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检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价
被引量:
4
1
作者
毛骞
陈翠翠
+3 位作者
梁焕坤
刘鹏娥
钟树海
李来庆
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期770-776,共7页
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu...
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。
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关键词
β胶联降解产物
N端中分子片段
骨质疏松症
双抗体夹心
双标记时间分辨免疫荧光分析
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职称材料
题名
检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价
被引量:
4
1
作者
毛骞
陈翠翠
梁焕坤
刘鹏娥
钟树海
李来庆
机构
北华大学附属医院内分泌科
广州优迪生物科技股份有限公司
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期770-776,共7页
基金
吉林省卫计委卫生技术创新项目(2017J076)。
文摘
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。
关键词
β胶联降解产物
N端中分子片段
骨质疏松症
双抗体夹心
双标记时间分辨免疫荧光分析
Keywords
β-cross-linked C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen
n-terminal middle molecular fragment of osteocalein
osteoporosis
double antibody sandwich
double-labeled time-resolved immunofluorescence analysis
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价
毛骞
陈翠翠
梁焕坤
刘鹏娥
钟树海
李来庆
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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