期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的生物信息学分析及表达鉴定
被引量：
2
1
作者
赵庆亮
杨素芳
+3 位作者
梁田
张殿卿
杨霞
盛金良
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期220-224,共5页
分析预测嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的抗原性,对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白采用生物信息学对其进行分析二级结构,亲水性,疏水性,B细胞线性表位;根据分析的优势抗原表位区,进行基因合成并亚克隆至p ET32a表达载体,在大肠埃希菌中获得重...
分析预测嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的抗原性,对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白采用生物信息学对其进行分析二级结构,亲水性,疏水性,B细胞线性表位;根据分析的优势抗原表位区,进行基因合成并亚克隆至p ET32a表达载体,在大肠埃希菌中获得重组蛋白。生物信息学分析结果显示msp4蛋白由283个氨基酸组成,分子量为29.8 ku,理论等电点为6.05,不稳定系数为32.79,总平均疏水性为0.063;二级结构预测msp4蛋白主要以无规卷曲、延伸链、α-螺旋为主;B细胞表位预测msp4蛋白有14个线性表位;根据分析的结果选取msp4蛋白亲水性高的膜外区的28-158位序列克隆至p ET32a进行原核表达,在34 ku出有目的蛋白的表达。成功对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白原核表达及纯化,为无形体病血清学检测方法的建立奠定了物质基础。
展开更多
关键词
嗜吞噬细胞无形体
生物信息学分析
msp4
蛋白
原核表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
嗜吞噬细胞无浆体MSP4蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
2
作者
崔艳艳
王冠
+5 位作者
郝俊芳
李志强
余复昌
史柯
席丽
齐萌
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期4036-4042,共7页
【目的】利用原核表达系统表达嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum,AP)MSP4蛋白,并制备抗MSP4蛋白的多克隆抗体,为嗜吞噬细胞无浆体检测方法的建立提供试验材料和理论依据。【方法】根据GenBank公布的MSP 4基因优化并合成MSP ...
【目的】利用原核表达系统表达嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum,AP)MSP4蛋白,并制备抗MSP4蛋白的多克隆抗体,为嗜吞噬细胞无浆体检测方法的建立提供试验材料和理论依据。【方法】根据GenBank公布的MSP 4基因优化并合成MSP 4基因,将其插入pET-30a载体,构建pET-30a-MSP4重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,对影响表达效果的因素(温度和IPTG)进行优化,选择最佳诱导表达条件,经SDS-PAGE分析蛋白表达情况,重组蛋白经Ni-IDA亲和层析纯化,并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后的重组蛋白MSP4免疫新西兰大白兔制备兔源多克隆抗体,利用间接ELISA和Western blotting检测多克隆抗体效价及特异性。【结果】本研究成功构建pET-30a-MSP4重组质粒,在37℃、0.8 mmol/L IPTG诱导条件下蛋白表达量较高,表达的重组蛋白分子质量约为28 ku,以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,其免疫原性较好。获得的多克隆抗体效价分别为1∶64000(家兔1)和1∶128000(家兔2),且能与表达的重组蛋白MSP4发生特异性反应,具有较好的免疫原性。【结论】本研究成功表达纯化了嗜吞噬细胞无浆体MSP4蛋白,并制备了其多克隆抗体,可为嗜吞噬细胞无浆体抗原抗体检测方法的建立及疫苗效果评估提供参考,也为MSP4蛋白功能研究奠定基础。
展开更多
关键词
嗜吞噬无浆体
msp4
蛋白
原核表达
多克隆抗体
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的生物信息学分析及表达鉴定
被引量：
2
1
作者
赵庆亮
杨素芳
梁田
张殿卿
杨霞
盛金良
机构
石河子大学动物科技学院人兽共患病实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期220-224,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划资助(2010CB53020X)
文摘
分析预测嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的抗原性,对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白采用生物信息学对其进行分析二级结构,亲水性,疏水性,B细胞线性表位;根据分析的优势抗原表位区,进行基因合成并亚克隆至p ET32a表达载体,在大肠埃希菌中获得重组蛋白。生物信息学分析结果显示msp4蛋白由283个氨基酸组成,分子量为29.8 ku,理论等电点为6.05,不稳定系数为32.79,总平均疏水性为0.063;二级结构预测msp4蛋白主要以无规卷曲、延伸链、α-螺旋为主;B细胞表位预测msp4蛋白有14个线性表位;根据分析的结果选取msp4蛋白亲水性高的膜外区的28-158位序列克隆至p ET32a进行原核表达,在34 ku出有目的蛋白的表达。成功对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白原核表达及纯化,为无形体病血清学检测方法的建立奠定了物质基础。
关键词
嗜吞噬细胞无形体
生物信息学分析
msp4
蛋白
原核表达
Keywords
anaplasma phagocytophilum
bioinformatics analysis
msp4 protein
prokaryotic expression
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
嗜吞噬细胞无浆体MSP4蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
2
作者
崔艳艳
王冠
郝俊芳
李志强
余复昌
史柯
席丽
齐萌
机构
商丘师范学院生物与食品学院
塔里木大学动物科学与技术学院
新乡学院医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期4036-4042,共7页
基金
国家自然科学基金(32102708)
河南省科技攻关计划项目(222102110422)。
文摘
【目的】利用原核表达系统表达嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum,AP)MSP4蛋白,并制备抗MSP4蛋白的多克隆抗体,为嗜吞噬细胞无浆体检测方法的建立提供试验材料和理论依据。【方法】根据GenBank公布的MSP 4基因优化并合成MSP 4基因,将其插入pET-30a载体,构建pET-30a-MSP4重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,对影响表达效果的因素(温度和IPTG)进行优化,选择最佳诱导表达条件,经SDS-PAGE分析蛋白表达情况,重组蛋白经Ni-IDA亲和层析纯化,并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后的重组蛋白MSP4免疫新西兰大白兔制备兔源多克隆抗体,利用间接ELISA和Western blotting检测多克隆抗体效价及特异性。【结果】本研究成功构建pET-30a-MSP4重组质粒,在37℃、0.8 mmol/L IPTG诱导条件下蛋白表达量较高,表达的重组蛋白分子质量约为28 ku,以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,其免疫原性较好。获得的多克隆抗体效价分别为1∶64000(家兔1)和1∶128000(家兔2),且能与表达的重组蛋白MSP4发生特异性反应,具有较好的免疫原性。【结论】本研究成功表达纯化了嗜吞噬细胞无浆体MSP4蛋白,并制备了其多克隆抗体,可为嗜吞噬细胞无浆体抗原抗体检测方法的建立及疫苗效果评估提供参考,也为MSP4蛋白功能研究奠定基础。
关键词
嗜吞噬无浆体
msp4
蛋白
原核表达
多克隆抗体
Keywords
Anaplasma phagocytophilum
msp4 protein
prokaryotic expression
polyclonal antibody
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的生物信息学分析及表达鉴定
赵庆亮
杨素芳
梁田
张殿卿
杨霞
盛金良
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
嗜吞噬细胞无浆体MSP4蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
崔艳艳
王冠
郝俊芳
李志强
余复昌
史柯
席丽
齐萌
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
