MicroRNA-486-3p调控小鼠巨噬细胞差异表达基因筛选及鉴定

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作者 刘鸿雁 吴双双 +6 位作者 陈书婕 岑玉威 马一瑄 岳佳颖 魏书宇 王北艳 马金柱 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第5期90-96,共7页

为分析MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞抵抗金黄色葡萄球菌感染过程中的调控作用,使用金黄色葡萄球菌感染MicroRNA-486-3p基因敲除型和野生型小鼠原代腹腔巨噬细胞24 h后,通过mRNA-Seq方法分析mRNA表达水平,筛选MicroRNA-486-3p调控巨噬... 为分析MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞抵抗金黄色葡萄球菌感染过程中的调控作用,使用金黄色葡萄球菌感染MicroRNA-486-3p基因敲除型和野生型小鼠原代腹腔巨噬细胞24 h后,通过mRNA-Seq方法分析mRNA表达水平,筛选MicroRNA-486-3p调控巨噬细胞的差异表达基因,利用RT-qPCR对遴选的差异基因加以验证。测序结果分析显示,差异表达基因共有744个,其中385个上调差异基因,359个下调差异基因,GO分析表明差异基因参与细胞代谢、增殖和免疫反应等生物作用,KEGG富集分析显示差异基因主要与PI3K-Akt、MAPK、NF-κB等信号通路活化相关,RT-qPCR验证结果显示遴选的差异基因与m RNA-Seq分析的下调趋势相符。上述结果表明,MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞感染金黄色葡萄球菌过程中具有调控作用,为今后深入研究MicroRNA-486-3p调控巨噬细胞免疫功能机制提供了重要参考。 展开更多

关键词 microrna-486-3p MRNA-SEQ 巨噬细胞 差异表达基因 金黄色葡萄球菌

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miR-325-3p靶向PRELID1基因介导EMT通路对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响及其机制

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作者 朱平胜 葛思堂 +2 位作者 左芦根 陈德利 张洋洋 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期1185-1193,共9页

目的:探讨微小RNA-325-3p(miR-325-3p)过表达对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响,阐明其作用机制。方法:收集25例明确诊断为结肠癌患者的肿瘤组织及对应的癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测癌旁正常组织和结肠癌组织中miR-32... 目的:探讨微小RNA-325-3p(miR-325-3p)过表达对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响,阐明其作用机制。方法:收集25例明确诊断为结肠癌患者的肿瘤组织及对应的癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测癌旁正常组织和结肠癌组织中miR-325-3p和进化和淋巴兴趣相关结构域蛋白1(PRELID1)mRNA表达水平。采用RT-qPCR法和Western blotting法检测人正常结肠细胞NCM460及结肠癌细胞SW480、HCT116和HT-29中miR-325-3p及PRELID1 mRNA表达水平和PRELID1蛋白表达水平。将SW480细胞分为对照组、NC-mimics组、miR-325-3p mimics组、miR-325-3p mimics+oe-NC组和miR-325-3p mimics+oe-PRELID1组。采用Transwell小室实验和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭及迁移能力,Western blotting法检测各组细胞中上皮-间质转化(EMT)中E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。使用Targetscan生物信息学网站预测miR-325-3p下游靶基因,采用双荧光素酶实验验证miR-325-3p与PRELID1的靶向调控关系。结果:与癌旁正常组织比较,结肠癌组织中miR-325-3p表达水平明显降低(P<0.05),PRELID1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),且结肠癌组织中miR-325-3p和PRELID1 mRNA表达水平呈负相关关系(r<0,R^(2)=0.392,P<0.001)。与NCM460细胞比较,SW480、HCT116和HT-29细胞中miR-325-3p表达水平均明显降低(P<0.05),PRELID1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组和NC-mimics组比较,miR-325-3p mimics组SW480细胞侵袭细胞数明显减少(P<0.05),划痕愈合率降低(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶实验证实PRELID1是miR-325-3p的直接靶标。与miR-325-3p mimics+oe-NC组比较,miR-325-3p mimics+oe-PRELID1组SW480细胞侵袭细胞数明显增加(P<0.05),划痕愈合率升高(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05),N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论:过表达miR-325-3p可靶向下调PRELID1表达,抑制EMT进程,进而抑制SW480细胞侵袭和迁移。 展开更多

