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自诱导系统在酶促合成2’-脱氧胞苷中的应用
被引量：
7
1
作者
王玺
段胜林
+3 位作者
熊舒莉
郑桂兰
张贵友
王洪钟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期225-232,共8页
旨在高效合成2’-脱氧胞苷(d Cyd)。DCyd作为一类重要的药物中间体,能够用于合成吉西他滨(d Fd C)、扎西他滨(dd C)等多种抗病毒或抗肿瘤的药物。采用ZYM-Fe-5052自诱导培养基对含有N-脱氧核糖转移酶II(NDT)的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导...
旨在高效合成2’-脱氧胞苷(d Cyd)。DCyd作为一类重要的药物中间体,能够用于合成吉西他滨(d Fd C)、扎西他滨(dd C)等多种抗病毒或抗肿瘤的药物。采用ZYM-Fe-5052自诱导培养基对含有N-脱氧核糖转移酶II(NDT)的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,所得完整菌体直接用于催化合成d Cyd。结果表明,自诱导系统不仅无需额外添加诱导剂,还能够达到较高的菌体密度,且与LB诱导系统所得菌体在合成d Cyd方面具有同样高效的催化活性。2’-脱氧胸苷(d Thd)和胞嘧啶的浓度比为1∶3时,产物转化率可高达86.5%。合成d Cyd的最适反应条件为:2’-脱氧胸苷(d Thd)和胞嘧啶的浓度比为1∶1.5,p H6.5的磷酸缓冲液,1 mg/m L的菌体量,终体系10 m L,30℃条件下反应1 h,产物转化率可达71.9%。此方法还可用于制备其他核苷类似物,具有广泛的适用性和应用前景。
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关键词
生物催化
n-脱氧核糖转移酶
2’-
脱氧
胞苷
自诱导系统
核苷类似物
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职称材料
酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷
被引量：
1
2
作者
王丽慧
丁庆豹
+3 位作者
欧伶
许彦梅
张春燕
王玥
《华东理工大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期325-329,共5页
将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量...
将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量表达N-脱氧核糖转移酶II。在此酶作用下,以5-杂氮胞嘧啶和脱氧胸苷为底物,生成胸腺嘧啶和目标产物5-杂氮-2’-脱氧胞苷。最佳反应条件为:底物浓度均为2 mmol/L,20 mmol/LTris-HCl缓冲液(pH为7.1),200μL酶,最终反应体积2 mL,55℃反应2 h,转化率可达61%。
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关键词
n-脱氧核糖转移酶
II
5-杂氮-2’-
脱氧
胞苷
合成
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职称材料
题名
自诱导系统在酶促合成2’-脱氧胞苷中的应用
被引量：
7
1
作者
王玺
段胜林
熊舒莉
郑桂兰
张贵友
王洪钟
机构
清华大学生命科学学院
中国食品发酵工业研究院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期225-232,共8页
基金
国家自然科学基金项目(21176138)
国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金项目(J1103506
+1 种基金
J1030622
J1310020)
文摘
旨在高效合成2’-脱氧胞苷(d Cyd)。DCyd作为一类重要的药物中间体,能够用于合成吉西他滨(d Fd C)、扎西他滨(dd C)等多种抗病毒或抗肿瘤的药物。采用ZYM-Fe-5052自诱导培养基对含有N-脱氧核糖转移酶II(NDT)的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,所得完整菌体直接用于催化合成d Cyd。结果表明,自诱导系统不仅无需额外添加诱导剂,还能够达到较高的菌体密度,且与LB诱导系统所得菌体在合成d Cyd方面具有同样高效的催化活性。2’-脱氧胸苷(d Thd)和胞嘧啶的浓度比为1∶3时,产物转化率可高达86.5%。合成d Cyd的最适反应条件为:2’-脱氧胸苷(d Thd)和胞嘧啶的浓度比为1∶1.5,p H6.5的磷酸缓冲液,1 mg/m L的菌体量,终体系10 m L,30℃条件下反应1 h,产物转化率可达71.9%。此方法还可用于制备其他核苷类似物,具有广泛的适用性和应用前景。
关键词
生物催化
n-脱氧核糖转移酶
2’-
脱氧
胞苷
自诱导系统
核苷类似物
Keywords
Biocatalysis
n-
deoxyribosyltransferase
2’-deoxycytidine
Auto-induction system
Nucleoside analogues
分类号
TQ460.1 [化学工程—制药化工]
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职称材料
题名
酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷
被引量：
1
2
作者
王丽慧
丁庆豹
欧伶
许彦梅
张春燕
王玥
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
上海璞诚生物科技有限公司
出处
《华东理工大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期325-329,共5页
基金
上海市宝山区2010年度"产学研"项目
文摘
将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量表达N-脱氧核糖转移酶II。在此酶作用下,以5-杂氮胞嘧啶和脱氧胸苷为底物,生成胸腺嘧啶和目标产物5-杂氮-2’-脱氧胞苷。最佳反应条件为:底物浓度均为2 mmol/L,20 mmol/LTris-HCl缓冲液(pH为7.1),200μL酶,最终反应体积2 mL,55℃反应2 h,转化率可达61%。
关键词
n-脱氧核糖转移酶
II
5-杂氮-2’-
脱氧
胞苷
合成
Keywords
n-
deoxyribosyltransferase-II
5-aza-2＇-CdR
synthesis
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
自诱导系统在酶促合成2’-脱氧胞苷中的应用
王玺
段胜林
熊舒莉
郑桂兰
张贵友
王洪钟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
7
在线阅读
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职称材料
2
酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷
王丽慧
丁庆豹
欧伶
许彦梅
张春燕
王玥
《华东理工大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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职称材料
已选择
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