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基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制 被引量：4
1
作者 章帅 刘靓靓 +2 位作者 赵轶峰 盛茹 李曙光 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期508-514,共7页
目的探讨基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制。方法30只大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,MAGE-3沉默(SM)组,每组10只,对MO组、SM组采用MNNG灌胃法建模,建模成功后,... 目的探讨基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制。方法30只大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,MAGE-3沉默(SM)组,每组10只,对MO组、SM组采用MNNG灌胃法建模,建模成功后,对SM组腹腔注射20μg·kg^(-1) shRNA MAGE-3慢病毒载体,肠道菌群选择性培养基检测大鼠肠道菌群数量,免疫组化法检测胃黏膜PTEN表达,HE染色检测肝转移情况,免疫印迹法检测MAPK/ERK信号通路蛋白表达,体外实验验证siRNA介导MAGE-3沉默对MAPK/ERK信号通路的调节作用。结果与CO组相比,MO组肠球菌、大肠埃希菌含量、p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达升高(P<0.05),乳酸杆菌、双岐杆菌含量、PTEN表达降低(P<0.05),与MO组比较,SM组肠球菌、大肠埃希菌含量、p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达降低(P<0.05),乳酸杆菌、双岐杆菌含量、PTEN表达升高(P<0.05);与CO组相比,MO组细胞p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达无明显差异(P>0.05),与MO组比较,SM组细胞p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达降低(P<0.05)。结论siRNA介导MAGE-3沉默可明显改善胃癌大鼠肠道菌群,促进胃黏膜PTEN表达,并抑制肝转移,其作用机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 MAPK/ERK信号通路 mage-3 胃癌 肠道菌群 PTEN 肝转移
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MAGED4通过SIRT7激活PI3K/AKT信号通路促进胶质瘤细胞增殖
2
作者 叶爱 钟子亮 +7 位作者 李枫 谢欢 邹小琼 王国鉴 王紫 罗彬 张庆梅 谢小薰 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第12期2235-2246,共12页
目的分析黑色素瘤相关抗原D4(MAGED4)和去乙酰化酶7(SIRT7)在胶质瘤中的表达情况及二者之间的相关性,探讨MAGED4和SIRT7对胶质瘤细胞增殖的潜在作用。方法通过中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)、人类蛋白质图谱(HPA)和UALCAN数据库分析MAGED4... 目的分析黑色素瘤相关抗原D4(MAGED4)和去乙酰化酶7(SIRT7)在胶质瘤中的表达情况及二者之间的相关性,探讨MAGED4和SIRT7对胶质瘤细胞增殖的潜在作用。方法通过中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)、人类蛋白质图谱(HPA)和UALCAN数据库分析MAGED4和SIRT7表达水平及二者的相关性;采用生存分析、ROC曲线分析和Cox回归分析MAGED4和SIRT7对胶质瘤患者预后的影响;采用基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析探究胶质瘤中MAGED4和SIRT7的生物学功能;采用Western blot法探讨MAGED4蛋白是否通过SIRT7对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)信号通路的活性产生调控作用;通过CCK-8法探究MAGED4通过SIRT7对胶质瘤细胞增殖的影响。结果CGGA、UALCAN和HPA数据库分析结果显示,胶质瘤组织中MAGED4和SIRT7表达水平均高于正常脑组织(P<0.05),且二者表达呈正相关;生存分析、ROC曲线分析和Cox回归分析结果显示,MAGED4和SIRT7高表达是胶质瘤预后不良的危险因素;KEGG富集分析结果显示,MAGED4和SIRT7可能参与胶质瘤中PI3K/AKT信号通路的调控;Western blot结果显示,MAGED4通过SIRT7激活PI3K/AKT信号通路;CCK-8结果显示,MAGED4通过SIRT7促进胶质瘤细胞增殖。结论MAGED4和SIRT7在胶质瘤中高表达且与胶质瘤预后不良相关,MAGED4通过SIRT7激活PI3K/AKT信号通路促进胶质瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 mageD4 SIRT7 PI3K/AKT 胶质瘤 KEGG富集分析 细胞增殖