关键词 微小RNA-325-3p 进化和淋巴兴趣相关结构域蛋白1 结肠肿瘤 细胞侵袭 细胞迁移 上皮-间质转化

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MicroRNA-3162-3p在儿童原发性免疫性血小板减少症不同临床分期中的表达及其意义 被引量：4

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作者 胡晓燕 贺锐 +3 位作者 米乐园 尹姣姣 金斐斐 朱生东 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期208-213,共6页

目的:探讨microRNA-3162-3p在儿童原发性免疫性血小板减少症(ITP)不同临床分期中的表达及其意义。方法:纳入96例ITP患儿,按照病程的不同将其分为新诊断组(病程<3个月,40例)、持续性组(病程3-12个月,30例)、慢性组(病程>12个月,26... 目的:探讨microRNA-3162-3p在儿童原发性免疫性血小板减少症(ITP)不同临床分期中的表达及其意义。方法:纳入96例ITP患儿,按照病程的不同将其分为新诊断组(病程<3个月,40例)、持续性组(病程3-12个月,30例)、慢性组(病程>12个月,26例),同期选择80例健康儿童作为对照组。分离并培养ITP患儿与健康儿童的外周血单个核细胞(PBMNC),采用实时荧光定量PCR法检测外周血PBMNC中microRNA-3162-3p的表达情况,ELISA法检测受试者外周血PBMNC中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的含量。Spearman相关性分析microRNA-3162-3p与血小板计数、IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的相关性。结果:与对照组相比,ITP患儿的外周血PBMNC中microRNA-3162-3p、IL-10的表达及血小板计数显著下降(P<0.05),IL-17、IL-23、TGF-β显著升高(P<0.05);随着病程的延长,microRNA-3162-3p、IL-10在PBMNC中的表达及血小板计数均显著下降(P<0.05),IL-17、IL-23、TGF-β的表达显著升高(P<0.05)。MicroRNA-3162-3p在ITP患儿PBMNC中的表达与血小板数、IL-10呈正相关(r=0.716、0.667),与IL-17、IL-23、TGF-β呈负相关(r=-0.540、-0.641、-0.560)。结论:MicroRNA-3162-3p在ITP患儿PBMNC中的表达明显降低,参与调控Th17/Treg的失衡,可作为ITP潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 microrna-3162-3p 原发性免疫性血小板减少症 外周血单个核细胞 Th17/Treg失衡

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mir-325-3p激活RIPK3/TFEB信号通路减轻脑出血大鼠神经元损伤 被引量：2

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作者 马晓维 周喜燕 +3 位作者 李彬 臧运华 王群 于淼 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期422-427,共6页

目的探讨mir-325-3p通过调控RIPK3/TFEB通路对脑出血大鼠神经元损伤的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、agomir NC组、agomir-325-3p组、GSK872(RIPK3抑制剂)组、agomir-325-3p+GSK872组,每组18只。评估大鼠运动功能、... 目的探讨mir-325-3p通过调控RIPK3/TFEB通路对脑出血大鼠神经元损伤的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、agomir NC组、agomir-325-3p组、GSK872(RIPK3抑制剂)组、agomir-325-3p+GSK872组,每组18只。评估大鼠运动功能、肢体协调能力、改良神经功能缺损评分(mNSS),测定大鼠脑含水量、血肿周围脑组织病理变化、神经细胞凋亡、神经元自噬、LC3与NeuN共定位、海马组织RIPK3/TFEB信号通路、自噬相关蛋白表达。结果与假手术组相比,脑出血组CA1区神经元肿胀,排列疏松,可见大量溶酶体和自噬小体,前肢放置成功率、左侧转身百分比、TFEB下降(P<0.05),mNSS评分、脑含水量、神经细胞凋亡率、RIPK3、Beclin-1和LC3-II/LC3-Ⅰ、LC3/NeuN强阳性个数升高(P<0.05);agomir-325-3p、GSK872可减轻大鼠海马神经元损伤,增强自噬,且两者有协同作用。结论mir-325-3p过表达可通过调控RIPK3/TFEB促进自噬,减轻脑出血大鼠神经元损伤。 展开更多

关键词 mir-325-3p RIpK3/TFEB 脑出血 神经元损伤

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朊病毒病生物标记microRNA-142-3p可视化快速检测

