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集胞藻PCC6803中N-乙酰鸟氨酸转氨酶的生化表征及结构分析: 1; 作者白福美李至敏 +3 位作者王小琴胡紫微鲍玲玲李志敏《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期98-107,共10页; 旨在对集胞藻PCC6803中slr1022基因编码的N-乙酰鸟氨酸转氨酶进行生化表征及结构分析,为进一步研究该酶的催化功能及机制奠定理论基础。以集胞藻PCC6803基因组为模板,通过PCR扩增获得slr1022基因,将其连接到表达载体pET-28a上,转化大肠... 展开更多; 关键词 n-乙酰鸟氨酸转氨酶原核表达生化表征结构分析集胞藻PCC6803; 在线阅读下载PDF 职称材料

金属离子对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶可溶部分酶活力的影响被引量：3: 2; 作者李环陈悦 +2 位作者王娟韦萍欧阳平凯《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期16-20,共5页; 重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶可在重组菌BL21-pET22b-argE中高效表达,大多以不可溶的包涵体形式存在。文中研究了金属离子浓度及添加时间对该菌生长及可溶表达部分酶活力的影响。结果表明,1.0g/L的Mg2+对生物量和酶活有明显促进作用。Co2... 展开更多; 关键词金属离子 Co^2+添加时间重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的生物信息学分析被引量：1: 3; 作者翁秋萍李环韦萍《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第10期4059-4061,共3页; [目的]对ArgE蛋白的结构和功能进行初步预测。[方法]以在GenBank上查找到的若干微生物N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶基因序列为分析对象,以ArgE(P23908)为研究对象,利用生物信息学在线软件ORF finder、ProtParam和Protscale等对ArgE编码的蛋白N... 展开更多; 关键词 ArgE基因 n-乙酰鸟氨酸脱酰基酶结构与功能生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的表达条件优化: 4; 作者李环朱大伟 +2 位作者陈悦任真韦萍《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期239-243,共5页; N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶(N-acetylornithine deacetylase,NAOase)为新型氨基酸拆分酶,可在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中胞内诱导表达。为降低生产成本并提高酶活,优化了培养基成分及诱导条件。结果表明,进口的蛋白胨和酵母膏明显优于国... 展开更多; 关键词 n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶表达优化包涵体可溶性部分酶活; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组氨基酰化酶1与N-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶酶学性质比较: 5; 作者高晗徐礼生 +2 位作者刘均忠刘茜焦庆才《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1186-1189,1216,共5页; 利用基因工程手段重组表达了牛肾来源的氨基酰化酶1(ACY1),并与实验室之前构建的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶(NAO)进行比较,以N-乙酰-DL-蛋氨酸为底物,研究了其酶学性质,考察了pH、温度、反应时间、表面活性剂、金属离子等因素对拆分DL-蛋氨... 展开更多; 关键词重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶重组牛肾来源的氨基酰化酶1 拆分蛋氨酸生物工程; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体蛋白的柱上复性: 6; 作者黄东健姚忠 +1 位作者刘步云李环《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期11-15,共5页; N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(NAO)具有广泛的底物选择性,可用于多种活性氨基酸的酶法拆分,具有广阔的工业应用前景。文中采用多种洗涤剂对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体进行洗涤去杂,并用DEAE Sepharose Fast Flow层析柱和三缓冲体系作... 展开更多; 关键词离子交换重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体复性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名集胞藻PCC6803中N-乙酰鸟氨酸转氨酶的生化表征及结构分析: 1; 作者白福美李至敏王小琴胡紫微鲍玲玲李志敏; 机构江西农业大学生物科学与工程学院江西农业大学理学院江西省农业微生物资源开发与利用工程实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期98-107,共10页; 基金国家自然科学基金项目(31860249) 江西省自然科学基金(20192BAB204011) 江西省教育厅科技研究项目(GJJ190202)。