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猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒TaqMan二重荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 1; 作者杜鹃韦海涛 +7 位作者宋彦军郑瑞峰付彩霞何伟勇郭峰李佳吴惠明罗伏兵《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期44-47,I0004,共5页; 根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的S基因序列和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的N基因序列,设计特异性的引物和探针。通过对引物和探针浓度等反应液用量以及反应条件等因素进行优化试验,建立了能同时鉴别检测TGEV和PEDV的二重荧光RT-PCR方法。用... 展开更多; 关键词猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 猪流行性腹泻病毒(PEDV) TAQ man二重荧光rt-pcr; 在线阅读下载PDF 职称材料

通用型和O型口蹄疫病毒二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 2; 作者王淑娟王东方 +7 位作者刘影杨海波赵胜杰曹伟伟王翠赵雪丽马震原闫若潜《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期20-25,共6页; 为建立通用型和O型口蹄疫病毒(FMDV)二重荧光定量RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank已登录的不同亚型FMDV通用序列和O型FMDV序列设计了2对特异性引物和2条TaqMan MGB探针,经过反应条件和体系优化,建立了通用型(T型)和O型FMDV的二重荧光... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒二重荧光定量rt-pcr 建立应用; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒通用型和A型二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 3; 作者谢彩华班付国 +7 位作者闫若潜王东方张煜刘梅芬赵雪丽马震原王华俊王淑娟《中国动物检疫》 CAS 2018年第12期70-74,共5页; 为建立一种快速、敏感、特异的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)分型鉴别诊断实时荧光RT-PCR(Fluorescence quantitative,FQ-PCR)检测方法,根据O、A、AsiaⅠ三种血清型FMDV保守基因序列,设计能够检测到FMDV的特异性通用... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒二重实时荧光rt-pcr 检测方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种鉴别尼帕病毒和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：1: 4; 作者王建华董志珍 +2 位作者王玉玲肖妍赵祥平《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期348-355,共8页; 为建立一种快速、敏感和特异地鉴别尼帕病毒（NiV）和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）的检测方法,本试验以NiV M基因和HP-PRRSVnsp2基因为靶序列,通过优化反应条件建立了一种二重荧光RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、... 展开更多; 关键词尼帕病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 TAQman-MGB探针二重荧光rt-pcr方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸭坦布苏病毒和鸭瘟病毒二重荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：13: 5; 作者张艳芳谢芝勋 +6 位作者谢丽基刘加波范晴庞耀珊罗思思邓显文谢志勤《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期77-82,共6页; 本试验旨在建立同时检测鸭坦布苏病毒(DTMUV)和鸭瘟病毒(DPV)的二重荧光定量RT-PCR方法。针对GenBank中DTMUVE基因和DPVUL6基因的保守序列,设计合成了2对引物和2条TaqMan探针。通过优化反应体系、条件及评价其特异性、敏感性,建立了检测... 展开更多; 关键词鸭坦布苏病毒鸭瘟病毒二重荧光定量rt-pcr; 在线阅读下载PDF 职称材料

H6N1亚型禽流感病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：6: 6; 作者罗思思谢芝勋 +8 位作者谢志勤邓显文刘加波谢丽基黄莉黄娇玲曾婷婷张艳芳王盛《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期326-332,共7页; 根据GenBank中H6、N1亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA基因序列,设计2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。经反应条件优化,本试验建立了检测H6N1亚型AIV的二重荧光RT-PCR方法。该法特异性强,只对H6亚型和N1亚型AIV进行特异... 展开更多; 关键词禽流感病毒 H6N1亚型二重荧光rt-pcr; 在线阅读下载PDF 职称材料