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作者 张腾龙 薄乐 +6 位作者 英那 郝文丽 武智勇 王雄 孟轲音 万家余 陈志宝 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第1期64-67,共4页

为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸... 为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸试纸条的高效,快捷,可视化检测方法。结果表明:该检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏度(0.005 nmol·L-1)。该检测试纸条的建立在朊病毒病预防,控制,诊断过程中具有一定实际意义。 展开更多

关键词 朊病毒 microrna-142-3p 生物标记 可视化 检测

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miRNA-325-3p通过下调细胞角蛋白13的表达降低鼻咽癌细胞CNE1的放疗敏感性 被引量：2

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作者 万佳 王欢 +2 位作者 王锦 施明 余宏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期496-500,共5页

目的:探究miRNA-325-3p及其靶基因细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌细胞CNE1的放疗敏感性的影响。方法:通过miRBase、Targetscan及Microcosm三大数据库预测miRNA-325-3p的潜在靶基因,并通过双荧光素酶活性检测实验进行验证,q... 目的:探究miRNA-325-3p及其靶基因细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌细胞CNE1的放疗敏感性的影响。方法:通过miRBase、Targetscan及Microcosm三大数据库预测miRNA-325-3p的潜在靶基因,并通过双荧光素酶活性检测实验进行验证,qPCR检测不同放射剂量下鼻咽癌细胞CNE1中miRNA-325-3p及其靶基因的表达水平变化,通过克隆形成实验观察不同放射剂量下过表达miRNA-325-3p及敲低靶基因后CNE1细胞克隆形成率的变化,流式细胞术验证过表达miRNA-325-3p及敲低靶基因后CNE1在不同放射剂量下凋亡水平的变化,MTT法检测miRNA-325-3p过表达和CK13敲低组鼻咽癌细胞CNE1在不同放射剂量下的细胞存活率以验证其放疗敏感性的变化。结果:CK13确认为miRNA-325-3p的潜在靶基因,鼻咽癌细胞CNE1经放射处理后,miRNA-325-3p的表达水平显著升高、CK13的表达水平显著降低(均P<0.05)。miRNA-325-3p表达量上调和CK13基因沉默均显著提高CNE1细胞的存活率[miRNA上调时(:60.14±3.55)%vs(19.23±3.42)%,t=14.37、P<0.01;CK13沉默时:(76.15±5.13)%vs(28.53±3.68)%,t=13.06、P<0.01]和克隆形成率,降低了凋亡率[miRNA上调时:(27.95±2.67)%vs(51.68±3.47)%,t=9.39、P<0.01;CK13沉默时:(20.31±2.62)%vs(38.14±3.83)%,t=6.66、P<0.01]。结论:miRNA-325-3p能够通过下调靶基因CK13的表达降低鼻咽癌细胞CNE1对放疗的敏感性。 展开更多

关键词 miRNA-325-3p CK13 放疗敏感性 鼻咽癌 CNE1细胞

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麻防犀角地黄汤通过调控microRNA-491-5p影响PI3K/Akt/mTOR通路治疗银屑病的机制 被引量：12

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作者 刘爱民 张步鑫 +6 位作者 赵巍 王丽 孟威威 吴盘红 徐胜东 李伟玲 陆玲玲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第5期10-13,I0013,I0014,共6页

目的 观察麻防犀角地黄汤对银屑病小鼠模型的影响,探讨麻防犀角地黄汤治疗银屑病的作用机制。方法 构建咪喹莫特银屑病小鼠模型,灌胃给药麻防犀角地黄汤,观察模型外观及组织病理学改变,Real time PCR检测皮损组织中microRNA-491-5p、PI3... 目的 观察麻防犀角地黄汤对银屑病小鼠模型的影响,探讨麻防犀角地黄汤治疗银屑病的作用机制。方法 构建咪喹莫特银屑病小鼠模型,灌胃给药麻防犀角地黄汤,观察模型外观及组织病理学改变,Real time PCR检测皮损组织中microRNA-491-5p、PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达,Western blot检测皮损组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白的表达。结果 麻防犀角地黄汤能改善小鼠皮损、PASI评分、耳廓外缘厚度、组织病理、体质量等指标,上调microRNA-491-5p mRNA的表达,下调PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达量,抑制p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的蛋白表达,并表现出部分量效相关性。结论 麻防犀角地黄汤可能通过调控microRNA-491-5p影响PI3K/Akt/mTOR信号通路在银屑病的治疗中发挥作用。 展开更多

