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基因工程酶法生产N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸反应条件的优化(英文) 被引量：2: 1; 作者李志强胡卓逸刘景晶《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期553-558,共6页; 为了实现利用生物酶转化法生产D 对羟基苯甘氨酸 ,以工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,对底物对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶转化条件进行了优化 .酶转化的最适温度为 37℃ ,最适pH为 9 0 .在Tris HCl... 展开更多; 关键词基因工程酶法生产 n-氨基甲酰-d-对羟基苯甘氨酸反应条件优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶基因的克隆与表达被引量：4: 2; 作者赵莉霞钮利喜 +1 位作者范俊虎袁静明《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第1期32-36,共5页; 按本室纯化的N 氨甲酰基 D 氨基酸酰胺水解酶 (DCase)的N 末端氨基酸序列设计了正向引物 ,并在已报道的不同来源菌株DCase的氨基酸序列同源性分析的基础上 ,设计了反向引物。用菌株No . 2 2 62总DNA为模板 ,经PCR扩增获得长度为约0 9... 展开更多; 关键词 n-氨甲酰基-d-氨基酸酰胺水解酶菌株No.2262 PCR扩增 DNA序列基因表达基因克隆 β-内酰胺内抗生素; 在线阅读下载PDF 职称材料

N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性被引量：2: 3; 作者钮利喜石亚伟袁静明《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期11-14,共4页; 将菌株SS-ori的N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因(DCase)插入到pMAL-c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)与DCase融合的重组子。该重组子在E.coliBL21中的表达产物为融合蛋白MBP-DCase(76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌... 展开更多; 关键词 pMAL-c2X质粒 n-氨甲酰-d-氨基酸酰胺水解酶麦芽糖结合蛋白融合表达亲和层析; 在线阅读下载PDF 职称材料

高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸被引量：9: 4; 作者宋慧敏屠春燕欧阳平凯《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第4期97-99,共3页; 建立了反应体系中 D-对羟基苯甘氨酸、N-氨甲酰 - D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因 3者含量的测定方法。采用高效液相色谱法测定 ,以 Kromasil- C18为固定相 ,φ(乙腈 )∶ φ(水 )∶ φ(磷酸 (85 % ) ) =10∶ 90∶0 .0 1为流动相 ,... 展开更多; 关键词 D-对羟基苯甘氨酸 n-氨甲酰-d-对羟基苯甘氨酸 DL-对羟基苯海因高效液相色谱测定方法药物中间体青霉素半合成抗生素; 在线阅读下载PDF 职称材料

3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖的合成与表征: 5; 作者周勇刘冰《应用化工》 CAS CSCD 2013年第10期1804-1805,1807,共3页; 以N,N-二甲基-4-氨基吡啶为催化剂,用3R,3S-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖和苯甲酰氯反应,合成了药物Gemcitabine的关键中间体3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖,用元素分析、IR与1H NMR对其结构进行了表征。... 展开更多; 关键词 3 5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2 2-二氟-1-氧代-d-呋喃核糖 N n-二甲基-4-氨基吡啶合成重结晶; 在线阅读下载PDF 职称材料

DL-对羟基苯海因及其工程菌转化产物的高效液相色谱分析被引量：3: 6; 作者钮利喜石亚伟 +1 位作者纪颖彤袁静明《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期208-208,共1页; 关键词高效液相色谱法工程菌 DL-对羟基苯海因 n-氨甲酰基-d-对羟基苯甘氨酸 D-对羟基苯甘氨酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

海因酶产生菌的反应条件研究被引量：2: 7; 作者吕彬峰钱俊青应雪肖《浙江工业大学学报》 CAS 2007年第5期505-508,共4页; 利用恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)作为酶源,研究海因酶催化DL-对羟基苯海因合成N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸,以制备D-对羟基苯甘氨酸,并就培养基的优化,反应条件的选择及酶活的影响作了探讨.研究表明,碱性条件下可显著增加酶反应... 展开更多; 关键词恶臭假单胞菌海因酶 DL-对羟基苯海因 D-对羟基苯甘氨酸 n-氨基甲酰-d-对羟基苯甘氨酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

