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用双向凝胶电泳分析低浓度烷化剂N-甲基-N′-硝基-N-亚硝胍引起的人羊膜FL细胞蛋白质的表达差异 被引量:1
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作者 金静华 余应年 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期373-377,共5页
目的 为了研究哺乳类细胞受到低浓度烷化剂攻击后蛋白表达谱的变化。方法 用双向凝胶电泳结合相应的 2 DE分析软件比较烷化剂N 甲基 N′ 硝基 N 亚硝基胍 (MNNG)处理组和二甲基亚砜对照组的FL细胞的蛋白质组的表达差异。结果MNNG... 目的 为了研究哺乳类细胞受到低浓度烷化剂攻击后蛋白表达谱的变化。方法 用双向凝胶电泳结合相应的 2 DE分析软件比较烷化剂N 甲基 N′ 硝基 N 亚硝基胍 (MNNG)处理组和二甲基亚砜对照组的FL细胞的蛋白质组的表达差异。结果MNNG处理后的FL细胞中检测到 10个新出现的蛋白点 ,同时有 5个蛋白点在MNNG处理后消失 ;有30个点在表达量上有显著变化 ,其中 16个点在MNNG处理后表达升高 ,另 14个点则表达量降低。结论 在低浓度烷化剂攻击的FL细胞中有一系列蛋白质表达水平的改变 ,提示这些发生改变的蛋白质可能参与了哺乳类细胞非定标性突变的发生。 展开更多
关键词 n-甲基-n′-硝基-n-亚硝胍 双向凝胶电泳 蛋白质组 差异表达 烷化剂 蛋白表达谱 基因突变 DNA损伤 细胞毒性
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塞来昔布对MNNG诱导的大鼠胃腺癌组织Bax、Bcl-2、Fas表达的影响 被引量:4
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作者 唐保东 曾志荣 胡品津 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第B06期16-19,共4页
[目的]探讨塞来昔布预防胃癌的非COX依赖性途径。[方法]86只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为6组:A组动物(5只)自由饮用蒸馏水不作特殊处理;B组动物(16只)饮用含N-甲基-N’-硝基-亚硝基胍(MNNG)100μg/mL的蒸馏水;C组(16只)、D组(17只)、E... [目的]探讨塞来昔布预防胃癌的非COX依赖性途径。[方法]86只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为6组:A组动物(5只)自由饮用蒸馏水不作特殊处理;B组动物(16只)饮用含N-甲基-N’-硝基-亚硝基胍(MNNG)100μg/mL的蒸馏水;C组(16只)、D组(17只)、E组(16只)、F组(16只)动物除饮用含MNNG 100μg/mL的蒸馏水外,C组动物还灌喂吲哚美辛3 mg/kg,1次/d,D组、E组、F组动物分别灌喂塞来昔布5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg,1次,d。以上处理连续10个月,处理因素结束后2个月内处死动物观察腺胃肿瘤的发生率,用实时PCR和免疫组化方法检测各组动物胃肿瘤组织Bax、Bcl-2、Fas mRNA表达及蛋白水平。[结果]A、B、C、D、E、F组动物胃癌的发生率分别为0%(0/5)、75%(12/16)、68.8%(11/16)、70.6%(12/17)、18.8%(3/16)和31.3%(5,16)(P=0.002)。与B组相比,C、D、E和F组胃癌组织Bax、Bcl-2、Fas mRNA表达和蛋白水平均无显著性差异。[结论]选择性COX-2抑制剂塞来昔布预防胃癌的机制可能与凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas表达无关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 n-甲基-n-硝基-硝基(MNNG) 选择性COX-2抑制剂 塞来昔布(Celecoxib)
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生产5-氨基乙酰丙酸的生物技术法 被引量:1
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《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期69-69,共1页
关键词 5-氨基乙酰丙酸 生物技术 光合细菌 n-甲基-n-硝基-n-硝基 结晶法
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用高通量实时荧光PCR技术研究低浓度MNNG诱发的细胞基因应答反应 被引量:4
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作者 李红娟 石为 +4 位作者 卢翔云 邵敏华 周韧 卢大儒 余应年 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-6,共6页
目的:研究低浓度N-甲基-N-硝基-N-甲基亚硝基胍对人羊膜FL细胞部分基因表达的影响,以助于阐明MNNG引起细胞应答反应的基因及其调控机制。方法:用ABI公司的高通量实时荧光定量PCR方法,检测FL细胞在0.2μmol/LMNNG处理后基因表达发生的改... 目的:研究低浓度N-甲基-N-硝基-N-甲基亚硝基胍对人羊膜FL细胞部分基因表达的影响,以助于阐明MNNG引起细胞应答反应的基因及其调控机制。方法:用ABI公司的高通量实时荧光定量PCR方法,检测FL细胞在0.2μmol/LMNNG处理后基因表达发生的改变。数据用ABI公司的SDS2.1软件分析。结果:MNNG处理后,在检测的95个基因中,29个基因表达发生改变,其中14个基因下调2倍以上,15个基因下调在1.5-2倍之间;其中有4个基因与细胞周期相关,6个基因与信号转导相关,6个基因与转录调节相关。结论:在低浓度MNNG攻击后,FL细胞的基因表达发生了显著的变化。 展开更多
关键词 n-甲基-n-硝基-n-硝基 实时荧光定量PCR 基因表达
