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白菜核雄性不育两用系花蕾的mRNA差别显示及其cDNA差异片段分析 被引量:16
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作者 曹家树 叶纨芝 +1 位作者 张明 曾广文 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期596-600,共5页
用 m RNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总 RNA进行了比较分析 .在 6种反转录模板和 2 0种差异随机引物共 12 0种组合的选择扩增中共回收了 18个 c DNA差异片段 ,对其中 6个 c DNA差异片段进行 Northern验... 用 m RNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总 RNA进行了比较分析 .在 6种反转录模板和 2 0种差异随机引物共 12 0种组合的选择扩增中共回收了 18个 c DNA差异片段 ,对其中 6个 c DNA差异片段进行 Northern验证 ,获得了一个白菜核雄性不育两用系可育株群并在花蕾中特异表达的阳性差异片段 ,简称为 B0 30 2 - 4 .Northern验证结果表明它在不育株中的表达受到了明显的抑制 ,其长度为 4 6 3bp.经 Gen Bank BLAST查询 ,它与拟南芥第一条染色体上编码细胞色素 P4 5 0的基因 CYP86 C4核苷酸序列有 84 .3%的同源性 . 展开更多
关键词 白菜 核雄性不育 mrna差别显示 cDNA差别片段 两用系花蕾
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显性核不育亚麻可育、不育花蕾mRNA差异表达研究及差异片段分析 被引量:5
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作者 斯钦巴特尔 李强 +3 位作者 张辉 哈斯阿古拉 贾霄云 高凤云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期67-70,共4页
利用mRNA差异显示技术,以显性雄性核不育亚麻不育系分离出的可育株和不育株为材料,对可育、不育花蕾中基因差异性表达进行了研究。对回收的差异片段进行反向Northern杂交验证,获得了7个阳性差异表达基因片段,并对它们进行测序和BLAST分... 利用mRNA差异显示技术,以显性雄性核不育亚麻不育系分离出的可育株和不育株为材料,对可育、不育花蕾中基因差异性表达进行了研究。对回收的差异片段进行反向Northern杂交验证,获得了7个阳性差异表达基因片段,并对它们进行测序和BLAST分析,最后确定了3个候选基因片段G-E07-100、G-E07-830和G-E07-330。序列分析结果表明:G-E07-100与蓖麻(Ricinus communis)的GTP-结合蛋白基因部分序列高度(90%)同源;G-E07-830与梨(Pyrus pyrifolia)的β-木糖苷酶基因高度同源(80%),并且还包含1个糖基水解酶家族C-末端的保守结构域;G-E07-330与亚麻(Linum usitatissimum)LuP12025D10 cDNA高度(89%)同源。进一步的Northern杂交结果表明3个候选基因均在不育花蕾中表达。 展开更多
关键词 亚麻 显性雄性核不育 mrna差异显示 NORTHERN杂交 序列分析
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西瓜细胞核雄性不育系雄花蕾的mRNA差异表达分析 被引量:2
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作者 张彦萍 刘海河 +1 位作者 谢彬 郭守鹏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1037-1041,共5页
为阐明西瓜G17AB系雄性不育发生的分子机制,采用mRNA差异显示技术,分析了不育株与可育株雄花蕾发育过程中基因表达的差异,经重复验证,获得了2个稳定表达的差异cDNA片段:C13F和G10S。经克隆测序和同源性分析,C13F片段与拟南芥β-葡萄糖... 为阐明西瓜G17AB系雄性不育发生的分子机制,采用mRNA差异显示技术,分析了不育株与可育株雄花蕾发育过程中基因表达的差异,经重复验证,获得了2个稳定表达的差异cDNA片段:C13F和G10S。经克隆测序和同源性分析,C13F片段与拟南芥β-葡萄糖苷酶酶蛋白的部分编码序列具有80%同源性;G10S片断与菜豆泛素mRNA的编码序列具有92%同源性。 展开更多
关键词 西瓜 细胞核雄性不育 mrna差异显示
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水稻滇一型不育系及保持系花药mRNA差异显示 被引量:5
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作者 高风华 谭学林 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第2期150-153,共4页
