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不同MDCK单克隆细胞株对H5亚型禽流感病毒增殖条件和放大工艺的研究 被引量:1
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作者 方琳 朱辉 +3 位作者 黄皓源 彭思力 覃海康 梁昭平 《动物医学进展》 北大核心 2020年第4期38-41,共4页
为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;... 为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;在摇瓶工艺的基础上,将该细胞在100 L生物反应器中接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,检测接种后不同时间病毒HA效价和病毒滴度(EID 50),确定最适接毒量和收获时间。共筛选出22株MDCK全悬浮细胞单克隆细胞株,其中5株对H5亚型禽流感病毒rFJ56株最敏感,接种后病毒HA效价均可达到9 log2;对MDCK单克隆细胞株按0.01%体积比接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,在100 L生物反应器中培养60 h,HA效价可达10 log2,病毒含量可达108.17 EID 50/0.1 mL,可为H5亚型禽流感病毒无血清全悬浮培养放大工艺提供参考。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感病毒 mdck单克隆细胞株 无血清全悬浮培养 接毒量 收获时间
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分泌抗人角蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 被引量:4
2
作者 张亮 刘玉峰 +4 位作者 刘彦仿 张素珍 赵小东 李承新 兰风华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期58-59,共2页
关键词 角蛋白 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 建立 鉴定
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抗犬瘟热病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:9
3
作者 胡勇 吴胜昔 +1 位作者 蔡家利 胡仁建 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第12期4992-4993,共2页
[目的]筛选出稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]用纯化的犬瘟热病毒(CDV)抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA和有限稀释法克隆杂交瘤细胞。研究了杂交瘤细胞的稳定性和染色体数,测定... [目的]筛选出稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]用纯化的犬瘟热病毒(CDV)抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA和有限稀释法克隆杂交瘤细胞。研究了杂交瘤细胞的稳定性和染色体数,测定了单克隆抗体的效价并鉴定其特异性和亚型。[结果]经反复筛选和亚克隆后,共获得3株能稳定分泌抗CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。3株单抗对CDV均有较高的特异性,与犬传染性肝炎病毒、犬细小病毒均不反应。3株杂交瘤细胞的腹水效价为1∶(8 000~128 000),细胞培养上清效价为1∶(256~512),染色体数为80~100。3株单克隆抗体重链均属于IgG1,轻链均属于κ链。[结论]该研究为研制CDV快速检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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抗软骨藻酸单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建 被引量:4
4
作者 高利利 刘元嫄 +2 位作者 程金平 王茜 王文华 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2010年第3期233-238,共6页
为了获得稳定、高效分泌抗软骨藻酸(DA)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用活泼酯法制备软骨藻酸免疫抗原(DA-KLH)和包被抗原(DA-BSA),以DA-KLH免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗软骨藻酸单克隆抗体杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备大量... 为了获得稳定、高效分泌抗软骨藻酸(DA)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用活泼酯法制备软骨藻酸免疫抗原(DA-KLH)和包被抗原(DA-BSA),以DA-KLH免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗软骨藻酸单克隆抗体杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备大量单抗,捕获EL ISA法测定小鼠免疫球蛋白亚型,间接ELISA法测定腹水效价;用G蛋白亲和层析法来纯化腹水。结果显示,成功构建2株能稳定分泌DA单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株2B1和4C2,抗体亚类分别为IgG1和IgG2a,间接EL ISA检测小鼠腹水的抗体效价达1∶64 000,腹水纯化后蛋白浓度为1.27和0.675 mg/mL。研究结果表明,成功制备的抗DA单克隆抗体杂交瘤细胞株稳定、高效,为利用该单抗研制快速检测软骨藻酸的胶体金免疫层析试纸条打下基础。 展开更多
