构信息,值得进一步推广应用. 展开更多

关键词 三维全息原子场作用矢量 1-[(2-羟乙氧基)甲基]-6-(苯巯基)胸腺嘧啶 定量构效关系 抗艾滋病药物

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WTAP通过调控SIRT1诱导小胶质细胞M1型极化的研究

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作者 周虹秀 高煦 侯胜平 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期620-629,共10页

目的探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制。方法用100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白... 目的探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制。方法用100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和N6-甲基腺苷(m6A)相关基因的表达,在HMC3小胶质细胞中转染RNAi慢病毒敲低WTAP,使用实时荧光定量PCR和Western blot检测敲低效率,Western blot检测敲低HMC3小胶质细胞WTAP后促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白表达,Western blot检测敲低WTAP后HMC3小胶质细胞沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)、COP1、USP18、EP4、促炎转录因子和部分炎症相关通路受体的表达,使用SIRT1激动剂SRT1720和SIRT1抑制剂EX527分别处理空载病毒组和敲低WTAP组HMC3细胞后,Western blot检测c/EBPβ的表达。结果与空白对照组比较,100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导的HMC3细胞IL-6、IL-1β、TNF-α表达上调(P<0.05)。M1极化的HMC3小胶质细胞中WTAP高表达(P<0.05)。敲低WTAP后,HMC3细胞促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达降低(P<0.05),SIRT1表达升高(P<0.05),且促炎转录因子c/EBPβ表达降低(P<0.05)。SIRT1激动剂SRT1720使空载病毒组相对高表达的c/EBPβ降低(P<0.01)。SIRT1抑制剂EX527使敲低WTAP的HMC3细胞相对低表达的c/EBPβ升高(P<0.05)。结论WTAP促进HMC3小胶质细胞M1极化,其作用机制可能与通过调控SIRT1表达进而影响c/EBPβ信号通路有关。 展开更多

关键词 小胶质细胞 Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白 沉默信息调节因子2相关酶1 n6-甲基腺苷 细胞极化

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