; 文摘旨在对集胞藻PCC6803中slr1022基因编码的N-乙酰鸟氨酸转氨酶进行生化表征及结构分析,为进一步研究该酶的催化功能及机制奠定理论基础。以集胞藻PCC6803基因组为模板,通过PCR扩增获得slr1022基因,将其连接到表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态。经IPTG诱导,Ni-NTA亲和层析纯化后获得重组Slr1022蛋白,然后通过紫外分光光度法对Slr1022蛋白的催化功能进行表征,并运用生物信息学软件对该蛋白进行结构分析。成功构建pET28a-slr1022重组表达质粒,并诱导表达重组Slr1022蛋白,SDS-PAGE电泳鉴定该蛋白分子量约为50 kD,与理论大小相符。Slr1022蛋白与底物N-乙酰鸟氨酸的结合常数K_m和最大反应速度V_(max)分别是0.12 mmol/L和0.60 μmol/(L·s),并且Slr1022蛋白与另一底物α-酮戊二酸的K_(m)和V_(max)分别是0.039 mmol/L和0.65 μmol/(L·s)。Slr1022蛋白在pH 8.5时催化活性最强。Slr1022蛋白和其他来源的N-乙酰鸟氨酸转氨酶氨基酸序列有一定的同源性,而且活性位点的氨基酸残基高度保守。成功克隆并表达纯化出Slr1022蛋白,酶学性质和生物信息学研究表明Slr1022蛋白为N-乙酰鸟氨酸转氨酶。; 关键词 n-乙酰鸟氨酸转氨酶原核表达生化表征结构分析集胞藻PCC6803; Keywords n-acetylornithine transaminase prokaryotic expression biochemical characterization structural analysis Synechocystis sp.PCC6803; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名金属离子对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶可溶部分酶活力的影响被引量：3: 2; 作者李环陈悦王娟韦萍欧阳平凯; 机构南京工业大学制药与生命科学学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期16-20,共5页; 基金国家973项目(2003CB7160004)资助课题; 文摘重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶可在重组菌BL21-pET22b-argE中高效表达,大多以不可溶的包涵体形式存在。文中研究了金属离子浓度及添加时间对该菌生长及可溶表达部分酶活力的影响。结果表明,1.0g/L的Mg2+对生物量和酶活有明显促进作用。Co2+的浓度及添加时间不同,对菌的生长及酶活力的影响结果也不同。培养起始加入Co2+会抑制菌的生长及酶活,而在1.0%乳糖诱导2.5h后加入则可解除生长抑制并促进酶活。Ni2+,Cu2+会抑制菌体的生长及酶活。Mn2+、Mo2+和B3+不影响菌的生长,对酶活有促进作用。添加金属离子后,酶活从16.90U/mL提高到251.91U/mL。; 关键词金属离子 Co^2+添加时间重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶; Keywords metal ions, feeding time of Co^2 ＋ , recombinant n-acetylornithe deacetylase; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的生物信息学分析被引量：1: 3; 作者翁秋萍李环韦萍; 机构南京工业大学制药与生命科学学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第10期4059-4061,共3页; 基金国家973课题资助项目(2003CB7160004); 文摘 [目的]对ArgE蛋白的结构和功能进行初步预测。[方法]以在GenBank上查找到的若干微生物N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶基因序列为分析对象,以ArgE(P23908)为研究对象,利用生物信息学在线软件ORF finder、ProtParam和Protscale等对ArgE编码的蛋白N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的二级结构和特殊结构、序列同源性、结构域及功能位点进行了初步预测。[结果]ArgE蛋白是一种酸性可溶性蛋白,理论等电点为5.54,分子量为42 347.3,无信号肽,为非分泌蛋白,有多个磷酸化位点。蛋白中存在α螺旋、β-折叠和无规则卷曲结构,有2个可形成跨膜结构的片段,不存在卷曲螺旋,也无线粒体定位信号。ArgE蛋白与CBPG、DAPE、ACY1、YSCS几种蛋白具有较高的相似性。[结论]该研究可为ArgE蛋白的结构和功能的实验研究提供理论依据。; 关键词 ArgE基因 n-乙酰鸟氨酸脱酰基酶结构与功能生物信息学; Keywords ArgE gene n-acetyl-ornithine deacetylase Structure and function Bioinformatics; 分类号 Q556 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的表达条件优化: 4; 作者李环朱大伟陈悦任真韦萍; 机构南京工业大学制药与生命科学学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期239-243,共5页; 基金 "973"计划项目(2003CB7160004); 文摘 N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶(N-acetylornithine deacetylase,NAOase)为新型氨基酸拆分酶,可在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中胞内诱导表达。为降低生产成本并提高酶活,优化了培养基成分及诱导条件。