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GSH减少可加强MNNG对P38 MAPK磷酸化
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作者 竺可青 朱建伟 章锁江 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1495-1497,共3页
目的:了解低浓度N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对P38 MAPK的影响,以及谷胱甘肽(GSH)在该信号通路中的调节作用。方法:用L-丁硫氨酸-S,R-磺基(L-buthionine-S,R-sulfoximine)减少细胞谷胱甘肽含量后,采用Western印迹法比较MNNG处理... 目的:了解低浓度N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对P38 MAPK的影响,以及谷胱甘肽(GSH)在该信号通路中的调节作用。方法:用L-丁硫氨酸-S,R-磺基(L-buthionine-S,R-sulfoximine)减少细胞谷胱甘肽含量后,采用Western印迹法比较MNNG处理组和对照组P38MAPK磷酸化状态,观察MNNG对P38磷酸化状态的影响。用光密度扫描仪测定各蛋白质条带吸光值。“P”为磷酸化P38MAPK的吸收值,“T”为总P38MAPK吸收值。在各时点以对照组磷酸化率P/T为1·0,计算MNNG组的相对磷酸化率。结果:BSO预处理24h后,MNNG处理2·5h的相对磷酸化率为0·84,2·5h处理后换DMEM全培养基3h的相对磷酸化率2·19。结论:细胞内GSH含量降低可促进P38MAPK的活性。 展开更多
关键词 P38MAP激酶 谷胱甘肽 n-甲基-n-硝基-n-硝基
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MNNG诱导TERC基因沉默的16HBE细胞恶性转化模型的建立
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作者 朱俊峰 黄小荣 +1 位作者 冯宇鹏 周俊宜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1326-1329,1334,共5页
目的:建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的人端粒酶RNA组分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支气管上皮细胞株(16HBE)恶性转化细胞模型。方法:将靶向TERC基因的shRNA干扰... 目的:建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的人端粒酶RNA组分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支气管上皮细胞株(16HBE)恶性转化细胞模型。方法:将靶向TERC基因的shRNA干扰质粒载体转染16HBE细胞,G418抗性克隆筛选得到稳定转染的16HBE-1细胞,RT-PCR检测16HBE-1细胞TERC mRNA的干扰效率;用1 mg/L MNNG对16HBE-1细胞进行隔代染毒,每次染毒1 h;直到染毒27次转化灶的出现。分离扩增转化灶细胞并命名为16HBE-T,用软琼脂克隆形成实验和裸鼠成瘤实验鉴定细胞的转化程度。结果:从转化灶分离培养的细胞能在软琼脂中生长,且转化细胞能在裸鼠体内成瘤,HE染色后光镜下显示为鳞癌。结论:成功建立MNNG诱导的TERC基因缺陷的16HBE细胞恶性转化模型。 展开更多
关键词 端粒酶RNA 人支气管上皮细胞 RNA干扰 n-甲基-n-硝基-n-硝基
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基于雌激素代谢调控的白藜芦醇对MNNG诱导子宫内膜癌变的抑制作用 被引量:9
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作者 尹弟 陈春霞 +4 位作者 闵梦君 赵峰 杜蕾 印晓星 周雪妍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期922-928,共7页
目的 考察白藜芦醇(Res)是否可能通过调控雌激素内稳态,进而抑制MNNG诱导小鼠子宫内膜的癌变。方法采用MNNG诱导EC小鼠模型,将小鼠随机分为Control组、Res组、MNNG组、MNNG+Res组。HE染色观察组织病理情况;qPCR检测Ccnd1、CK-19、Erbb2 ... 目的 考察白藜芦醇(Res)是否可能通过调控雌激素内稳态,进而抑制MNNG诱导小鼠子宫内膜的癌变。方法采用MNNG诱导EC小鼠模型,将小鼠随机分为Control组、Res组、MNNG组、MNNG+Res组。HE染色观察组织病理情况;qPCR检测Ccnd1、CK-19、Erbb2 mRNA的表达;LC-MS/MS检测小鼠血清和子宫中E1、E2、2-MeOE1、4-MeOE1、2-MeOE2、4-MeOE2、16α-OHE1、2-OHE1、4-OHE1、2-OHE2和4-OHE2的含量。结果 MNNG组小鼠子宫内膜腺体增多、拥挤,局灶形成筛孔;MNNG+Res组小鼠子宫内膜腺体减少,趋于正常。与Control组相比,MNNG组Ccnd1、Erbb2 mRNA表达明显升高,MNNG+Res组明显降低。MNNG组小鼠的血清和子宫组织中,2-MeOE2、2-MeOE1和4-MeOE1含量明显下降,4-OHE2含量明显增加,给予Res治疗后,血清中4-MeOE1含量明显升高,子宫组织中2-MeOE2和2-MeOE1含量明显升高,4-OHE2在血清和子宫组织中含量均明显降低。结论 EC小鼠体内雌激素内稳态失衡,Res可以上调雌激素代谢产物2-MeOE2的含量,降低4-OHE2的含量,抑制EC的发生发展。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 白藜芦醇 雌激素 雌激素代谢 液相色谱串联质谱 n-甲基-n′-硝基-n-硝基
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