恶臭假单胞菌Pseudo monas JS-01的发酵动力学被引量：1: 8; 作者申宁姜岷韦萍《南京化工大学学报》 2001年第3期36-39,共4页; 利用自动控制发酵设备 ,首先进行分批发酵实验摸索恶臭假单胞菌PseudomonasJS 0 1的生长与代谢的基本规律 ,然后采用补料分批发酵的方法限制生长基质的浓度 ,测定了一系列 (Ci,μi) ,(μj,qij)数据 ,获得了Kc、μmax、α、β等参数的值 ... 展开更多; 关键词海因酶 n-氨甲酰-d-氨基酸水解酶发酵动力学恶臭假单胞菌 D型氨基酸 PseudomonasJS-01; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因工程酶法生产N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸反应条件的优化(英文) 被引量：2: 1; 作者李志强胡卓逸刘景晶; 机构中国药科大学生物化学研究室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期553-558,共6页; 基金江苏省应用基础研究课题资助 (No .BJ970 80 )~~; 文摘为了实现利用生物酶转化法生产D 对羟基苯甘氨酸 ,以工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,对底物对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶转化条件进行了优化 .酶转化的最适温度为 37℃ ,最适pH为 9 0 .在Tris HCl、磷酸盐、碳酸盐和硼酸盐 4种缓冲体系中 ,底物对羟基苯海因的转化率相近 .菌体细胞经适当冻融后 ,底物对羟基苯海因的转化率被提高 .水溶性有机溶剂DMSF、DMF和Tween 80使对羟基苯海因的转化率降低 .转化时底物和菌体的合适比例为 30g L对羟基苯海因和 10g L湿菌体 .经工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞催化 ,底物的转化率在 13h内可达到 96 % .所制备的产物熔点。; 关键词基因工程酶法生产 n-氨基甲酰-d-对羟基苯甘氨酸反应条件优化; Keywords D,L-p-hydroxyphenylhydantoin (D,L-p-HPH), D-p-hydroxyphenylglycine (D-p-HPG), n-carbamoyl-d-p-hydroxyphenylglycine(CpHPG), D-hydantoinase, gene engineering; 分类号 TQ460.38 [化学工程—制药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶基因的克隆与表达被引量：4: 2; 作者赵莉霞钮利喜范俊虎袁静明; 机构山西大学生物技术研究所; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第1期32-36,共5页; 基金山西省重点科技发展项目 ( 9932 2 5 ); 文摘按本室纯化的N 氨甲酰基 D 氨基酸酰胺水解酶 (DCase)的N 末端氨基酸序列设计了正向引物 ,并在已报道的不同来源菌株DCase的氨基酸序列同源性分析的基础上 ,设计了反向引物。用菌株No . 2 2 62总DNA为模板 ,经PCR扩增获得长度为约0 9kpb的片段 ,DNA序列分析表明基因全长为 912bp。将该片段插入 pET 3a ,构建成重组子 pET DCase ,并在E coliDH5α中获得表达 ,经SDS PAGE检测 ,表达产物分子量与天然纯DCase相同 ,约为 35kD。; 关键词 n-氨甲酰基-d-氨基酸酰胺水解酶菌株No.2262 PCR扩增 DNA序列基因表达基因克隆 β-内酰胺内抗生素; Keywords D-Carbamoylase, Strain No.2262, PCR amplification, DNA sequence, Expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性被引量：2: 3; 作者钮利喜石亚伟袁静明; 机构山西大学生物技术研究所; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期11-14,共4页; 基金山西省自然科学基金资助项目(20031042); 文摘将菌株SS-ori的N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因(DCase)插入到pMAL-c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)与DCase融合的重组子。该重组子在E.coliBL21中的表达产物为融合蛋白MBP-DCase(76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌体超声后离心上清总蛋白的19%。经Amy-lose亲和纯化和Superose12凝胶排阻层析后达到了电泳纯。根据pMAL-c2X的背景,用FactorXa剪切后,可得约41.7ka的MBP和34.7ka的DCase。酶活性检测表明当用N-氨甲酰-DL-缬氨酸做为底物,A600=10时,每升菌体每小时可产生D-缬氨酸0.78g。; 关键词 pMAL-c2X质粒 n-氨甲酰-d-氨基酸酰胺水解酶麦芽糖结合蛋白融合表达亲和层析; Keywords pMAL-c2X plasmid D-Carbamoylase Maltose binding protein Fusion expression Affinity chromatography; 分类号 Q342.3 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸被引量：9: 4; 作者宋慧敏屠春燕欧阳平凯; 机构南京工业大学制药与生命科学学院; 出处《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第4期97-99,共3页; 文摘建立了反应体系中 D-对羟基苯甘氨酸、N-氨甲酰 - D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因 3者含量的测定方法。采用高效液相色谱法测定 ,以 Kromasil- C18为固定相 ,φ(乙腈 )∶ φ(水 )∶ φ(磷酸 (85 % ) ) =10∶ 90∶0 .0 1为流动相 ,紫外检测波长为 2 10 nm。3者回收率分别为 99.5 % ,98.6 %及 99.6 % ,RSD为 0 .11% ,0 .13%和0 .2 1%。实验结果表明该法简便、快速。