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MAGE-1、MAGE-3基因在胃癌和胃活检组织中的表达及意义 被引量：13
3
作者 陈雪华 刘炳亚 +4 位作者 张冬青 张奕 张轶 李建芳 朱正纲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期310-313,共4页
目的 :检测黑色素瘤抗原基因 1、 3(MAGE 1和MAGE 3)在胃癌中的表达 ,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法 :采用RT PCR法 ,对 36例胃癌患者的癌组织和相应的癌旁“正常”黏膜 ,以及 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织中 ,MAGE 1和MAG... 目的 :检测黑色素瘤抗原基因 1、 3(MAGE 1和MAGE 3)在胃癌中的表达 ,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法 :采用RT PCR法 ,对 36例胃癌患者的癌组织和相应的癌旁“正常”黏膜 ,以及 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织中 ,MAGE 1和MAGE 3基因的表达进行研究 ,并对RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果 :36例胃癌组织中 ,MAGE 1基因的表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36 ) ,MAGE 3基因的表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36 )。MAGE 1、MAGE 3的表达均为阳性者为 5 2 .78% (19/ 36 )。癌旁“正常”黏膜中 ,MAGE 1、MAGE 3基因的表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36 )和4 4 .4 4 % (16 / 36 ) ;MAGE 1、MAGE 3基因表达双阳性者为 30 .5 5 % (11/ 36 )。在 37例胃慢性炎症患者中 ,MAGE 1、MAGE 3基因的表达阳性率 ,分别为 2 9.73% (11/ 37)和 2 7.0 3% (10 /37) ;MAGE 1、MAGE 3基因的表达双阳性者为 8.1% (3/ 37)。胃癌组织中 ,MAGE 1和MAGE 3基因表达阳性率均高于癌旁和胃慢性炎症患者 ;在肿瘤组织中的表达阳性率与肿瘤浸润的深度和分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ;而与临床病理分期及淋巴结转移无关 (P >0 .0 5 )。结论 :基于MAGE 1和MAGE 3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用这两种蛋白作为靶? 展开更多
关键词 胃癌 慢性胃炎 mage-1 mage-3 基因表达
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非小细胞肺癌组织中MAGE-A3和MAGE-C2 mRNA的表达 被引量：8
4
作者 马星 陈新峰 +3 位作者 张超奇 乔亚敏 张毅 王丽萍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第5期580-585,共6页
目的:检测肿瘤相关抗原恶性黑色素瘤相关抗原(MAGE)-A3、MAGE-C2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并探讨其临床意义。方法:收集206例NSCLC手术患者肿瘤组织,应用real-time PCR技术检测组织中MAGE-A3、MAGE-C2 mRNA的表达,并分析其与N... 目的:检测肿瘤相关抗原恶性黑色素瘤相关抗原(MAGE)-A3、MAGE-C2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并探讨其临床意义。方法:收集206例NSCLC手术患者肿瘤组织,应用real-time PCR技术检测组织中MAGE-A3、MAGE-C2 mRNA的表达,并分析其与NSCLC患者临床病理特征(性别、年龄、组织学分级、病理类型、淋巴结转移和临床分期)之间的关系。用基因沉默的方法将肺癌A549细胞MAGE-A3下调,观察处理前后MAGE-A3mRNA表达水平的改变,并分析其对细胞生物学功能(凋亡率、成球率、穿膜细胞数)的影响。结果:MAGE-A3、MAGE-C2 mRNA在NSCLC组织中的表达率分别是73.3%(151/206)和52.9%(109/206);MAGE-A3 mRNA的表达与疾病分期和淋巴结转移有关(P<0.05);不同病理特征的NSCLC组织中MAGE-C2 mRNA的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);MAGE-A3、MAGE-C2 mRNA共表达与年龄和临床分期有关(P<0.05)。MAGE-A3表达降低后肺癌A549细胞的成球能力和侵袭转移能力降低(P<0.001)。结论:MAGE-A3、MAGE-C2在NSCLC组织中有较高的表达率,两者有望成为肺癌免疫治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mage-A3 mage-C2
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MAGE-1 MAGE-3及AFP基因在肝癌组织中的表达 被引量：2