关键词 麻防犀角地黄汤 microrna-491-5p pI3K/AKT/MTOR 银屑病

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MicroRNA-483-3p对人神经胶质瘤细胞的作用 被引量：1

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作者 赵克 刘康栋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1163-1170,共8页

目的:探讨microRNA(miRNA)-483-3p对人神经胶质瘤细胞A172生长和迁移能力的影响及潜在作用机制。方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测人肾胚细胞系HEK-293和不同神经胶质瘤细胞株(A172、U251和SHG44)中miRNA-483-3p的表达水... 目的:探讨microRNA(miRNA)-483-3p对人神经胶质瘤细胞A172生长和迁移能力的影响及潜在作用机制。方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测人肾胚细胞系HEK-293和不同神经胶质瘤细胞株(A172、U251和SHG44)中miRNA-483-3p的表达水平。转染miRNA-483-3p抑制序列(miRNA-483-3p inhibitor)下调A172细胞中miRNA-483-3p的表达,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力和周期分布;Transwell实验检测细胞的迁移;Western blot检测周期相关调控因子及上皮-间充质转化相关蛋白的水平。双萤光素酶报告基因分析法预测及验证其可能的靶基因。结果:miRNA-483-3p在各型神经胶质瘤细胞中高表达。沉默miRNA-483-3p后,A172细胞的活力下降并呈现出明显的周期阻滞,且细胞迁移率也显著降低。同时细胞中cyclin D1、周期蛋白依赖性激酶4、磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白、N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平均显著降低,E-cadherin和β-catenin的蛋白表达水平显著升高。双萤光素酶报告基因分析显示Smad4是miRNA-483-3p的可能作用靶点,A172细胞共转染miRNA-483-3p inhibitor和Smad4 siRNA可部分逆转miRNA-483-3p介导的细胞增殖及迁移抑制。结论:沉默miRNA-483-3p可通过靶向Smad4抑制神经胶质瘤细胞株A172的生长及迁移。 展开更多

关键词 microrna-483-3p 神经胶质瘤 细胞活力 细胞迁移 SMAD4

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microRNA-124-3p调控H1N1亚型猪流感病毒致小鼠肺损伤的研究

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作者 黄良宗 张海龙 +4 位作者 颜广智 谢博 陈盛楠 邓汝森 顾万军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第10期3049-3057,共9页

为研究microRNA-124-3p(miR-124-3p)对H1N1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)感染小鼠所致肺损伤的调控作用,本试验构建miR-124-3p腺病毒表达载体,通过小鼠尾部静脉注射法构建miR-124-3p差异表达小鼠模型,试验分3组:过表达组... 为研究microRNA-124-3p(miR-124-3p)对H1N1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)感染小鼠所致肺损伤的调控作用,本试验构建miR-124-3p腺病毒表达载体,通过小鼠尾部静脉注射法构建miR-124-3p差异表达小鼠模型,试验分3组:过表达组、抑制组和对照组。48 h后,各组小鼠鼻腔接种H1N1亚型SIV,每只105 EID50(50μL)。连续观察14 d,计算小鼠平均体重变化率、观察病理切片并测定相关炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA相对表达量。结果显示,已成功将pre-miR序列及其sponge序列插入腺病毒的穿梭质粒,并将其共转染293A细胞。实时荧光定量PCR检测证实,与对照组相比,过表达组和抑制组小鼠黑色素瘤细胞miR-124-3p表达水平分别极显著升高(P<0.01)和显著降低(P<0.05),表明成功构建腺病毒表达载体。过表达组、抑制组和对照组小鼠体重变化率分别为-5.5%、-12.4%和-8.6%。抑制组和对照组均可见肺泡壁增厚,其间有多量淋巴细胞浸润,部分肺泡内出现纤维蛋白渗出,且抑制组病理变化更为严重,肺泡中还有大量的红细胞浸润;而过表达组仅有少量的淋巴细胞浸润,肺脏组织较正常。与对照组相比,过表达组检测的炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05);抑制组炎症相关炎症因子mRNA表达水平均显著升高(P<0.05)。本试验结果表明,miR-124-3p对H1N1亚型SIV感染小鼠所致的肺脏炎症因子的表达具有抑制作用,同时能减轻肺脏病理损伤。 展开更多

