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腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎: 1; 作者龙宪连管政 +4 位作者张军方超平张薇薇张倩沈茜《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-47,共6页; 目的:观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡmolecules)反式激活因子突变体(CⅡTAm)基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experi mental autoi mmune thyroiditis,EAT)的效果,并探讨其可能的作用机制... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体腺病毒科自身免疫性甲状腺炎基因疗法; 在线阅读下载PDF 职称材料

MHCⅡ类反式激活因子在上调HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用被引量：6: 2; 作者柏秀娟张绪清《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2019-2022,共4页; 目的探讨主要组织相容性复合物(major histocom patibility complex,MHC)Ⅱ类反式激活因子(classⅡtrans-activator,CⅡTA)在调控HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用。方法将含CⅡTAcDNA的真核表达载体EBS-NPL-CⅡTA和不含CⅡTAcDNA的空... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类反式激活因子 HEPG2细胞 HLAⅱ类分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达: 3; 作者龙宪连管政 +4 位作者张军方超平张薇薇张倩沈茜《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期781-785,共5页; 目的:观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体(CⅡTAm)重组腺病毒对MHC Ⅱ类分子表达的选择性抑制作用,并探讨其相关机制。方法:构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡ TA-pIV启动子驱动的重组腺病... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体 pIV启动子腺病毒科 mhc ⅱ类分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体被引量：3: 4; 作者管政沈茜《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1014-1017,共4页; 目的：以构建缺失第109～226位氨基酸密码子的MHCII类分子反式激活因子（MHCclass Ⅱ molecule transactivator，CIITA）突变体为例探索一种简便、稳定的构建中间缺失突变体的方法。方法：首先按照传统重叠延伸PCR方法的原理扩增缺失片... 展开更多; 关键词重叠延伸PCR法中间缺失突变体 mhcⅱ类分子反式激活因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C多态性与慢性HBV感染发病易感性的关系研究被引量：3: 5; 作者洪晓俊张绪清邓国宏《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期2276-2279,共4页; 目的探讨MHCⅡ类反式激活因子(CⅡTA)启动子Ⅳ区G-944C基因多态性与慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染发病易感性的关系。方法在1203例慢性HBV感染无症携带与慢性肝患者中,应用序列特异性引物PCR技术(PCR-SSP)对CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C位点... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类反式激活因子乙型肝炎病毒序列特异性引物-多聚酶链式反应单个核苷酸多态性; 在线阅读下载PDF 职称材料

人CIITA基因启动子IV不同单倍型DNA真核表达载体的构建: 6; 作者洪晓俊张绪清柏秀娟《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第11期1126-1130,共5页; 目的:构建人MHCⅡ类反式激活因子(CIITA)基因启动子IV4种不同单倍型DNA的真核表达载体。方法:根据人CIITA基因启动子IV区的2个单个核苷酸多态性(SNPs)位点C-1350T和G-944C,可以构建出4种单倍型(CG、CC、TG和TC)。分别以CG/CG、CC/CC、TG... 展开更多; 关键词 mhc ⅱ类反式激活因子单个核苷酸多态性单倍型; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎: 1; 作者龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜; 机构第二军医大学长海医院实验诊断科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-47,共6页; 基金上海市科委联合利华研究与发展基金(200305)~~; 文摘目的:观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡmolecules)反式激活因子突变体(CⅡTAm)基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experi mental autoi mmune thyroiditis,EAT)的效果,并探讨其可能的作用机制。方法:31只健康雌性CBA/J小鼠随机分成EAT模型组(n=8)、CⅡTAm治疗组(n=9)、GFP对照组(n=9)和正常对照组(n=5)。