5
作者 刘宁 梁寒 +11 位作者 李强 李慧 任秀宝 张毓青 张汝鹏 刘勇 王晓娜 丁学伟 潘源 邓靖宇 詹宏杰 郝希山 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期493-496,共4页
目的:探讨MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA在肝癌组织中的表达及用于检测微小转移的可能性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的表达。结果:86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3... 目的:探讨MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA在肝癌组织中的表达及用于检测微小转移的可能性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的表达。结果:86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的阳性率分别为34.9%(30/86)、60.5%(52/86)和69.8%(60/86);所有患者肝癌组织至少表达其中一种mRNA。结论:MAGE-1、MAGE-3结合AFP mRNA在肝癌组织中表达率较高,有可能用于联合检测肝癌血行微小转移。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 mage-1 mage-3 AFP肝癌 微转移
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MAGE-A9和MAGE-A11基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量：3
6
作者 侯淑芸 桑梅香 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期428-436,共9页
目的:探讨黑素瘤抗原MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺正常组织、乳腺良性病变、乳腺癌组织中的表达以及甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对MAGEA9和MAGE-A1... 目的:探讨黑素瘤抗原MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺正常组织、乳腺良性病变、乳腺癌组织中的表达以及甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对MAGEA9和MAGE-A11基因表达的影响。方法:应用RT-PCR和免疫组化方法检测60例乳腺正常组织、60例乳腺良性病变及60例乳腺癌组织(标本均取自河北医科大学第四医院乳腺中心2007年11月至2008年5月乳腺手术治疗患者)中MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA及其蛋白的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理学特征的关系。RT-PCR检测乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231经5-Aza-CdR和TSA单独或联合作用后MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表达量的变化。结果:乳腺癌组织中MAGE-A9mRNA和蛋白阳性表达率分别为45%(27/60)和43.3%(26/60),MAGE-A11 mRNA和蛋白阳性表达率分别为66.7%(40/60)和63.3%(38/60),而乳腺正常组织及良性病变组织中均未发现MAGE-A9、MAGE-A11 mRNA及其蛋白的表达。MAGE-A9、MAGE-A11 mRNA和蛋白的表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移、瘤栓及孕激素受体的表达均无明显关系(P>0.05),但与人表皮生长因子受体2(HER-2)和雌激素受体(ER)的表达有关(P<0.05)。未经药物处理的MCF-7、MDA-MB-231细胞未见MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表达;单用5-Aza-CdR处理后可见MAGE-A9和MAGE-A11基因重新表达,联合应用5-Aza-CdR和TSA处理可使MAGE-A9、MAGE-A11基因的表达量进一步增加(P<0.05);而TSA单独处理对基因表达没有影响(P>0.05)。结论:乳腺癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11的表达与ER和HER-2的表达有关,5-AzaCdR单用或联合应用TSA可诱导和增强MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的重新表达,说明DNA的去甲基化和组蛋白乙酰化可能是调控人类肿瘤细胞MAGE表达的重要机制。 展开更多
关键词 乳腺癌 mage-A9 mage-A11 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 曲古抑菌素A
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肿瘤特异性抗原(MAGE)在肿瘤免疫治疗中的作用 被引量：3