关键词 microrna-124-3p H1N1亚型猪流感病毒 肺损伤 差异表达

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miR-214-3p对人卵巢癌细胞顺铂耐药及EGR1表达的影响 被引量：5

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作者 李艳 黄萱 +3 位作者 肖兰 张英 陈颍 石小燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第10期1525-1529,共5页

目的探讨微小RNA-214-3p(miR-214-3p)与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系,并分析miR-214-3p对早期生长反应因子1(EGR1)表达影响。方法脂质体方法行瞬时转染,CCK-8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡率;实时... 目的探讨微小RNA-214-3p(miR-214-3p)与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系,并分析miR-214-3p对早期生长反应因子1(EGR1)表达影响。方法脂质体方法行瞬时转染,CCK-8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡率;实时定量PCR(qRT-PCR)分析miR-214-3p及EGR1表达;蛋白质印迹法检测细胞EGR1及着色性干皮病基因(XPD)蛋白表达。结果人卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008中miR-214-3p表达高于人卵巢癌顺铂耐药细胞C13K(P<0.001)。转染48 h,miR-214-3p在OV2008 inhibitor组细胞(0.11±0.09)、C13K mimics组细胞(22.42±4.27),与OV2008空白对照组细胞(7.92±2.22)及C13K空白对照组细胞(0.33±0.16)比较,差异有统计学意义(P<0.001);C13K mimics组细胞增殖减慢,细胞凋亡上升,细胞对顺铂敏感性增加,OV2008 inhibitor组细胞增殖加快,细胞凋亡下降,对顺铂敏感性降低(P<0.01);miR-214-3p上调后EGR1在mRNA及蛋白水平表达升高,XPD蛋白降低;miR-214-3p下调使EGR1在mRNA及蛋白水平表达降低,XPD蛋白升高。结论miR-214-3p与卵巢癌细胞顺铂耐药有关,EGR1蛋白可能是miR-214-3p的下游靶点。 展开更多

关键词 microrna-214-3p 早期生长反应因子1 卵巢癌 顺铂耐药

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MiRNA-1247-3P在急性呼吸窘迫综合征细胞模型中的表达及功能分析 被引量：5

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作者 程东良 梁媛 +2 位作者 陈衍晨 卿娣 史长松 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第17期2802-2804,共3页

目的:检测脂多糖(LPS)处理A549细胞前后发生显著变化的mi RNAs,并验证mi R-1247-3P在不同浓度LPS处理后细胞中表达量的变化,并探讨其可能机制。方法:对照组是以培养液处理A549细胞,实验组分别以不同浓度的LPS处理A549细胞。通过免疫细... 目的:检测脂多糖(LPS)处理A549细胞前后发生显著变化的mi RNAs,并验证mi R-1247-3P在不同浓度LPS处理后细胞中表达量的变化,并探讨其可能机制。方法:对照组是以培养液处理A549细胞,实验组分别以不同浓度的LPS处理A549细胞。通过免疫细胞化学染色法、RT-PCR方法检测各组细胞中的SP-A、SP-C的表达量。用基因芯片检测细胞处理前后的表达谱,找出其中的关键mi RNA,PCR的方法检测各组细胞中mi RNA的表达量。结果:实验组中各组细胞的SP-A、SP-C的表达量较对照组均下降(P<0.05)。mi RNAs芯片检测结果显示:表达显著上调的有31个,显著下调的有3个。实时荧光定量PCR测出各实验组mi RNA-1247-3P的相对表达量较对照组均上升(P<0.05)。结论:mi RNA-1247-3P在实验组有高表达,提示其可能在ARDS的发生发展过程中发挥作用。 展开更多

关键词 急性呼吸窘迫综合征 microrna-1247-3p 肺表面活性蛋白A A549细胞

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MicroRNA?7?5p在人结直肠癌组织中的表达及其对CaCo2细胞增殖及凋亡的影响 被引量：10

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作者 张晓红 南琼 +1 位作者 吴秀方 耿婷 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第1期67-71,共5页