除正常对照组不作特殊处理外,其余3组均以猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTg)+弗氏佐剂(com-plete or incomplete Freund adjuvant,CFA/IFA)建立EAT小鼠模型,CⅡTAm治疗组和GFP对照组分别静脉注射重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm及Ad-GFP进行治疗,EAT模型组注射等量生理盐水。首次免疫后第29日处死小鼠,进行H-E染色观察甲状腺病理形态;免疫组织化学染色测定甲状腺MHCⅡ类分子表达;分析pTg刺激下脾脏淋巴细胞的增殖及其上清液中IFN-γ的分泌水平;ELISA法检测血浆中抗-pTg自身抗体滴度;流式细胞术分析外周血和脾脏淋巴细胞中CD4+T淋巴细胞上可诱导共刺激分子(inducible costi mulator,ICOS)的表达水平。结果:H-E染色结果表明,CⅡTAm治疗组甲状腺淋巴细胞浸润指数(0.3±0.5)低于EAT模型组(1.4±0.4)和GFP对照组(1.5±0.2,P<0.01)。免疫组化结果显示,EAT模型组和GFP对照组甲状腺组织有弥漫性MHC Ⅱ类分子表达,而CⅡTAm治疗组未见明显表达,正常对照组表达呈阴性。80μg/mlpTg刺激下,CⅡTAm治疗组小鼠淋巴细胞刺激指数(SI)明显低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.05);培养上清各组IFN-γ分泌水平与SI结果类似(P<0.01)。CⅡTAm治疗组血浆抗-pTg自身抗体滴度显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01);CⅡTAm治疗组外周血和脾脏CD4+T细胞ICOS分子阳性表达率亦显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01)。结论:重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm能抑制EAT小鼠甲状腺组织MHCⅡ类分子表达,抑制自身反应性T细胞增殖,减轻甲状腺炎性细胞浸润,降低自身抗体滴度,对EAT有一定的治疗作用。; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体腺病毒科自身免疫性甲状腺炎基因疗法; Keywords mhc class ⅱ transactivator mutant adenoviridae autoimmune thyroiditis gene therapy; 分类号 R581.4 [医药卫生—内分泌] R593.2 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名MHCⅡ类反式激活因子在上调HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用被引量：6: 2; 作者柏秀娟张绪清; 机构第三军医大学西南医院全军感染病研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2019-2022,共4页; 基金国家自然科学基金(30371283)~~; 文摘目的探讨主要组织相容性复合物(major histocom patibility complex,MHC)Ⅱ类反式激活因子(classⅡtrans-activator,CⅡTA)在调控HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用。方法将含CⅡTAcDNA的真核表达载体EBS-NPL-CⅡTA和不含CⅡTAcDNA的空载体EBS-NPL分别转染至HepG2细胞。用RT-PCR技术检测未经转染的HepG2细胞、转染EBS-NPL-CⅡTA及空载体EBS-NPL的HepG2细胞CⅡTA mRNA的表达,并用间接细胞免疫荧光技术及流式细胞技术检测其3种HLAⅡ类分子(HLA-DR、DP、DQ)的表达。结果未经转染的HepG2细胞和转染空载体EBS-NPL的HepG2细胞均无CⅡTA mRNA和HLAⅡ类分子的表达。转染EBS-NPL-CⅡTA后的HepG2细胞出现CⅡTA mRNA表达,并表达3种HLAⅡ类分子。结论CⅡTA是调控HepG2细胞是否表达HLAⅡ类分子的关键因子,HepG2细胞不表达HLA-Ⅱ类分子与其缺乏CⅡTA表达有关,为进一步研究CⅡTA在肝癌治疗中的作用奠定基础。; 关键词 mhcⅱ类反式激活因子 HEPG2细胞 HLAⅱ类分子; Keywords class ⅱ transactivator HepG2 cells HLA class ⅱ antigen; 分类号 R394.3 [医药卫生—医学遗传学] R73-362 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达: 3; 作者龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜; 机构第二军医大学附属长海医院实验诊断科; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期781-785,共5页; 基金国家自然科学基金(30500501) 上海市科委联合利华研究与发展基金(200305)资助项目; 文摘目的:观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体(CⅡTAm)重组腺病毒对MHC Ⅱ类分子表达的选择性抑制作用,并探讨其相关机制。方法:构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡ TA-pIV启动子驱动的重组腺病毒Ad-pIV-CⅡTAm,将Ad-pIV-CⅡTAm或对照腺病毒Ad-GFP感染小鼠内皮细胞株SVEC细胞和转染巨噬细胞株J774细胞,并以IFN-γ刺激。用RT-PCR检测野生型和突变型CⅡTA mRNA的表达,用流式细胞术检测MHC Ⅱ类分子在细胞表面的表达。结果:成功构建CⅡTA-pIV启动子调控下的CⅡTA突变体基因重组腺病毒表达载体Ad-pIV-CⅡ TAm;该腺病毒介导的CⅡTA突变体mRNA在SVEC和J774细胞内的表达受到IFN-γ的上调,同时抑制这些细胞上诱导型和组成型MHC Ⅱ类分子的表达。结论:Ad-pIV-CⅡTAm重组腺病毒是一种IFN-γ调控型表达载体,可有效地抑制受感染细胞上 MHC Ⅱ类分子的表达。; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体 pIV启动子腺病毒科 mhc ⅱ类分子; Keywords mhc class ⅱ transacfivator mutant plV promoter Adenoviridae mhc class ⅱ molecule; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体被引量：3: 4; 作者管政沈茜; 机构第二军医大学长海医院实验诊断科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1014-1017,共4页; 基金上海市科委联合利华研究与发展基金(200305)~~; 文摘目的：以构建缺失第109～226位氨基酸密码子的MHCII类分子反式激活因子（MHCclass Ⅱ molecule transactivator，CIITA）突变体为例探索一种简便、稳定的构建中间缺失突变体的方法。