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抗CⅡTA的核糖核酸酶P对Jurkat细胞MHCⅡ类分子表达的抑制作用: 1; 作者何飞吴书林 +1 位作者孙明郭荣《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期607-611,共5页; 本研究旨在探讨抗MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制细胞表面MHCⅡ类分子的表达。M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位,设计并克隆针对CⅡTA第3408位点的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相应的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分别插入pUC1... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类分子转录激活因子(CⅱTA) 核糖核酸酶P(M1-RNA) 移植免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗CⅡTA核糖核酸酶P抑制Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类抗原的表达: 2; 作者何飞吴书林 +1 位作者孙明郭荣《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期405-409,共5页; 探讨抗MHC-Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P对Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达的抑制作用.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位.以pTK117质粒为模板,PCR扩增带有抗CⅡTA第452及629位点的引导序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS)... 展开更多; 关键词 mhc-ⅱ类分子转录激活因子(CⅱTA) 核糖核酸酶P(M1-RNA) 移植免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎: 3; 作者龙宪连管政 +4 位作者张军方超平张薇薇张倩沈茜《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-47,共6页; 目的:观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡmolecules)反式激活因子突变体(CⅡTAm)基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experi mental autoi mmune thyroiditis,EAT)的效果,并探讨其可能的作用机制... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体腺病毒科自身免疫性甲状腺炎基因疗法; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达: 4; 作者龙宪连管政 +4 位作者张军方超平张薇薇张倩沈茜《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期781-785,共5页; 目的:观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体(CⅡTAm)重组腺病毒对MHC Ⅱ类分子表达的选择性抑制作用,并探讨其相关机制。方法:构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡ TA-pIV启动子驱动的重组腺病... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体 pIV启动子腺病毒科 mhc ⅱ类分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

CⅡTA基因在5种人类细胞系中的表达及意义被引量：1: 5; 作者左文丽宋永平郭荣《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1158-1161,共4页; 本研究探讨5种细胞株中MHC-Ⅱ类抗原(HLA-DR、DP、DQ)表达及IFN-γ诱导后MHC分子与CⅡTA表达的关系。采用Western blot、免疫组织化学和流式细胞术检测5种细胞株中CⅡTA蛋白及MHC分子的表达,用RT-PCR检测细胞株中CⅡTA基因表达。结果表... 展开更多; 关键词 CⅱTA基因 mhc-ⅱ类分子转录激活因子 mhc-ⅱ类分子干扰素-γ; 在线阅读下载PDF 职称材料

