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MPTP对C57BL/6J小鼠脑时钟基因mPer1 mRNA表达的影响
1
作者
左晓虹
蔡彦宁
+2 位作者
于顺
刘姝
陈彪
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2009年第1期76-79,共4页
目的研究神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四羟基吡啶(MPTP)对小鼠脑组织中时钟基因mPer1mRNA表达的影响。方法将C57BL/6J小鼠用计算机辅助法随机分为MPTP组和对照组,MPTP组腹腔注射MPTP-HCl,对照组注射0.9%氯化钠注射液,连续5d,第11天连...
目的研究神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四羟基吡啶(MPTP)对小鼠脑组织中时钟基因mPer1mRNA表达的影响。方法将C57BL/6J小鼠用计算机辅助法随机分为MPTP组和对照组,MPTP组腹腔注射MPTP-HCl,对照组注射0.9%氯化钠注射液,连续5d,第11天连续24h按6个时间点取材。用HPLC-ECD检测纹状体中多巴胺(DA)含量,用实时定量RT-PCR检测纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平。结果MPTP组纹状体DA水平较正常对照组减少了80%,并维持低水平长达10d;纹状体mPer1mRNA在24h内呈明显节律性变化,而其余脑组织mPer1 mRNA无明显节律性变化;MPTP处理导致纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平增高及纹状体mPer1 mRNA表达高峰提前。结论MPTP引起小鼠纹状体时钟基因的表达水平和节律性发生改变,提示MPTP可能通过改变细胞内的节律控制中心而影响机体的生物节律。
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关键词
时钟基因
mper
1
帕金森病
昼夜节律
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职称材料
单链抗体2F5和4E10的原核表达、纯化和鉴定
被引量:
1
2
作者
刘秀侠
杨雄
陈红英
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期177-183,共7页
为深入研究2F5和4E10抗体,构建了特异性识别HIV-1病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒,进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠PCR扩增及基因重组技术,获得2F5-scFv和4E10-scFv基因,将其插入原核表达载体pET-28a(+)上,获得...
为深入研究2F5和4E10抗体,构建了特异性识别HIV-1病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒,进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠PCR扩增及基因重组技术,获得2F5-scFv和4E10-scFv基因,将其插入原核表达载体pET-28a(+)上,获得表达质粒。转入大肠杆菌BL21(DE3)及Rosetta-gami2(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现,2F5-scFv和4E10-scFv在两种表达菌中均以包涵体形式存在,重组蛋白分子量分别约为27 kD、29 kD。变性条件下,利用镍离子螯合层析方法对包涵体蛋白进行纯化,经复性后获得可溶性单链抗体。ELISA检测表明,制备的单链抗体与原核和真核表达的MPER抗原都有特异性结合活性。
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关键词
HIV-1
GP41
mper
2F5
4E10
单链抗体
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职称材料
题名
MPTP对C57BL/6J小鼠脑时钟基因mPer1 mRNA表达的影响
1
作者
左晓虹
蔡彦宁
于顺
刘姝
陈彪
机构
首都医科大学宣武医院神经生物学研究室
教育部神经变性病学重点实验室
出处
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2009年第1期76-79,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863)(2006AA02A408)
国家重点基础研究发展计划(973)(2006CB500701)
国家自然科学基金(30771064)资助项目~~
文摘
目的研究神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四羟基吡啶(MPTP)对小鼠脑组织中时钟基因mPer1mRNA表达的影响。方法将C57BL/6J小鼠用计算机辅助法随机分为MPTP组和对照组,MPTP组腹腔注射MPTP-HCl,对照组注射0.9%氯化钠注射液,连续5d,第11天连续24h按6个时间点取材。用HPLC-ECD检测纹状体中多巴胺(DA)含量,用实时定量RT-PCR检测纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平。结果MPTP组纹状体DA水平较正常对照组减少了80%,并维持低水平长达10d;纹状体mPer1mRNA在24h内呈明显节律性变化,而其余脑组织mPer1 mRNA无明显节律性变化;MPTP处理导致纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平增高及纹状体mPer1 mRNA表达高峰提前。结论MPTP引起小鼠纹状体时钟基因的表达水平和节律性发生改变,提示MPTP可能通过改变细胞内的节律控制中心而影响机体的生物节律。
关键词
时钟基因
mper
1
帕金森病
昼夜节律
Keywords
clock gene
mper
1 Parkinson's disease
circadian rhythm
分类号
R741.02 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
单链抗体2F5和4E10的原核表达、纯化和鉴定
被引量:
1
2
作者
刘秀侠
杨雄
陈红英
机构
西北农林科技大学生命科学学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期177-183,共7页
基金
教育部新世纪优秀人才计划(NCET-09-0625)
文摘
为深入研究2F5和4E10抗体,构建了特异性识别HIV-1病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒,进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠PCR扩增及基因重组技术,获得2F5-scFv和4E10-scFv基因,将其插入原核表达载体pET-28a(+)上,获得表达质粒。转入大肠杆菌BL21(DE3)及Rosetta-gami2(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现,2F5-scFv和4E10-scFv在两种表达菌中均以包涵体形式存在,重组蛋白分子量分别约为27 kD、29 kD。变性条件下,利用镍离子螯合层析方法对包涵体蛋白进行纯化,经复性后获得可溶性单链抗体。ELISA检测表明,制备的单链抗体与原核和真核表达的MPER抗原都有特异性结合活性。
关键词
HIV-1
GP41
mper
2F5
4E10
单链抗体
Keywords
HIV-1
SD41
mper
2F5
4El0
Sinsle-chain antibodv
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MPTP对C57BL/6J小鼠脑时钟基因mPer1 mRNA表达的影响
左晓虹
蔡彦宁
于顺
刘姝
陈彪
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2009
0
在线阅读
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职称材料
2
单链抗体2F5和4E10的原核表达、纯化和鉴定
刘秀侠
杨雄
陈红英
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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