7
作者 房金波 王丽 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期273-275,共3页
目前,已经发现肿瘤特异性抗原Mage基因家族有55个成员,其中MageA、B和C三个亚家族在各种组织来源的恶性肿瘤中特异性表达,正常组织(睾丸除外)均不表达。所以,Mage抗原作为肿瘤的特异性标志,在肿瘤的检测和免疫治疗方面具有很大的应用潜... 目前,已经发现肿瘤特异性抗原Mage基因家族有55个成员,其中MageA、B和C三个亚家族在各种组织来源的恶性肿瘤中特异性表达,正常组织(睾丸除外)均不表达。所以,Mage抗原作为肿瘤的特异性标志,在肿瘤的检测和免疫治疗方面具有很大的应用潜力。本文介绍了Mage家族的基因定位,Mage蛋白的特性,Mage基因的作用。同时,总结了近年来Mage基因家族在临床方面的应用研究结果。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原基因 肿瘤特异性抗原 肿瘤免疫治疗 mage蛋白 mage基因
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CAGE MAGE-A1和MAGE-A3去甲基化在胃癌发生发展中的作用 被引量：1
8
作者 刘应莉 王柏清 刘文天 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期1192-1195,共4页
目的:探讨肿瘤相关抗原基因(CAGE)、黑色素瘤抗原基因-A1(MAGE-A1)和黑色素瘤抗原基因-A3(MAGE-A3)启动子区去甲基化状态改变在胃癌早期发生、发展中的作用及意义。方法:87例内镜活检标本分为胃癌组、癌前病变组和正常对照组,应用甲基... 目的:探讨肿瘤相关抗原基因(CAGE)、黑色素瘤抗原基因-A1(MAGE-A1)和黑色素瘤抗原基因-A3(MAGE-A3)启动子区去甲基化状态改变在胃癌早期发生、发展中的作用及意义。方法:87例内镜活检标本分为胃癌组、癌前病变组和正常对照组,应用甲基化特异性PCR方法分别检测各组中3种基因启动子区的去甲基化状态。结果:胃癌组、癌前病变组和正常对照组中,各基因启动子区的去甲基化阳性率分别为:CAGE:80.0%(24/30)、37.5%(12/32)和4.0%(1/25);MAGE-A1:60.0%(18/30)、21.9%(7/32)和0(0/25);MAGE-A3:46.7%(14/30)、12.5%(4/32)和8.0%(2/25),呈下降趋势。3种基因启动子区去甲基化阳性率在3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。30例胃癌至少发生1种基因启动子区去甲基化的有27例;至少发生2种基因启动子区去甲基化23例;7例同时发生了3种基因启动子区的去甲基化。结论:这3种基因启动子区去甲基化改变可能发生于胃癌发病早期,且贯穿于胃癌发生、发展的全过程并起到一定的作用,联合检测可能有助于提高胃癌去甲基化诊断的阳性率。 展开更多
关键词 CAGE mage-A1 mage-A3 DNA低甲基化 胃癌
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MAGE-1、-2、-3基因在消化道肿瘤中的表达 被引量：4
9
作者 邵莹 刘海燕 +5 位作者 李慧 王殿昌 柳健中 梁寒 魏健 郝希山 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期33-35,共3页
关键词 消化道肿瘤 mage基因 基因表达 mages RT-PCR
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MAGE基因mRNA在肺癌细胞中的表达 被引量：5
10
作者 沈晨阳 王丹蕾 +2 位作者 姜冠潮 刘军 张国良 《中国肺癌杂志》 CAS 2003年第4期268-271,共4页
目的　检测MAGE 1、 2、 3、 4基因在肺癌细胞及癌旁正常肺组织中mRNA的表达水平。方法　用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 3 5例肺癌患者肿瘤组织和癌旁正常肺组织进行MAGE 1、 2、 3、 4mRNA表达检测。结果　 3 5例肺癌肿瘤标本... 目的　检测MAGE 1、 2、 3、 4基因在肺癌细胞及癌旁正常肺组织中mRNA的表达水平。方法　用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 3 5例肺癌患者肿瘤组织和癌旁正常肺组织进行MAGE 1、 2、 3、 4mRNA表达检测。结果　 3 5例肺癌肿瘤标本中MAGE 1、 2、 3、 4的阳性表达率分别为 2 2 .9% ( 8/3 5 )、62 .9% ( 2 2 /3 5 )、3 7.1% ( 13 /3 5 )、77.1% ( 2 7/3 5 ) ;四种基因至少有一种表达的几率是 85 .7% ( 3 0 /3 5 ) ;两种或两种以上同时表达几率是 71.4% ( 2 5 /3 5 )。癌旁正常肺组织四种基因均不表达。MAGE基因的表达在肺腺癌和鳞癌 ,在不同分期的非小细胞肺癌间无差异 ,并且与淋巴结转移与否无关 (P >0 .0 5 )。结论　MAGE 1、 2、 3、 4在肺癌组织中有较高比例的表达 ,癌旁正常肺组织中无表达。 展开更多
关键词 mage基因 肺癌 癌细胞 基因表达 检测 肿瘤抗原 免疫治疗
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RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究 被引量：5