目的MicroRNAs在结直肠癌肿瘤组织和癌旁组织中存在差异性表达,且在结直肠癌的发生发展中起着重要调控作用。文章旨在探索microRNA-7-5p在结直肠癌患者中的表达及其对结肠癌细胞CaCo2增殖、凋亡的影响。方法利用高通量基因芯片筛选出差... 目的MicroRNAs在结直肠癌肿瘤组织和癌旁组织中存在差异性表达,且在结直肠癌的发生发展中起着重要调控作用。文章旨在探索microRNA-7-5p在结直肠癌患者中的表达及其对结肠癌细胞CaCo2增殖、凋亡的影响。方法利用高通量基因芯片筛选出差异性表达的microRNAs。利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测10例结直肠癌患者的肿瘤组织和与之对应的癌旁组织microRNA-7-5p的表达情况。采用蛋白印迹法(Western blot)检测不同组织以及转染microRNA-7-5p后CaCo2细胞中肠三叶因子(TFF3)的表达情况。通过TUNEL法联合流式细胞术检测转染后CaCo2细胞的凋亡情况。CCK-8实验检测转染后CaCo2细胞的增殖情况。结果MicroRNA-7-5p在结直肠癌组织中的相对表达量为(0.409±0.095),显著低于癌旁组织(1.000±0.014),差异有统计学意义(P<0.01)。TFF3在结直肠癌组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.01)。过表达microRNA-7-5p对照组在CaCo2细胞中TFF3的相对表达量降低(0.729±0.041),过表达microRNA-7-5p对照组在CaCo2细胞中的增殖能力(0.930±0.007)显著低于空白对照组(0.990±0.005),差异有统计学意义(P<0.01),并可增加早期凋亡细胞(50.700±0.989)和晚期凋亡细胞(40.525±0.515)的比例。结论microRNA-7-5p在结直肠癌中低表达,并与结直肠癌的发生、发展有关。上调的microRNA-7-5p可抑制结肠癌细胞CaCo2的增殖,促进其凋亡。 展开更多

关键词 microrna-7-5p 结直肠癌 细胞增殖 细胞凋亡 TFF3

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叔丁基对苯二酚对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及其机制研究 被引量：5

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作者 余曦 田敏 +2 位作者 何薇 胡萍 吕红彬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第8期719-723,共5页

目的探讨叔丁基对苯二酚(tert-Butylhydroquinone,t BHQ)对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及其机制,为DR防治提供新靶点。方法18只雄性SD大鼠随机分成3组:正常组、糖尿病组(高脂高糖饮食)和t BHQ干预组(高脂高糖饮食中加入质量分数1%t BHQ)... 目的探讨叔丁基对苯二酚(tert-Butylhydroquinone,t BHQ)对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及其机制,为DR防治提供新靶点。方法18只雄性SD大鼠随机分成3组:正常组、糖尿病组(高脂高糖饮食)和t BHQ干预组(高脂高糖饮食中加入质量分数1%t BHQ),后两组饮食干预4周后建立糖尿病大鼠模型,饮食干预3个月后处死各组大鼠。采集大鼠空腹血用于测定生化和胰岛素相关指标,HE染色观察大鼠视网膜各层组织变化,使用miRNA表达谱芯片测量大鼠视网膜差异性miRNA,实时定量PCR验证特定miRNA在3组大鼠视网膜的表达水平,分析差异性miRNA的相关通路。结果t BHQ干预组[(15.073±7.079)mmol·L^(-1)]较正常组[(7.635±1.421)mmol·L^(-1)]空腹血糖升高(P<0.05),较糖尿病组[(22.331±1.824)mmol·L^(-1)]降低(P<0.05)。t BHQ干预组[(47.961±15.256)μU·L^(-1)]血清胰岛素较正常组[(78.090±20.974)μU·L^(-1)]减少,而较糖尿病组[(17.533±3.959)μU·L^(-1)]增多(均为P<0.01)。HE染色结果示,糖尿病组大鼠视网膜出现严重水肿,各层结构不清,t BHQ干预组视网膜改变相对轻微。与糖尿病组大鼠相比,t BHQ干预组视网膜中miR-325-3p(>2.0倍)和miR-551b-3p(>1.5倍)上调,miR-652-3p(>2.0倍)下调。实时定量PCR验证miR-325-3p和miR-551b-3p为差异性miRNA,靶基因预测分析示miR-325-3p可介导21条信号通路。结论t BHQ可能通过miR-325-3p介导的信号通路对2型糖尿病大鼠视网膜起保护作用。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 叔丁基对苯二酚 MIRNA miR-325-3p miR-551b-3p

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