结果表明,进口的蛋白胨和酵母膏明显优于国产原料。5.0g/L的乳糖可以代替昂贵的IPTG(isopropy1β-D-1-Thiogalacto pyranoside,异丙基β-D硫代半乳糖苷)起到有效的诱导效果。最佳碳源为1.0g/L甘油,氮源为15.0ml/L玉米浆和5.0g/L蛋白胨。NAOase大多以不可溶的包涵体形式表达,少量为可溶的活性表达。降低诱导温度可增大活性表达的比例,而整菌表达量也随之降低。22℃诱导10h为活性表达的最适条件,生物量为6.91,酶活为392.65U/ml,分别为优化前的1.65倍和5.72倍。; 关键词 n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶表达优化包涵体可溶性部分酶活; Keywords n-acetylomithine decatylase（NAOase） expression optimization inclusion bodies soluble NAOas activity; 分类号 Q93 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组氨基酰化酶1与N-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶酶学性质比较: 5; 作者高晗徐礼生刘均忠刘茜焦庆才; 机构南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室; 出处《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1186-1189,1216,共5页; 基金国家技术创新基金(02CJ-13-01-16)~~; 文摘利用基因工程手段重组表达了牛肾来源的氨基酰化酶1(ACY1),并与实验室之前构建的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶(NAO)进行比较,以N-乙酰-DL-蛋氨酸为底物,研究了其酶学性质,考察了pH、温度、反应时间、表面活性剂、金属离子等因素对拆分DL-蛋氨酸的影响。结果表明,重组NAO和ACY1拆分300 mmol/L的N-乙酰-DL-蛋氨酸所需时间分别是2 h和6 h;重组NAO的酶活及N-乙酰-L-蛋氨酸的转化率分别为1 139.41 U/g和98%,高于重组ACY1的671.24 U/g和58.78%,约是重组ACY1的1.7倍。; 关键词重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶重组牛肾来源的氨基酰化酶1 拆分蛋氨酸生物工程; Keywords recombinant n-acety-L-ornithine deacetylase recombinant aminoacylase 1 resolution methionine biological engineering; 分类号 Q55 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体蛋白的柱上复性: 6; 作者黄东健姚忠刘步云李环; 机构南京工业大学制药与生命科学学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期11-15,共5页; 基金江苏省高校"青蓝工程"项目资助南京工业大学国家自然科学基金预研项目; 文摘 N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(NAO)具有广泛的底物选择性,可用于多种活性氨基酸的酶法拆分,具有广阔的工业应用前景。文中采用多种洗涤剂对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体进行洗涤去杂,并用DEAE Sepharose Fast Flow层析柱和三缓冲体系作为复性系统对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体进行复性实验。结果表明,4mol/L尿素与0.5%Triton X-100联合洗涤可以大量去除杂质;三缓冲体系能有效地实现重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体的柱上复性。在流速为0.5 mL/min,尿素梯度为21 mL,尿素终浓度为1.8mol/L,蛋白质上样量为0.99 mg的实验条件下,蛋白回收率和复性酶比活分别达到52%和10.27 U/mg。; 关键词离子交换重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体复性; Keywords ion-exchange chromatography, n-acetylornithine deacetylase, inclusion body, refolding; 分类号 R91 [医药卫生—药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	集胞藻PCC6803中N-乙酰鸟氨酸转氨酶的生化表征及结构分析	白福美李至敏王小琴胡紫微鲍玲玲李志敏	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	金属离子对重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶可溶部分酶活力的影响	李环陈悦王娟韦萍欧阳平凯	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的生物信息学分析	翁秋萍李环韦萍	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的表达条件优化	李环朱大伟陈悦任真韦萍	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	重组氨基酰化酶1与N-乙酰鸟氨酸脱乙酰酶酶学性质比较	高晗徐礼生刘均忠刘茜焦庆才	《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体蛋白的柱上复性	黄东健姚忠刘步云李环	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料