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pMAL-p2X系统表达番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白
被引量:
5
1
作者
王劭
陈少莺
+4 位作者
林锋强
程晓霞
朱小丽
陈仕龙
欧阳岁东
《福建农业学报》
CAS
2009年第5期396-399,共4页
根据Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白基因,将此σC蛋白基因插入原核表达载体pMAL-p2X中,得到重组表达质粒(pMAL-p2X-σC)并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后能高效表达,SD...
根据Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白基因,将此σC蛋白基因插入原核表达载体pMAL-p2X中,得到重组表达质粒(pMAL-p2X-σC)并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后能高效表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果发现表达的σC蛋白分子质量约为72 kDa,并以可溶性蛋白和包涵体2种形式同时存在,且具有良好的反应原性。原核表达的可溶性σC蛋白为进一步开展抗原表位和诊断试剂盒研究奠定了基础。
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关键词
番鸭呼肠孤病毒
σ
c
蛋白
pMAL—p2X
原核表达
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职称材料
番鸭呼肠孤病毒σC蛋白模拟抗原表位的研究
被引量:
1
2
作者
王劭
陈少莺
+4 位作者
林锋强
程晓霞
朱小丽
陈仕龙
欧阳岁东
《福建农业学报》
CAS
2010年第2期127-130,共4页
以番鸭呼肠孤病毒MW9710分离株原核表达蛋白pGEX-4T-1-σC为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,经过4轮亲和筛选后,对整个被选噬菌体集合单链DNA进行测序。结果:噬菌体展示序列为CATCCTATTCATCCGCGTCAT,相应的短肽序列为HPFYSCY...
以番鸭呼肠孤病毒MW9710分离株原核表达蛋白pGEX-4T-1-σC为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,经过4轮亲和筛选后,对整个被选噬菌体集合单链DNA进行测序。结果:噬菌体展示序列为CATCCTATTCATCCGCGTCAT,相应的短肽序列为HPFYSCY,该短肽序列与MDRVσC氨基酸序列N端一处-P-YS--的氨基酸片段相似,推论MDRVσC的模拟抗原表位可能是由该不连续氨基酸片段所构成的构象表位。通过Genbank的蛋白质检索,发现该构象表位也存在于前B细胞克隆增强因子的多肽序列中。结果表明,噬菌体展示随机肽库技术是一种用于研究抗原表位结构的有效方法。
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关键词
番鸭呼肠孤病毒
σ
c
蛋白
噬菌体展示肽库
模拟抗原表位
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职称材料
题名
pMAL-p2X系统表达番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白
被引量:
5
1
作者
王劭
陈少莺
林锋强
程晓霞
朱小丽
陈仕龙
欧阳岁东
机构
福建省农业科学院畜牧兽医研究所
福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心
出处
《福建农业学报》
CAS
2009年第5期396-399,共4页
基金
福建省自然科学基金(2006J0070)
福建省科技重大专项(2006NZ003-2)
文摘
根据Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白基因,将此σC蛋白基因插入原核表达载体pMAL-p2X中,得到重组表达质粒(pMAL-p2X-σC)并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后能高效表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果发现表达的σC蛋白分子质量约为72 kDa,并以可溶性蛋白和包涵体2种形式同时存在,且具有良好的反应原性。原核表达的可溶性σC蛋白为进一步开展抗原表位和诊断试剂盒研究奠定了基础。
关键词
番鸭呼肠孤病毒
σ
c
蛋白
pMAL—p2X
原核表达
Keywords
muscovy duck revoirus σc protein
pMAL- p2X
prokaryoti
c
expression
分类号
S85 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
番鸭呼肠孤病毒σC蛋白模拟抗原表位的研究
被引量:
1
2
作者
王劭
陈少莺
林锋强
程晓霞
朱小丽
陈仕龙
欧阳岁东
机构
福建省农业科学院畜牧兽医研究所
福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心
出处
《福建农业学报》
CAS
2010年第2期127-130,共4页
基金
福建省自然科学基金(2006J0070)
福建省科技计划重大专项(2006NZ003-2)
文摘
以番鸭呼肠孤病毒MW9710分离株原核表达蛋白pGEX-4T-1-σC为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,经过4轮亲和筛选后,对整个被选噬菌体集合单链DNA进行测序。结果:噬菌体展示序列为CATCCTATTCATCCGCGTCAT,相应的短肽序列为HPFYSCY,该短肽序列与MDRVσC氨基酸序列N端一处-P-YS--的氨基酸片段相似,推论MDRVσC的模拟抗原表位可能是由该不连续氨基酸片段所构成的构象表位。通过Genbank的蛋白质检索,发现该构象表位也存在于前B细胞克隆增强因子的多肽序列中。结果表明,噬菌体展示随机肽库技术是一种用于研究抗原表位结构的有效方法。
关键词
番鸭呼肠孤病毒
σ
c
蛋白
噬菌体展示肽库
模拟抗原表位
Keywords
muscovy
duck
revoirus
σc
protein
phage-displayed random peptide library
mimi
c
antigen epitope
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
pMAL-p2X系统表达番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白
王劭
陈少莺
林锋强
程晓霞
朱小丽
陈仕龙
欧阳岁东
《福建农业学报》
CAS
2009
5
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职称材料
2
番鸭呼肠孤病毒σC蛋白模拟抗原表位的研究
王劭
陈少莺
林锋强
程晓霞
朱小丽
陈仕龙
欧阳岁东
《福建农业学报》
CAS
2010
1
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职称材料
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参考文献
引证文献
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