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鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定
被引量：
5
1
作者
赵玉博
陈普成
+6 位作者
胡玉珍
丁蕾蕾
王波
焦晨晨
姜永萍
陈化兰
柳金雄
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期795-799,共5页
为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中适合外源基因插入的复制非必需区,本研究利用本实验室前期建立的DEV疫苗株多片段拯救系统,结合E/T克隆技术、LR克隆技术将含有红色荧光蛋白(RFP)表达框架的目的片段,定向插入到含DEV基因组复制非必需区的粘...
为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中适合外源基因插入的复制非必需区,本研究利用本实验室前期建立的DEV疫苗株多片段拯救系统,结合E/T克隆技术、LR克隆技术将含有红色荧光蛋白(RFP)表达框架的目的片段,定向插入到含DEV基因组复制非必需区的粘粒中,该位点位于DEV基因组UL区的UL44.5和UL44之间,拯救获得了重组病毒(rDEV)。通过PCR和荧光显微镜鉴定该重组病毒。结果显示,经PCR扩增,r DEV可以扩增到预期目的片段,观察可见红色荧光,表明RFP基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果显示,重组病毒在CEF中的增殖效率与DEV疫苗株无显著差异。将r DEV以105 TCID50的剂量免疫SPF鸭后,DEV攻毒保护试验结果显示,r DEV和亲本株DEV活疫苗对SPF鸭的保护效率均为100%。本研究筛选到DEV基因组中的一个可供外源基因插入的位点,为以DEV为载体构建相关重组疫苗研制提供依据。
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关键词
重组鸭瘟病毒
复制非必需区
dev
拯救系统
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职称材料
题名
鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定
被引量：
5
1
作者
赵玉博
陈普成
胡玉珍
丁蕾蕾
王波
焦晨晨
姜永萍
陈化兰
柳金雄
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期795-799,共5页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFD0500805)
文摘
为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中适合外源基因插入的复制非必需区,本研究利用本实验室前期建立的DEV疫苗株多片段拯救系统,结合E/T克隆技术、LR克隆技术将含有红色荧光蛋白(RFP)表达框架的目的片段,定向插入到含DEV基因组复制非必需区的粘粒中,该位点位于DEV基因组UL区的UL44.5和UL44之间,拯救获得了重组病毒(rDEV)。通过PCR和荧光显微镜鉴定该重组病毒。结果显示,经PCR扩增,r DEV可以扩增到预期目的片段,观察可见红色荧光,表明RFP基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果显示,重组病毒在CEF中的增殖效率与DEV疫苗株无显著差异。将r DEV以105 TCID50的剂量免疫SPF鸭后,DEV攻毒保护试验结果显示,r DEV和亲本株DEV活疫苗对SPF鸭的保护效率均为100%。本研究筛选到DEV基因组中的一个可供外源基因插入的位点,为以DEV为载体构建相关重组疫苗研制提供依据。
关键词
重组鸭瘟病毒
复制非必需区
dev
拯救系统
Keywords
Duck enteritis virus(
dev
)
Duplicate non-essential area
multi-fragment rescue system of dev
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定
赵玉博
陈普成
胡玉珍
丁蕾蕾
王波
焦晨晨
姜永萍
陈化兰
柳金雄
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
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