; 关键词 D-对羟基苯甘氨酸 n-氨甲酰-d-对羟基苯甘氨酸 DL-对羟基苯海因高效液相色谱测定方法药物中间体青霉素半合成抗生素; Keywords p hydroxy D phenylglycine N carbamyl D hydroxyphenyglycine DL hydrocyphenylhydantoin high performance liquid chromatography; 分类号 TQ465 [化学工程—制药化工] TQ246 [化学工程—有机化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖的合成与表征: 5; 作者周勇刘冰; 机构新乡学院化学与化工学院; 出处《应用化工》 CAS CSCD 2013年第10期1804-1805,1807,共3页; 基金河南省科技厅重点科技攻关计划项目(112102310535) 新乡市重点科技攻关项目(ZG12025); 文摘以N,N-二甲基-4-氨基吡啶为催化剂,用3R,3S-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖和苯甲酰氯反应,合成了药物Gemcitabine的关键中间体3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖,用元素分析、IR与1H NMR对其结构进行了表征。用异丙醇作溶剂进行重结晶,分离出非对映异构体产物。讨论了不同催化剂、反应温度和反应物比对反应的影响。; 关键词 3 5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2 2-二氟-1-氧代-d-呋喃核糖 N n-二甲基-4-氨基吡啶合成重结晶; Keywords Key3,5-double-O-benzoyl-2-deoxidation-2,2-difluoro-l-oxo-d-ribofuranose N, n-dimethyl-4-aminopyridine synthetization recrystallization; 分类号 TQ463.5 [化学工程—制药化工] O623.54 [理学—有机化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DL-对羟基苯海因及其工程菌转化产物的高效液相色谱分析被引量：3: 6; 作者钮利喜石亚伟纪颖彤袁静明; 机构山西大学生物技术研究所教育部化学生物学与分子工程重点实验室; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期208-208,共1页; 基金山西省青年基金资助项目(批准号为 20031042).; 关键词高效液相色谱法工程菌 DL-对羟基苯海因 n-氨甲酰基-d-对羟基苯甘氨酸 D-对羟基苯甘氨酸; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海因酶产生菌的反应条件研究被引量：2: 7; 作者吕彬峰钱俊青应雪肖; 机构浙江工业大学药学院; 出处《浙江工业大学学报》 CAS 2007年第5期505-508,共4页; 文摘利用恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)作为酶源,研究海因酶催化DL-对羟基苯海因合成N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸,以制备D-对羟基苯甘氨酸,并就培养基的优化,反应条件的选择及酶活的影响作了探讨.研究表明,碱性条件下可显著增加酶反应速度,温度对提高海因酶活力有重要影响.培养初始pH值为7.0,温度28℃下培养24 h产海因酶达最高;在最适pH9.0和最适温度55℃下,海因酶活力达到0.7 u/mL,比原基础培养条件下提高3.5倍.; 关键词恶臭假单胞菌海因酶 DL-对羟基苯海因 D-对羟基苯甘氨酸 n-氨基甲酰-d-对羟基苯甘氨酸; Keywords Pseudomonas putida D-Hydantoinase DL-p-hydroxyphenylhydantoin D-p-hydroxyphenylglycine n-carbamoyl-d-p-hydroxyphenylglycine; 分类号 TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名恶臭假单胞菌Pseudo monas JS-01的发酵动力学被引量：1: 8; 作者申宁姜岷韦萍; 机构南京化工大学制药与生命科学学院; 出处《南京化工大学学报》 2001年第3期36-39,共4页; 文摘利用自动控制发酵设备 ,首先进行分批发酵实验摸索恶臭假单胞菌PseudomonasJS 0 1的生长与代谢的基本规律 ,然后采用补料分批发酵的方法限制生长基质的浓度 ,测定了一系列 (Ci,μi) ,(μj,qij)数据 ,获得了Kc、μmax、α、β等参数的值 ,并且推导出了细胞生长与产物合成的动力学公式 ,从而证明了用Monod方程描述恶臭假单胞菌PseudomonasJS 0 1生长速率与基质浓度关系的合理性。; 关键词海因酶 n-氨甲酰-d-氨基酸水解酶发酵动力学恶臭假单胞菌 D型氨基酸 PseudomonasJS-01; Keywords hydantoinase N carbamoylase fed batch fermentation fermentation kinetics; 分类号 TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程] TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基因工程酶法生产N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸反应条件的优化(英文)	李志强胡卓逸刘景晶	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶基因的克隆与表达	赵莉霞钮利喜范俊虎袁静明	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性	钮利喜石亚伟袁静明	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸	宋慧敏屠春燕欧阳平凯	《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS	2002	9	在线阅读下载PDF 职称材料
5	3,5-双-O-苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟-1-氧代-D-呋喃核糖的合成与表征	周勇刘冰	《应用化工》 CAS CSCD	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	DL-对羟基苯海因及其工程菌转化产物的高效液相色谱分析	钮利喜石亚伟纪颖彤袁静明	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	海因酶产生菌的反应条件研究	吕彬峰钱俊青应雪肖	《浙江工业大学学报》 CAS	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	恶臭假单胞菌Pseudo monas JS-01的发酵动力学	申宁姜岷韦萍	《南京化工大学学报》	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料