小反刍兽疫疫苗毒株与强毒株的鉴别性荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：7: 7; 作者袁向芬吴绍强林祥梅《中国动物检疫》 CAS 2012年第7期30-34,共5页; 对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行分析,设计引物与探针,建立PPRV通用型与Ⅱ系疫苗毒特异型二重实时荧光RT-PCR方法,同时建立针对PPRVⅣ系强毒株的特异型荧光PCR方法。特异性试验和灵敏度试验表明:建立的二重荧光RT-PCR方... 展开更多; 关键词小反刍兽疫病毒鉴别疫苗毒与感染毒二重荧光rt-pcr; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒TaqMan二重荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 1; 作者杜鹃韦海涛宋彦军郑瑞峰付彩霞何伟勇郭峰李佳吴惠明罗伏兵; 机构北京市动物疫病预防控制中心北京市畜牧总站中国农业大学动物医学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期44-47,I0004,共5页; 文摘根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的S基因序列和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的N基因序列,设计特异性的引物和探针。通过对引物和探针浓度等反应液用量以及反应条件等因素进行优化试验,建立了能同时鉴别检测TGEV和PEDV的二重荧光RT-PCR方法。用该方法同时检测其他病原如Po RV、PCV和CSFV时不发生交叉反应,特异性好;较普通PCR均高出3个数量级的敏感性,能够检测10 TGEV和10 PEDV拷贝数,敏感性高;组内重复和组间重复试验结果变异系数小,稳定性好;同时检测2个模板的不同浓度组合试验,干扰性小。本试验建立的二重荧光RT-PCR方法可用于TGEV和PEDV的鉴别检测,且具有特异、敏感、稳定、快速等优点,为进一步应用于TGEV和PEDV的临床鉴别诊断和流行病学调查研究奠定了基础。; 关键词猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 猪流行性腹泻病毒(PEDV) TAQ man二重荧光rt-pcr; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名通用型和O型口蹄疫病毒二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 2; 作者王淑娟王东方刘影杨海波赵胜杰曹伟伟王翠赵雪丽马震原闫若潜; 机构河南省动物疫病预防控制中心; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期20-25,共6页; 基金河南省科技创新人才计划项目(174200510003)。; 文摘为建立通用型和O型口蹄疫病毒(FMDV)二重荧光定量RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank已登录的不同亚型FMDV通用序列和O型FMDV序列设计了2对特异性引物和2条TaqMan MGB探针,经过反应条件和体系优化,建立了通用型(T型)和O型FMDV的二重荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;对15份临床疑似样品进行了应用检测。结果表明,成功建立通用型和O型FMDV二重FQ-PCR检测方法,该方法可特异性地扩增经灭活的O型、A型与AsiaⅠ型口蹄疫病毒标准株细胞培养物混合物,但对BHK-21细胞和PEDV、TGEV、SVV等病原对照不出现特异性扩增曲线,特异性好;检测模板最低极限为1.0×101拷贝/μL,敏感性高,重复性好;自15份临床疑似FMDV感染样品中检出9份FMDV-T阳性,7份FMDV-O阳性,检测结果与测序结果完全一致,且与国家口蹄疫参考实验室复核结果一致。本试验成功建立了通用型和O型FMDV二重FQ-PCR检测方法,为FMDV的快速检测及O型FMDV的分型诊断提供了特异、敏感、快速的方法。; 关键词口蹄疫病毒二重荧光定量rt-pcr 建立应用; Keywords foot-and-mouth disease virus duplex real-time rt-pcr establishment application; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒通用型和A型二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 3; 作者谢彩华班付国闫若潜王东方张煜刘梅芬赵雪丽马震原王华俊王淑娟; 机构河南省动物疫病预防控制中心开封市动物卫生监督所; 出处《中国动物检疫》 CAS 2018年第12期70-74,共5页; 基金河南省科技创新人才计划项目(174200510003); 文摘为建立一种快速、敏感、特异的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)分型鉴别诊断实时荧光RT-PCR(Fluorescence quantitative,FQ-PCR)检测方法,根据O、A、AsiaⅠ三种血清型FMDV保守基因序列,设计能够检测到FMDV的特异性通用检测引物和A型检测引物,以及不同荧光素标记的MGB探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了FMDV通用型和A型二重实时荧光RT-PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法,对123份疑似FMDV感染的临床样品进行了检测。