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pMAL-p2X系统表达番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白 被引量:5
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作者 王劭 陈少莺 +4 位作者 林锋强 程晓霞 朱小丽 陈仕龙 欧阳岁东 《福建农业学报》 CAS 2009年第5期396-399,共4页
根据Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白基因,将此σC蛋白基因插入原核表达载体pMAL-p2X中,得到重组表达质粒(pMAL-p2X-σC)并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后能高效表达,SD... 根据Genbank中MDRV 89026毒株S4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得番鸭呼肠孤病毒MW9710株σC蛋白基因,将此σC蛋白基因插入原核表达载体pMAL-p2X中,得到重组表达质粒(pMAL-p2X-σC)并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后能高效表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果发现表达的σC蛋白分子质量约为72 kDa,并以可溶性蛋白和包涵体2种形式同时存在,且具有良好的反应原性。原核表达的可溶性σC蛋白为进一步开展抗原表位和诊断试剂盒研究奠定了基础。 展开更多
关键词 番鸭呼肠孤病毒 σc蛋白 pMAL—p2X 原核表达
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番鸭呼肠孤病毒σC蛋白模拟抗原表位的研究 被引量:1
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作者 王劭 陈少莺 +4 位作者 林锋强 程晓霞 朱小丽 陈仕龙 欧阳岁东 《福建农业学报》 CAS 2010年第2期127-130,共4页
以番鸭呼肠孤病毒MW9710分离株原核表达蛋白pGEX-4T-1-σC为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,经过4轮亲和筛选后,对整个被选噬菌体集合单链DNA进行测序。结果:噬菌体展示序列为CATCCTATTCATCCGCGTCAT,相应的短肽序列为HPFYSCY... 以番鸭呼肠孤病毒MW9710分离株原核表达蛋白pGEX-4T-1-σC为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,经过4轮亲和筛选后,对整个被选噬菌体集合单链DNA进行测序。结果:噬菌体展示序列为CATCCTATTCATCCGCGTCAT,相应的短肽序列为HPFYSCY,该短肽序列与MDRVσC氨基酸序列N端一处-P-YS--的氨基酸片段相似,推论MDRVσC的模拟抗原表位可能是由该不连续氨基酸片段所构成的构象表位。通过Genbank的蛋白质检索,发现该构象表位也存在于前B细胞克隆增强因子的多肽序列中。结果表明,噬菌体展示随机肽库技术是一种用于研究抗原表位结构的有效方法。 展开更多
关键词 番鸭呼肠孤病毒 σc蛋白 噬菌体展示肽库 模拟抗原表位
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