11
作者 程光 章翔 +5 位作者 鲍炜 张赟 张新海 曹卫东 高大宽 宋蕾 《医学研究生学报》 CAS 2006年第4期292-297,i0011,共7页
目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上... 目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。 展开更多
关键词 PSUPER 短片段双链核糖核酸 核糖核酸干扰 mage—1 胶质瘤
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肝癌组织中三个MAGE家族基因的克隆 被引量：5
12
作者 刘彬彬 叶胜龙 +1 位作者 贺平 汤钊猷 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期87-90,共4页
目的:从肝癌组织中克隆肿瘤相关抗原基因MAGE-1的全长cDNA,为该基因及其编码抗原应用于肝癌的免疫治疗奠定基础.方法:根据MAGE-1编码区上、下游序列设计一对引物,用RT-PCR方法从肝癌组织中扩增该基因的全长cDNA,酶切产生粘性末端后连接... 目的:从肝癌组织中克隆肿瘤相关抗原基因MAGE-1的全长cDNA,为该基因及其编码抗原应用于肝癌的免疫治疗奠定基础.方法:根据MAGE-1编码区上、下游序列设计一对引物,用RT-PCR方法从肝癌组织中扩增该基因的全长cDNA,酶切产生粘性末端后连接入PUC19质粒.经初步酶切鉴定后,通过DNA序列分析获取所克隆基因片断的核苷酸序列.结果:成功地克隆了MAGE-1基因的全长cDNA,同时还获得一约750bp的MAGE-3基因片段及一与MAGE-6和MAGE-12高度同源的基因的克隆.此与MAGE-6,-12高度同源的基因可能为一未知MAGE家族成员.结论:肝癌组织中表达多种MAGE家族基因,甚至可能存在未知MAGE家族基因的表达,这将为寻找肝癌免疫治疗的攻击靶点开辟新的途径. 展开更多
关键词 肝癌 mage基因 免疫治疗
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人肿瘤特异抗原MAGE-3基因疫苗的构建和表达 被引量：5
13
作者 倪兵 李燕秋 +3 位作者 王莉 唐艳 周伟 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1133-1136,共4页
目的　克隆肿瘤特异性共享抗原mage 3基因 ,制备基于α 病毒复制酶的高效黑色素瘤特异性基因疫苗。方法　用RT PCR方法从黑色素瘤细胞系LB3 73中制备mage 3基因 ,以含α 病毒复制酶的哺乳细胞高效表达质粒pSMART2a为载体 ,构建重组DNA... 目的　克隆肿瘤特异性共享抗原mage 3基因 ,制备基于α 病毒复制酶的高效黑色素瘤特异性基因疫苗。方法　用RT PCR方法从黑色素瘤细胞系LB3 73中制备mage 3基因 ,以含α 病毒复制酶的哺乳细胞高效表达质粒pSMART2a为载体 ,构建重组DNA疫苗。重组子用载体中的T7和T3启动子序列为测序引物进行自动测序。再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化 2 93细胞 ,用免疫印迹法和免疫组化法鉴定转化细胞中mage 3蛋白的表达。结果　正确构建了mage 3 pSMART2a重组质粒 ,并且在转化此质粒的 2 93细胞中检测出了mage 3蛋白的表达。结论　此重组mage 3 pSMART2a质粒可以作为肿瘤特异的DNA疫苗 ,可进行下一步的肿瘤动物模型的疫苗接种及相关免疫学效应研究。 展开更多
关键词 肿瘤特异抗原 mage-3基因 基因克隆 α-病毒复制酶 高效黑色素瘤特异性基因疫苗 基因治疗 逆转录-聚合酶链反应 重组DNA疫苗
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肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位4分支多重抗原肽的合成及鉴定 被引量：10
14
作者 李艳秋 吴玉章 +1 位作者 倪兵 贾正才 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1143-1145,共3页
目的　设计合成肿瘤抗原MAGE 12的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法　在预测MAGE 12的B细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82 -93 )的基础上 ,采用 4分支多重抗原肽结构合成抗原肽 ,免疫C 5 7BL 6小鼠 ,产生多克隆抗体 ,应用ELISA实验及... 目的　设计合成肿瘤抗原MAGE 12的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法　在预测MAGE 12的B细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82 -93 )的基础上 ,采用 4分支多重抗原肽结构合成抗原肽 ,免疫C 5 7BL 6小鼠 ,产生多克隆抗体 ,应用ELISA实验及免疫组化实验检测多克隆抗体是否为人的抗原肽的特异性抗体。结果　免疫C 5 7BL 6小鼠后可产生MAGE 12的抗原特异性的多克隆抗体 ,抗体滴度可达 1∶64。结论　证明所预测的表位为MAGE 12的B细胞表位。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 B细胞表位 mage-12 表位鉴定 酶联免疫吸附法 肿瘤免疫治疗