结果显示,建立的FMDV通用型、A型二重实时荧光RT-PCR检测方法在10~1～10~7拷贝/μL模板范围内有很好的线性关系;对pGEM-T/FMDV-T和pGEM-T/FMDV-A重组质粒出现阳性扩增信号,但对正常细胞培养物对照和其他7种病原对照未扩增出特异性曲线;自123份疑似FMDV感染样品中,检出10份FMDV-T阳性,6份FMDV-T/FMDV-A双阳性并且与基因测序结果一致。结果表明,本研究建立的FMDV通用型、A型二重实时荧光RT-PCR检测方法重复性好、敏感性高、特异性强,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,可用于FMDV的快速分型检测,为FMDV的早期检测及临床诊断提供了新方法。; 关键词口蹄疫病毒二重实时荧光rt-pcr 检测方法; Keywords FMDV duplex real-time rt-pcr assay detection method; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种鉴别尼帕病毒和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：1: 4; 作者王建华董志珍王玉玲肖妍赵祥平; 机构天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期348-355,共8页; 基金天津市科技支撑项目(13ZCZDNCO1300) 天津市滨海新区科技计划项目(2013-BK15H013); 文摘为建立一种快速、敏感和特异地鉴别尼帕病毒（NiV）和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）的检测方法,本试验以NiV M基因和HP-PRRSVnsp2基因为靶序列,通过优化反应条件建立了一种二重荧光RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、定量线性范围、敏感性和重复性进行了评价及初步应用。结果显示,用该方法检测NiV M基因和HP-PRRSVnsp2基因的RNA标准对照（NiV-M-RNA和HP-PRRSV-nsp2-RNA）,线性范围分别为4.6×101-4.6×107和4.1×101-4.1×108拷贝/μL;最低检出限分别为46和4.1拷贝;该方法组内试验和组间试验的变异系数均小于2.0%,显示出良好的可重复性;该方法仅对NiV和HP-PRRSV呈现特异性扩增曲线,不与猪瘟病毒（CSFV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪流感病毒（SIV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）和猪圆环病毒2型（PCV2）发生交叉反应。用该方法对236份猪实际样品进行NiV和HP-PRRSV核酸检测,所有样本的NiV检测结果均为阴性,8份样本的HP-PRRSV检测结果为阳性。本研究建立的方法为猪实际样本中NiV和HP-PRRSV的鉴别检测提供了一种快速、敏感和特异的技术手段。; 关键词尼帕病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 TAQman-MGB探针二重荧光rt-pcr方法; Keywords Nipha virus highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus Taqman-MGB probe duplex Real-time rt-pcr; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸭坦布苏病毒和鸭瘟病毒二重荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：13: 5; 作者张艳芳谢芝勋谢丽基刘加波范晴庞耀珊罗思思邓显文谢志勤; 机构广西壮族自治区兽医研究所、广西畜禽疫苗新技术重点试验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期77-82,共6页; 基金广西特聘专家专项(2011B020) 广西科技项目(1222003-2-4、10100014-5) 广西畜禽疫苗新技术重点实验室经费(12-071-28-A-3、12-071-28-A-4); 文摘本试验旨在建立同时检测鸭坦布苏病毒(DTMUV)和鸭瘟病毒(DPV)的二重荧光定量RT-PCR方法。针对GenBank中DTMUVE基因和DPVUL6基因的保守序列,设计合成了2对引物和2条TaqMan探针。通过优化反应体系、条件及评价其特异性、敏感性,建立了检测DTMUV和DPV的二重荧光定量RT-PCR方法。该方法对DTMUV和DPV的检测灵敏度均达100个模板拷贝数,同时该方法对鸭源新城疫病毒、鸭肝炎病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒和减蛋综合征病毒的检测结果均为阴性。本研究建立的DTMUV和DPV二重荧光定量RT-PCR具有敏感、快速、特异、定量、重复性好等优点,可用于DTMUV和DPV感染的快速鉴别诊断。