运用mRNA差异显示技术,对水稻滇一型雄性不育系和保持系花药基因表达差异进行了比较研究。以专门设计用于差异显示的90对PCR引物组合,分析滇一型10对不同品系的不育系和保持系花药基因表达差异。结果表明:这90个引物组合均有扩增产... 运用mRNA差异显示技术,对水稻滇一型雄性不育系和保持系花药基因表达差异进行了比较研究。以专门设计用于差异显示的90对PCR引物组合,分析滇一型10对不同品系的不育系和保持系花药基因表达差异。结果表明:这90个引物组合均有扩增产物,扩增的cDNA片段在100—2000bp之间;不育系和保持系花药cDNA扩增带型相似。在这90个引物组合中仅有15对引物组合在单对的不育系和保持系间显示多态性,而且大多数的多态性引物组合仅扩增出一条差异带。在所找到的差异中,一般总是保持系有一条带,而不育系没有对应的带或是一条很弱的带。该结果表明不育系和保持系花药mRNA差异很少。所幸的是,在这些引物组合中,只有T8×P1引物组合(5'-ATGCTGAGTGATATCTITITITITG×5'-ATTAACCCTCACTAAATGCTGGGGA-3’)在10对不育系和保持系问扩增出一个共同的差异cDNA片断:保持系在750~1000bp之间有一条带,而不育系没有对应的带或是一条表达很弱的带,这很可能就是保持系和不育系的育性基因表达差异的结果。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育 滇一型雄性不育系 基因表达 mrna差异照示
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不结球白菜Pol胞质雄性不育系和保持系蕾期基因的差异表达 被引量:5
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作者 张昌伟 张蜀宁 +2 位作者 侯喜林 齐莉 孙菲菲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1545-1550,共6页
以不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系为材料,利用cDNA-AFLP技术分析它们蕾期基因的差异表达,以获得与胞质不育相关的差异表达基因.结果共得到7条在GenBank中有同源性的差异表达片段,5条存在于不育系中,2条存在于保持系中.序列分析... 以不结球白菜Pol胞质雄性不育系及其保持系为材料,利用cDNA-AFLP技术分析它们蕾期基因的差异表达,以获得与胞质不育相关的差异表达基因.结果共得到7条在GenBank中有同源性的差异表达片段,5条存在于不育系中,2条存在于保持系中.序列分析发现,在不育系花蕾克隆到的5条差异片段,分别与芥菜胞质雄性不育系线粒体orf108和atpA、拟南芥焦磷酸酶基因、拟南芥的锚定蛋白家族基因、甘蓝型油菜中的水胁迫蛋白、大白菜叶绿体基因片段有较高同源性;在保持系花蕾克隆到的2条差异片段分别与拟南芥未知蛋白基因有较高同源性.采用实时定量PCR验证其中5条差异片段在不育系和保持系花蕾中的表达水平,结果表明bcA19T15、bcA7T9在不育系中特异表达,bcA6T9、bcA19T8、bcA12T19在不育中表达比保持系中略强. 展开更多
关键词 不结球白菜 POL Cms CDNA-AFLP 差异表达 实时定量pcr
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植物雄性育性相关基因的克隆方法 被引量:3
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作者 李强 张辉 +4 位作者 斯钦巴特尔 高凤云 贾霄云 郭树春 陈强 《内蒙古农业科技》 2008年第3期21-24,共4页
文章基于植物分子生物学的研究成果,介绍了几种克隆植物雄性育性相关基因的方法,其中包括mRNA差异显示技术、染色体步行法(Chromosome walking)、基因标签法(Gene tagging)、基因序列同源克隆法等。
关键词 植物雄性不育 mrna差异显示技术 染色体步行 基因标签 基因序列同源克隆法
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玉米雄性不育细胞质特异DNA片段的发现及差异展示
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作者 曹墨菊 荣廷昭 朱英国 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期747-752,共6页
利用3对线粒体引物对玉米同核异质和同质异核不育系的基因组总DNA进行PCR扩增;对检测到多态性的引物,再分别对供试材料小孢子发育至四分体、单核期和双核期的花药总RNA进行差异显示分析。结果表明:以基因组总DNA为模板,引物P1-P2在所有... 利用3对线粒体引物对玉米同核异质和同质异核不育系的基因组总DNA进行PCR扩增;对检测到多态性的引物,再分别对供试材料小孢子发育至四分体、单核期和双核期的花药总RNA进行差异显示分析。结果表明:以基因组总DNA为模板,引物P1-P2在所有供试不育材料都有一相同的特异扩增带,而在保持系中均无扩增;引物P3-P4在所有供试材料中均无扩增;引物P5-P6仅在保持系黄早四中有扩增,而在其他供试材料中无扩增。这一结果说明以P1-P2为引物所检测到的特异扩增带为所有供试不育细胞质所特有,且不受供试材料不同核背景的影响。对于在不育材料基因组总DNA中具有特异扩增的引物P1-P2,进一步以cDNA为模板进行PCR扩增(RT-PCR),所有不育材料在小孢子发育的3个时期均有一相同的特异扩增带,而保持系在小孢子发育的相应时期均无扩增,说明以P1-P2为引物所检测到的转录本的大小和数目,在同核异质及同质异核不育材料间均表现一致,且不受小孢子发育时期的影响。这说明以P1-P2为引物所检测到的不育材料DNA水平的共同结构特点在小孢子发育中具有转录上的一致性,因此可以认为供试不育细胞质DNA水平的这一特异序列结构与雄性不育性状的表现有关。 展开更多
关键词 玉米 细胞质雄性不育 同核异质 同质异核 pcr扩增 差异展示
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