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一个新的MAGE-1表位为肝癌细胞表面HLA-B7分子递呈 被引量：9
15
作者 郭爱林 隋延仿 +5 位作者 叶菁 曲萍 张晓楠 张立红 张敏 卢兴森 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期252-255,共4页
目的 :肿瘤抗原的存在是机体识别肿瘤并激活免疫系统的物质基础 ,机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主 ,故寻找被T细胞识别的肝癌细胞抗原肽 ,为肝癌免疫治疗奠定基础。方法 :对于肝癌细胞系HHCC(HLA A2 ,A2 9,B7,B5 1) ,应用细胞膜酸洗技术... 目的 :肿瘤抗原的存在是机体识别肿瘤并激活免疫系统的物质基础 ,机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主 ,故寻找被T细胞识别的肝癌细胞抗原肽 ,为肝癌免疫治疗奠定基础。方法 :对于肝癌细胞系HHCC(HLA A2 ,A2 9,B7,B5 1) ,应用细胞膜酸洗技术使抗原肽从细胞膜表面脱落 ,经过凝胶层析 ,反相高效液相色谱层析得到不同组份多肽 ,高效液相色谱 质谱仪联用技术获得抗原肽的一级结构 ,通过氨基酸锚定位点分析 ,预测其HLA配体类型 ;互联网上氨基酸同源性分析确定其同源性序列 ;人工合成抗原肽 ,HLA同型树突状细胞递呈合成抗原肽刺激特异性CTL反应 ,51Cr杀伤实验检测CTL对肿瘤细胞系的杀伤作用。结果 :经过反相高效液相色谱层析后可以获得 10多个组份 ,其中一个组份经过液质联用鉴定和氨基酸同源性分析确定其序列为EPVTKAEML ,是黑色素瘤抗原 1,MAGE 1(12 1 12 9)表位 ,由HLA B7分子递呈 ,体外诱导实验表明其可以诱导出较强的CTL反应。结论 :液质联用技术是寻找抗原肽的有效方法 ,MAGE 1抗原肽EPVTKAEML对于HLA B7阳性及MAGE 展开更多
关键词 肝癌 HLA-B7 液质联用技术 黑色素瘤特异性抗原1 抗原肽 mage-1
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肿瘤抗原MAGE-A3新的HLA-A2限制性CTL表位的发现与鉴定 被引量：7
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作者 贾正才 吴玉章 +4 位作者 万瑛 周伟 王祥智 邹丽云 唐艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期26-29,共4页
目的:鉴定肿瘤抗原MAGE－A3新的HLA-A2限制性CTL表位。方法:采用CTL表位预测的基序法与二级锚点相结合预测 MAGE-A3的 HLA-A2限制性CTL表位;用计算机分子模拟进行表位的初步筛选;以标准51Cr释放试验检测特异性CTLs诱导活性。结果:在所... 目的:鉴定肿瘤抗原MAGE－A3新的HLA-A2限制性CTL表位。方法:采用CTL表位预测的基序法与二级锚点相结合预测 MAGE-A3的 HLA-A2限制性CTL表位;用计算机分子模拟进行表位的初步筛选;以标准51Cr释放试验检测特异性CTLs诱导活性。结果:在所筛选的4个候选CTL表位中,MAGE-A3201-209可在体外有效诱导特异性CTLs的产生,杀伤靶细胞。结论:MAGE-A3201-209为肿瘤抗原MAGE-A3的新的HLA-A2限制性CTL表位。为基于MAGE-A3的肿瘤治疗性多肽疫苗的设计、研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 mage-A3 黑色素瘤 细胞毒性T淋巴细胞表位 鉴定
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肿瘤抗原MAGE2HLAA2限制性CTL表位的预测 被引量：6
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作者 耿淼 贾正才 +2 位作者 万瑛 赵建平 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期934-936,共3页
目的　预测黑色素瘤抗原MAGE 2的HLA A2限制性CTL表位。方法　采用超基序法与量化基序法的联合应用。结果　发现 8个HLA A2限制性CTL表位。
关键词 肿瘤抗原 CTL表位 预测 mage-2 HLA-A2
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MAGE-A9结构域缺失突变体对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响 被引量：2
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作者 周欣亮 桑梅香 +4 位作者 单保恩 连易水 丁春艳 刘贤德 陈文雪 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期721-728,共8页