; 关键词鸭坦布苏病毒鸭瘟病毒二重荧光定量rt-pcr; Keywords .duck tembusu virus duck plague virus duplex Real-time rt-pcr; 分类号 S858.32 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H6N1亚型禽流感病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：6: 6; 作者罗思思谢芝勋谢志勤邓显文刘加波谢丽基黄莉黄娇玲曾婷婷张艳芳王盛; 机构广西壮族自治区兽医研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期326-332,共7页; 基金广西科技攻关重大专项(14121003-4-2) 广西水产畜牧兽医局科研项目(桂渔牧科201452001) 广西科技攻关项目(桂科合14123001-8); 文摘根据GenBank中H6、N1亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA基因序列,设计2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。经反应条件优化,本试验建立了检测H6N1亚型AIV的二重荧光RT-PCR方法。该法特异性强,只对H6亚型和N1亚型AIV进行特异性扩增,对其他H亚型AIV、N亚型AIV及新城疫病毒、传染性支气管炎病毒等病原体的检测均为阴性;该法敏感性好,对H6N1亚型AIV的检测限为100拷贝/μL。本试验建立的H6N1亚型AIV的二重荧光RT-PCR方法,具有快速、敏感、特异的优点,为H6N1亚型AIV的防控提供技术支撑。; 关键词禽流感病毒 H6N1亚型二重荧光rt-pcr; Keywords avian influenza virus H6N1 subtype duplex Real-time rt-pcr; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小反刍兽疫疫苗毒株与强毒株的鉴别性荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：7: 7; 作者袁向芬吴绍强林祥梅; 机构中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所; 出处《中国动物检疫》 CAS 2012年第7期30-34,共5页; 基金国家质检总局科研计划项目(2011IK022); 文摘对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行分析,设计引物与探针,建立PPRV通用型与Ⅱ系疫苗毒特异型二重实时荧光RT-PCR方法,同时建立针对PPRVⅣ系强毒株的特异型荧光PCR方法。特异性试验和灵敏度试验表明:建立的二重荧光RT-PCR方法可特异性检测PPRV病毒,其HEX信号通道(通用型)和TAMRA信号通道(Ⅱ系疫苗毒特异型)的检测灵敏度分别可达101TCID50/mL和102TCID50/mL,完全满足PPRV的检测要求。用二重荧光RT-PCR方法对西藏采集的14份羊血清样品进行检测,并用建立的Ⅳ系强毒株特异型荧光PCR方法对二重荧光RT-PCR的检测效果进行评估,结果显示,该方法可有效甄别PPRV强毒株和疫苗毒株,避免假阳性结果的出现。; 关键词小反刍兽疫病毒鉴别疫苗毒与感染毒二重荧光rt-pcr; Keywords Peste despetits ruminants virus, differentiation, vaccine strain and Wild-type strain, duplex, RT-qPCR; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒TaqMan二重荧光RT-PCR检测方法的建立	杜鹃韦海涛宋彦军郑瑞峰付彩霞何伟勇郭峰李佳吴惠明罗伏兵	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	通用型和O型口蹄疫病毒二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用	王淑娟王东方刘影杨海波赵胜杰曹伟伟王翠赵雪丽马震原闫若潜	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	口蹄疫病毒通用型和A型二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立	谢彩华班付国闫若潜王东方张煜刘梅芬赵雪丽马震原王华俊王淑娟	《中国动物检疫》 CAS	2018	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一种鉴别尼帕病毒和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立	王建华董志珍王玉玲肖妍赵祥平	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	鸭坦布苏病毒和鸭瘟病毒二重荧光定量RT-PCR方法的建立	张艳芳谢芝勋谢丽基刘加波范晴庞耀珊罗思思邓显文谢志勤	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2014	13	在线阅读下载PDF 职称材料
6	H6N1亚型禽流感病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立	罗思思谢芝勋谢志勤邓显文刘加波谢丽基黄莉黄娇玲曾婷婷张艳芳王盛	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2016	6	在线阅读下载PDF 职称材料
7	小反刍兽疫疫苗毒株与强毒株的鉴别性荧光RT-PCR检测方法的建立	袁向芬吴绍强林祥梅	《中国动物检疫》 CAS	2012	7	在线阅读下载PDF 职称材料