方法：首先按照传统重叠延伸PCR方法的原理扩增缺失片段两端的基因片段，再将两片段混合，在不加入外围引物的情况下进行8次PCR循环以有效完成重叠延伸，然后再加入引物进行目的片段指数扩增，将扩增产物直接克隆至真核表达载体pIRES。结果：成功地构建出缺失第109～226位氨基酸密码子的CⅡTA突变体。结论：优化后的重叠延伸PCR法（OE—PCR）克服了传统方法的诸多弊端，非常适合于构建中间缺失突变体，值得推广。; 关键词重叠延伸PCR法中间缺失突变体 mhcⅱ类分子反式激活因子; Keywords overlap extension by polymerase chain reaction middle fragment deletion mutant mhc class ⅱ molecule transaetivator; 分类号 Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C多态性与慢性HBV感染发病易感性的关系研究被引量：3: 5; 作者洪晓俊张绪清邓国宏; 机构第三军医大学西南医院全军感染病研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期2276-2279,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30371283)~~; 文摘目的探讨MHCⅡ类反式激活因子(CⅡTA)启动子Ⅳ区G-944C基因多态性与慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染发病易感性的关系。方法在1203例慢性HBV感染无症携带与慢性肝患者中,应用序列特异性引物PCR技术(PCR-SSP)对CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C位点进行基因分型研究。结果CC基因型频率在2组人群中分别为25·7%和19·7%,彼此间相差显著(χ2=5.560,P=0·018),而GC基因型频率分别为43.6%和49.9%,彼此间相差显著(χ2=4·774,P=0·029);在G基因显性模式下(C基因隐性模式),即GG+GC基因型频率在无症状携带和发病组人群中分别为74.3%和80.3%,两者间相差显著(χ2=5.560,P=0·018);在慢性肝炎、慢性重型肝炎和肝炎肝硬变3组人群中,C等位基因频率分别为44.1%、45.8%和45.0%,彼此间相差不显著(P>0.05)。结论CⅡTA基因启动子Ⅳ中的G-944C位点多态性与慢性HBV感染者发病易感性存在一定的关系,而与疾病的严重程度无明显关系;基因型为CC纯合子的慢性HBV感染者不容易发展成慢性肝病。; 关键词 mhcⅱ类反式激活因子乙型肝炎病毒序列特异性引物-多聚酶链式反应单个核苷酸多态性; Keywords class ⅱ transactivator HBV sequence-specific primer PCR single nucleotide polymorphism; 分类号 R195.4 [医药卫生—卫生统计学] R394.3 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人CIITA基因启动子IV不同单倍型DNA真核表达载体的构建: 6; 作者洪晓俊张绪清柏秀娟; 机构第三军医大学西南医院全军感染病研究所; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第11期1126-1130,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30371283); 文摘目的:构建人MHCⅡ类反式激活因子(CIITA)基因启动子IV4种不同单倍型DNA的真核表达载体。方法:根据人CIITA基因启动子IV区的2个单个核苷酸多态性(SNPs)位点C-1350T和G-944C,可以构建出4种单倍型(CG、CC、TG和TC)。分别以CG/CG、CC/CC、TG/TG和TC/TC4种基因型的人基因组DNA为模板,用PCR法扩增出包含启动子IV两个SNP位点的长487bp的DNA片断,TA克隆至pMD18-TSimple载体后用MluI/HindⅢ双酶切,纯化回收后分别与同样双酶切的荧光素酶报告基因载体PGL3-Basic和PGL3-Promoter相连接,构建CG-PGL3-Basic、CG-PGL3-Promoter、CC-PGL3-Basic、CC-PGL3-Promoter、TG-PGL3-Basic、TG-PGL3-Promoter、TC-PGL3-Basic、TC-PGL3-Promoter8个表达载体,并测序验证其DNA序列。结果:实验得到含有人CIITA基因启动子IV4种不同单倍型DNA序列的真核表达载体8个,且测序证实了这8个表达载体序列与理论序列完全一致。结论:成功构建人CIITA基因启动子IV不同单倍型的真核表达载体,为CIITA基因启动子IV不同单倍型的功能研究奠定基础。; 关键词 mhc ⅱ类反式激活因子单个核苷酸多态性单倍型; Keywords Classⅱ transactivator （CIITA） Single nucleotide polymorphism（SNP） Haplotype; 分类号 R394.3 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎	龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	MHCⅡ类反式激活因子在上调HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用	柏秀娟张绪清	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达	龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体	管政沈茜	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C多态性与慢性HBV感染发病易感性的关系研究	洪晓俊张绪清邓国宏	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	人CIITA基因启动子IV不同单倍型DNA真核表达载体的构建	洪晓俊张绪清柏秀娟	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料