背景与目的:人类黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen gene,MAGE)是癌-睾丸抗原(cancer/testis antigens,CTA)家族中一组很典型的成员,除睾丸外几乎在正常成年组织中均不表达,但在很多种肿瘤组织中高表达,因此被认为是一种肿瘤特异性抗原... 背景与目的:人类黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen gene,MAGE)是癌-睾丸抗原(cancer/testis antigens,CTA)家族中一组很典型的成员,除睾丸外几乎在正常成年组织中均不表达,但在很多种肿瘤组织中高表达,因此被认为是一种肿瘤特异性抗原,其中MAGE-A家族包括12个成员,分别为MAGE-A1～MAGE-A12。本研究旨在观察4种MAGE-A9结构域缺失突变体pcDNA3.1 MAGE-A9(1～29)、pcDNA3.1MAGE-A9(1～114)、pcDNA3.1 MAGE-A9(115～285)、pcDNA3.1 MAGE-A9(286～315)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法:构建以上4种MAGE-A9结构域缺失突变体,转染4种MAGE-A9的结构域和对照组Myc-His-pcDNA3.1(-),采用RT-PCR方法检测MCF-7细胞中MAGE-A9各结构域的表达,并用MTT和克隆形成的方法观察MAGE-A9结构域缺失突变体对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。结果:与对照组Myc-His-pcDNA3.1(-)组相比,MAGE-A9结构域缺失突变体pcDNA3.1 MAGE-A9(1～29)组、pcDNA3.1 MAGE-A9(1～114)组和pcDNA3.1MAGE-A9(286～315)组没有导致克隆形成率的明显变化(P>0.05),而pcDNA3.1 MAGE-A9(115～285)导致克隆形成率的明显增加(P<0.05)。结论:pcDNA3.1 MAGE-A9(115～285)能增加乳腺癌MCF-7细胞株的增殖,表明MAGE-A9(115～285)可能为MAGE-A9的功能区域。 展开更多
关键词 mage—A9 结构域缺失突变体 MCF-7 增殖
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重组质粒pchIL-18-MAGE转染树突状细胞疫苗体外杀伤肝癌细胞的研究 被引量：5
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作者 刁斌斌 李首庆 +1 位作者 马寅芙 杨广民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1606-1610,共5页
目的:探讨重组质粒pch IL-18-MAGE转染DC细胞在体外对肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建共表达质粒pchIL-18-MAGE,体外培养树突状细胞,将以上重组质粒转染树突状细胞。RT-PCR和Western blot方法验证IL-18和MAGE-1基因在转染DC中的表达。应... 目的:探讨重组质粒pch IL-18-MAGE转染DC细胞在体外对肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建共表达质粒pchIL-18-MAGE,体外培养树突状细胞,将以上重组质粒转染树突状细胞。RT-PCR和Western blot方法验证IL-18和MAGE-1基因在转染DC中的表达。应用流式细胞术检测转染后DC细胞的表型变化。以转染重组质粒DC刺激的淋巴细胞作为效应细胞,单纯淋巴细胞和未经转染DC刺激的淋巴细胞为对照,检测其对肝癌靶细胞的体外杀伤作用。ELISA法检测INF-γ的分泌。结果:pchIL-18-MAGE转染后DC细胞高表达CD83、CD1a、CD86、CD80、HLA-DR等抗原,表现为成熟DC表型特征。共表达质粒转染的DC细胞诱导的CTL对肝癌细胞杀伤作用最强(P<0.05)。结论:pchIL-18-MAGE转染DC细胞对MAGE+肝癌细胞杀伤作用明显。 展开更多
关键词 疫苗 肝癌 树突状细胞 mage-1 IL-18
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真核表达载体pcDNA3.1-MAGE-1的构建 被引量：2
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作者 何炜 张朝 +2 位作者 章茜 赵国强 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第4期586-587,共2页
目的:构建含MAGE-1基因的重组真核表达质粒。方法:用RT-PCR方法从人肝细胞肝癌组织中扩增出MAGE-1基因cDNA序列,克隆至pGEM-T载体,测序证实基因碱基序列无误后,再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了pcDNA3.1-MAGE-1重组质粒。结果与... 目的:构建含MAGE-1基因的重组真核表达质粒。方法:用RT-PCR方法从人肝细胞肝癌组织中扩增出MAGE-1基因cDNA序列,克隆至pGEM-T载体,测序证实基因碱基序列无误后,再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了pcDNA3.1-MAGE-1重组质粒。结果与结论:RT-PCR获得长度为927bp的阳性产物,经T载体和pcDNA3.1(+)真核表达载体克隆、酶切鉴定及序列分析后,证实真核表达质粒pcDNA3.1-MAGE-1构建成功。 展开更多
关键词 mage—1 PCDNA3.1(+) 真核表达载体
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