转导CⅡTA基因的肿瘤细胞克隆及生物学特性的研究被引量：2: 6; 作者葛海良张笑人 +1 位作者张惠珍周光炎《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期197-200,共4页; 目的研究转导CⅡTA基因肿瘤细胞的生物学特性改变。方法以RT－PCR和流式细胞术分别检测克隆转导CⅡTA基因的肿瘤细胞中CⅡTA基因的表达。在光镜和电镜下观察细胞形态和结构变化。结并转导CⅡTA基因后，肿瘤细胞中CⅡTA基因得以有效表达... 展开更多; 关键词 mhcⅱ类反式激活蛋白肿瘤细胞克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体被引量：3: 7; 作者管政沈茜《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1014-1017,共4页; 目的：以构建缺失第109～226位氨基酸密码子的MHCII类分子反式激活因子（MHCclass Ⅱ molecule transactivator，CIITA）突变体为例探索一种简便、稳定的构建中间缺失突变体的方法。方法：首先按照传统重叠延伸PCR方法的原理扩增缺失片... 展开更多; 关键词重叠延伸PCR法中间缺失突变体 mhcⅱ类分子反式激活因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗CⅡTA的核糖核酸酶P对Jurkat细胞MHCⅡ类分子表达的抑制作用: 1; 作者何飞吴书林孙明郭荣; 机构广东省人民医院心内科中南大学湘雅医院心内科广东省人民医院血液科; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期607-611,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号30571771) 广东省医学科学技术研究基金资助项目(编号A2005017) +2 种基金编号06020896); 文摘本研究旨在探讨抗MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制细胞表面MHCⅡ类分子的表达。M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位,设计并克隆针对CⅡTA第3408位点的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相应的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分别插入pUC19、pGEM-7zf(+)载体,进行细胞外切割活性筛选。将细胞外切割作用明显的M1-3408-GS亚克隆入psNAV载体并稳定转染Jurkat细胞株,采用流式细胞术检测该细胞表面经典的MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR检测其CⅡTA的mRNA水平。结果表明:在重组人干扰素(IFN)-γ诱导下,M1-3408-GS阳性Jurkat细胞株与对照组比较,其表面HLA-DR、HLA-DP、HLA-DQ抗原诱导型表达分别降低了83.17%、94.12%及84.31%;同时CⅡTA的mRNA含量明显降低(P<0.05,t=4.89)。结论:抗CⅡTA的M1-RNA(M1-3408-GS)降低了自身mRNA含量,从而阻止其调控的MHCⅡ类分子的表达。; 关键词 mhcⅱ类分子转录激活因子(CⅱTA) 核糖核酸酶P(M1-RNA) 移植免疫; Keywords mhc class ⅱ transactivator （C ⅱ TA） RNase P（M1-RNA） transplantation immunity; 分类号 R392.4 [医药卫生—免疫学] R733.71 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗CⅡTA核糖核酸酶P抑制Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类抗原的表达: 2; 作者何飞吴书林孙明郭荣; 机构广东省人民医院心内科中南大学湘雅医院心内科广东省人民医院血液科; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期405-409,共5页; 基金广东省医学科学技术研究基金资助项目(No.A2005017) 广东省人民医院科学技术研究基金资助项目(No.Y2004087) +2 种基金 No.06020896) 国家自然科学基金资助项目(No.30571771)~~; 文摘探讨抗MHC-Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P对Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达的抑制作用.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位.以pTK117质粒为模板,PCR扩增带有抗CⅡTA第452及629位点的引导序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),再分别插入pUC19载体(pUC19-M1-452-GS和pUC19-M1-629-GS).从Raji细胞中克隆CⅡTA基因DNA片段(114～800)后插入pGEM-7zf(+)质粒.将重组M1-RNA与靶基因的mRNA进行细胞外共孵育,显示仅pUC19-M1-629-GS可特异性地切割靶基因mRNA.再将M1-629-GS克隆入psNAV载体(pA629)并稳定转染Daudi细胞株,RT-PCR检测其CⅡTA的mRNA水平,流式细胞术检测其HLA-DR、DP、DQ抗原表达.与对照组比较,M1-629-GS阳性Daudi细胞的CⅡTAmRNA含量减少90.19%(P<0·05),其HLA-DR、DP、DQ抗原表达分别降低91.97%、90.19%、92.36%(P<0·05).