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海因酶/N-氨甲酰水解酶催化DL-苄基海因制备D-苯丙氨酸的过程分析及强化 被引量:5
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作者 姚忠 朱姝 +3 位作者 李家璜 屠春燕 李苏平 韦萍 《现代化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期44-46,共3页
利用自行筛选的Pseudomonassp.js-01菌发酵产酶,得到兼有海因酶、N-氨甲酰水解酶活性的菌体,通过酶动力学参数分析以及转化试验表明,N-氨甲酰水解酶活性偏低是制约整体转化过程的瓶颈。以疏水层析的方法将海因酶、N-氨甲酰水解酶进行初... 利用自行筛选的Pseudomonassp.js-01菌发酵产酶,得到兼有海因酶、N-氨甲酰水解酶活性的菌体,通过酶动力学参数分析以及转化试验表明,N-氨甲酰水解酶活性偏低是制约整体转化过程的瓶颈。以疏水层析的方法将海因酶、N-氨甲酰水解酶进行初步分离,并调节双酶比例进行了转化试验。结果表明,转化过程得到显著改善,当海因酶与N-氨甲酰水解酶比例达到1∶4时,中间产物的积累基本消失,6h产物转化率提高1倍以上。 展开更多
关键词 D-海因酶 n-氨甲酰水解酶 苄基海因 D苯丙氦酸
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L-N-氨甲酰水解酶研究进展
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作者 梅艳珍 何冰芳 欧阳平凯 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期485-489,589,共6页
L-N-氨甲酰水解酶是酶法制备天然、非天然L-氨基酸及其衍生物的关键酶之一。L-N-氨甲酰水解酶具有很大的工业应用潜力和价值,由于许多L-N-氨甲酰水解酶稳定性差、活性低等特点,限制了此酶的广泛应用,因而寻求高活性、高稳定、广泛底物... L-N-氨甲酰水解酶是酶法制备天然、非天然L-氨基酸及其衍生物的关键酶之一。L-N-氨甲酰水解酶具有很大的工业应用潜力和价值,由于许多L-N-氨甲酰水解酶稳定性差、活性低等特点,限制了此酶的广泛应用,因而寻求高活性、高稳定、广泛底物特异性的L-N-氨甲酰水解酶作为催化剂尤为重要。本文重点介绍了微生物L-N-氨甲酰水解酶的最新应用、在微生物中的分布、克隆与表达等进展。 展开更多
关键词 n-氨甲酰水解酶 L-基酸 克隆表达
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N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性 被引量:2
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作者 钮利喜 石亚伟 袁静明 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期11-14,共4页
将菌株SS-ori的N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因(DCase)插入到pMAL-c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)与DCase融合的重组子。该重组子在E.coliBL21中的表达产物为融合蛋白MBP-DCase(76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌... 将菌株SS-ori的N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因(DCase)插入到pMAL-c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)与DCase融合的重组子。该重组子在E.coliBL21中的表达产物为融合蛋白MBP-DCase(76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌体超声后离心上清总蛋白的19%。经Amy-lose亲和纯化和Superose12凝胶排阻层析后达到了电泳纯。根据pMAL-c2X的背景,用FactorXa剪切后,可得约41.7ka的MBP和34.7ka的DCase。酶活性检测表明当用N-氨甲酰-DL-缬氨酸做为底物,A600=10时,每升菌体每小时可产生D-缬氨酸0.78g。 展开更多
关键词 pMAL-c2X质粒 n-甲酰-D-基酸酰胺水解酶 麦芽糖结合蛋白 融合表达 亲和层析
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D-对羟基苯海因的细胞催化水解工艺优化
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作者 贺莹 高晓丽 +1 位作者 段利强 乔元彪 《天津农业科学》 CAS 2016年第3期92-94,98,共4页
摘要:从菌中的酶含量和酶活力两方面对微生物酶催化水解的最佳条件进行了探究。结果显示,通过对试验菌种生长曲线的测定,发现该菌在22h之内为对数期,22—36h为稳定期,36h后进入衰退期。在此基础上检测前期诱导培养的菌种内的酶含量... 摘要:从菌中的酶含量和酶活力两方面对微生物酶催化水解的最佳条件进行了探究。结果显示,通过对试验菌种生长曲线的测定,发现该菌在22h之内为对数期,22—36h为稳定期,36h后进入衰退期。在此基础上检测前期诱导培养的菌种内的酶含量为3.6%,然后对该菌破胞后的酶粗提物和不破胞的菌体(全细胞)进行了不同温度和pH值梯度下的水解情况对比,得到两者酶活力最高时的最佳温度和pH值,前者最佳温度为40℃,pH值为8,后者则最佳温度为40℃,pH值为6。最后通过对比得出,酶粗提物的水解效果比全细胞的更佳。 展开更多
关键词 D-对羟基苯甘 D-海因酶 n-氨甲酰水解酶 微生物酶催化法
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恶臭假单胞菌Pseudo monas JS-01的发酵动力学 被引量:1
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作者 申宁 姜岷 韦萍 《南京化工大学学报》 2001年第3期36-39,共4页
利用自动控制发酵设备 ,首先进行分批发酵实验摸索恶臭假单胞菌PseudomonasJS 0 1的生长与代谢的基本规律 ,然后采用补料分批发酵的方法限制生长基质的浓度 ,测定了一系列 (Ci,μi) ,(μj,qij)数据 ,获得了Kc、μmax、α、β等参数的值 ... 利用自动控制发酵设备 ,首先进行分批发酵实验摸索恶臭假单胞菌PseudomonasJS 0 1的生长与代谢的基本规律 ,然后采用补料分批发酵的方法限制生长基质的浓度 ,测定了一系列 (Ci,μi) ,(μj,qij)数据 ,获得了Kc、μmax、α、β等参数的值 ,并且推导出了细胞生长与产物合成的动力学公式 ,从而证明了用Monod方程描述恶臭假单胞菌PseudomonasJS 0 1生长速率与基质浓度关系的合理性 。 展开更多
关键词 海因酶 n-甲酰-D-基酸水解酶 发酵动力学 恶臭假单胞菌 D型基酸 PseudomonasJS-01
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