研究表明,抗CⅡTA的核糖核酸酶P可通过抑制CⅡTA的转录而降低Daudi细胞表面的MHC-Ⅱ类分子的表达.; 关键词 mhc-ⅱ类分子转录激活因子(CⅱTA) 核糖核酸酶P(M1-RNA) 移植免疫; Keywords mhc class ⅱ transactivator （C H TA） RNase P（M1-RNA） transplantation immunity; 分类号 R593.2 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎: 3; 作者龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜; 机构第二军医大学长海医院实验诊断科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-47,共6页; 基金上海市科委联合利华研究与发展基金(200305)~~; 文摘目的:观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡmolecules)反式激活因子突变体(CⅡTAm)基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experi mental autoi mmune thyroiditis,EAT)的效果,并探讨其可能的作用机制。方法:31只健康雌性CBA/J小鼠随机分成EAT模型组(n=8)、CⅡTAm治疗组(n=9)、GFP对照组(n=9)和正常对照组(n=5)。除正常对照组不作特殊处理外,其余3组均以猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTg)+弗氏佐剂(com-plete or incomplete Freund adjuvant,CFA/IFA)建立EAT小鼠模型,CⅡTAm治疗组和GFP对照组分别静脉注射重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm及Ad-GFP进行治疗,EAT模型组注射等量生理盐水。首次免疫后第29日处死小鼠,进行H-E染色观察甲状腺病理形态;免疫组织化学染色测定甲状腺MHCⅡ类分子表达;分析pTg刺激下脾脏淋巴细胞的增殖及其上清液中IFN-γ的分泌水平;ELISA法检测血浆中抗-pTg自身抗体滴度;流式细胞术分析外周血和脾脏淋巴细胞中CD4+T淋巴细胞上可诱导共刺激分子(inducible costi mulator,ICOS)的表达水平。结果:H-E染色结果表明,CⅡTAm治疗组甲状腺淋巴细胞浸润指数(0.3±0.5)低于EAT模型组(1.4±0.4)和GFP对照组(1.5±0.2,P<0.01)。免疫组化结果显示,EAT模型组和GFP对照组甲状腺组织有弥漫性MHC Ⅱ类分子表达,而CⅡTAm治疗组未见明显表达,正常对照组表达呈阴性。80μg/mlpTg刺激下,CⅡTAm治疗组小鼠淋巴细胞刺激指数(SI)明显低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.05);培养上清各组IFN-γ分泌水平与SI结果类似(P<0.01)。CⅡTAm治疗组血浆抗-pTg自身抗体滴度显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01);CⅡTAm治疗组外周血和脾脏CD4+T细胞ICOS分子阳性表达率亦显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01)。结论:重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm能抑制EAT小鼠甲状腺组织MHCⅡ类分子表达,抑制自身反应性T细胞增殖,减轻甲状腺炎性细胞浸润,降低自身抗体滴度,对EAT有一定的治疗作用。; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体腺病毒科自身免疫性甲状腺炎基因疗法; Keywords mhc class ⅱ transactivator mutant adenoviridae autoimmune thyroiditis gene therapy; 分类号 R581.4 [医药卫生—内分泌] R593.2 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达: 4; 作者龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜; 机构第二军医大学附属长海医院实验诊断科; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期781-785,共5页; 基金国家自然科学基金(30500501) 上海市科委联合利华研究与发展基金(200305)资助项目; 文摘目的:观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体(CⅡTAm)重组腺病毒对MHC Ⅱ类分子表达的选择性抑制作用,并探讨其相关机制。方法:构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡ TA-pIV启动子驱动的重组腺病毒Ad-pIV-CⅡTAm,将Ad-pIV-CⅡTAm或对照腺病毒Ad-GFP感染小鼠内皮细胞株SVEC细胞和转染巨噬细胞株J774细胞,并以IFN-γ刺激。用RT-PCR检测野生型和突变型CⅡTA mRNA的表达,用流式细胞术检测MHC Ⅱ类分子在细胞表面的表达。结果:成功构建CⅡTA-pIV启动子调控下的CⅡTA突变体基因重组腺病毒表达载体Ad-pIV-CⅡ TAm;该腺病毒介导的CⅡTA突变体mRNA在SVEC和J774细胞内的表达受到IFN-γ的上调,同时抑制这些细胞上诱导型和组成型MHC Ⅱ类分子的表达。结论:Ad-pIV-CⅡTAm重组腺病毒是一种IFN-γ调控型表达载体,可有效地抑制受感染细胞上 MHC Ⅱ类分子的表达。; 关键词 mhcⅱ类分子反式激活因子突变体 pIV启动子腺病毒科 mhc ⅱ类分子; Keywords mhc class ⅱ transacfivator mutant plV promoter Adenoviridae mhc class ⅱ molecule; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CⅡTA基因在5种人类细胞系中的表达及意义被引量：1: 5; 作者左文丽宋永平郭荣; 机构河南省肿瘤医院血液科广东省人民医院血液科; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1158-1161,共4页; 文摘本研究探讨5种细胞株中MHC-Ⅱ类抗原(HLA-DR、DP、DQ)表达及IFN-γ诱导后MHC分子与CⅡTA表达的关系。采用Western blot、免疫组织化学和流式细胞术检测5种细胞株中CⅡTA蛋白及MHC分子的表达,用RT-PCR检测细胞株中CⅡTA基因表达。结果表明:5种细胞株中MHC-Ⅱ类分子与CⅡTA的表达一致;组成型表达CⅡTA的细胞株亦表达MHC-Ⅱ类分子,经IFN-γ诱导后表达CⅡTA的细胞株表达MHC-Ⅱ类分子亦恢复;IFN-γ诱导后仍不表达CⅡTA的细胞株,对IFN-γ促MHC-Ⅱ类分子表达的作用亦无反应。结论:某些肿瘤细胞株不能表达MHC-Ⅱ分子与CⅡTA表达缺陷有关,这表明CⅡTA参与调控细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达,它可能在肿瘤免疫逃逸中起一定作用。; 关键词 CⅱTA基因 mhc-ⅱ类分子转录激活因子 mhc-ⅱ类分子干扰素-γ; Keywords CⅱTA gene： mhc class ⅱ transactivator. mhc-ⅱ molecules： IFN-γ; 分类号 R730.51 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转导CⅡTA基因的肿瘤细胞克隆及生物学特性的研究被引量：2: 6; 作者葛海良张笑人张惠珍周光炎; 机构上海第二医科大学基础医学院免疫学教研室; 出处《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期197-200,共4页; 基金国家自然科学基金!398707150 上海市科学技术发展基金!97×D14002; 文摘目的研究转导CⅡTA基因肿瘤细胞的生物学特性改变。方法以RT－PCR和流式细胞术分别检测克隆转导CⅡTA基因的肿瘤细胞中CⅡTA基因的表达。在光镜和电镜下观察细胞形态和结构变化。结并转导CⅡTA基因后，肿瘤细胞中CⅡTA基因得以有效表达，肿瘤细胞形态和细胞内的超微结构发生改变，细胞生长受限，IFN-7可诱导转导CⅡTA基因的肿瘤细胞死亡。结论转导CⅡTA基因能改变肿瘤细胞的生物学特性，抑制肿瘤细胞生长。; 关键词 mhcⅱ类反式激活蛋白肿瘤细胞克隆; Keywords mhc class ⅱ transactivator gene transduction tumor cell clone biological characterization; 分类号 R730.21 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体被引量：3: 7; 作者管政沈茜; 机构第二军医大学长海医院实验诊断科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1014-1017,共4页; 基金上海市科委联合利华研究与发展基金(200305)~~; 文摘目的：以构建缺失第109～226位氨基酸密码子的MHCII类分子反式激活因子（MHCclass Ⅱ molecule transactivator，CIITA）突变体为例探索一种简便、稳定的构建中间缺失突变体的方法。方法：首先按照传统重叠延伸PCR方法的原理扩增缺失片段两端的基因片段，再将两片段混合，在不加入外围引物的情况下进行8次PCR循环以有效完成重叠延伸，然后再加入引物进行目的片段指数扩增，将扩增产物直接克隆至真核表达载体pIRES。结果：成功地构建出缺失第109～226位氨基酸密码子的CⅡTA突变体。结论：优化后的重叠延伸PCR法（OE—PCR）克服了传统方法的诸多弊端，非常适合于构建中间缺失突变体，值得推广。; 关键词重叠延伸PCR法中间缺失突变体 mhcⅱ类分子反式激活因子; Keywords overlap extension by polymerase chain reaction middle fragment deletion mutant mhc class ⅱ molecule transaetivator; 分类号 Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	抗CⅡTA的核糖核酸酶P对Jurkat细胞MHCⅡ类分子表达的抑制作用	何飞吴书林孙明郭荣	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗CⅡTA核糖核酸酶P抑制Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类抗原的表达	何飞吴书林孙明郭荣	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎	龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达	龙宪连管政张军方超平张薇薇张倩沈茜	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	CⅡTA基因在5种人类细胞系中的表达及意义	左文丽宋永平郭荣	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	转导CⅡTA基因的肿瘤细胞克隆及生物学特性的研究	葛海良张笑人张惠珍周光炎	《上海第二医科大学学报》 CSCD	1999	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体	管政沈茜	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料