关键词 软骨藻酸 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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抗丙型肝炎病毒核心抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定 被引量:5
5
作者 王阁 李梦东 +3 位作者 郝飞 胡大荣 姚仲寅 崔大敷 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第4期289-291,共3页
用丙型肝炎病毒(HCV)核心区合成肽作抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细节与骨髓瘤细胞SP^2/0进行融合。经有限稀释法克隆3代后获得一株抗HCV核心抗原CP10的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株3E7,并对其分泌... 用丙型肝炎病毒(HCV)核心区合成肽作抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细节与骨髓瘤细胞SP^2/0进行融合。经有限稀释法克隆3代后获得一株抗HCV核心抗原CP10的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株3E7,并对其分泌抗体进行初步鉴定。杂交瘤细胞培养上清的抗体滴度为1:320,诱生同系小鼠腹水的滴度为1:12800,该McAb能与CP10特异性结合,杂交瘤细胞染色体数目为106条。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 抗原
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抗人肝再生增强因子单克隆抗体对人肝癌细胞株HepG2增殖活性的影响 被引量:2
6
作者 唐琳 孙航 +4 位作者 张林 郭晖 陈雪华 邓建川 刘杞 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第5期633-635,643,共4页
目的:检测人肝癌细胞株HepG2细胞有无人肝再生增强因子(hALR)的表达,利用hALR特异性的单克隆抗体(anti-hALR McAb)结合hALR,观察其阻断hALR的作用后,对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖活性的影响。方法:用免疫细胞化学以及RT-PCR的方法检测... 目的:检测人肝癌细胞株HepG2细胞有无人肝再生增强因子(hALR)的表达,利用hALR特异性的单克隆抗体(anti-hALR McAb)结合hALR,观察其阻断hALR的作用后,对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖活性的影响。方法:用免疫细胞化学以及RT-PCR的方法检测HepG2细胞hALR蛋白及mRNA的表达;用3H-TdR掺入法检测hALR特异性单克隆抗体中和hALR后HepG2细胞的增殖情况。结果:①HepG2细胞有hALR的表达。②抗hALR单克隆抗体特异性地阻断hALR的作用后可部分抑制肿瘤细胞自主性生长。结论:抗hALR单克隆抗体能部分抑制肿瘤细胞自主性生长;hALR通过自分泌方式参与了肝癌细胞的自主性生长。 展开更多
关键词 人肝再生增强因子 单克隆抗体 肝癌 细胞株
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人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:2
7
作者 张海珠 冯元春 +4 位作者 宋晓荣 刘世国 任红斌 杨献军 史明珠 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第3期369-371,共3页
目的 :建立抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株。方法 :从人心肌组织中提取纯化人cTnT ,免疫BALB/C小鼠 ,采用杂交瘤技术 ,间接ELISA法选择能稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株。结果 :建立了 2株稳定分泌抗cTnTM... 目的 :建立抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株。方法 :从人心肌组织中提取纯化人cTnT ,免疫BALB/C小鼠 ,采用杂交瘤技术 ,间接ELISA法选择能稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株。结果 :建立了 2株稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株N15C和N16D ,其染色体数目为 90~ 10 6 ,McAbIg亚类均为IgG1,间接ELISA法测定McAb腹水效价分别为 1 80 0 0和 1 32 0 0 0。免疫印迹结果显示 2株McAb均可识别cTnT中Mr 为 370 0 0的单一区带 ,不识别人骨骼肌提取物。间接ELISA法测定N15C和N16DMcAb与cTnT反应的最低浓度分别为 4 7μg/L和 2 3μg/L。相加试验表明 2株McAb能识别不同的抗原表位。 结论 :获得 展开更多
关键词 人心肌 肌钙蛋白T 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用于检测循环抗原的研究 被引量:2
8
作者 黄启华 吴子松 +5 位作者 高鹏 张桂威 邱东川 周国兴 山建忠 蔡兴平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第5期38-39,33,共3页
作者获得1株特异的抗血吸虫成虫20-24kDa蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株(SjA111)。分泌McAb为IgG1,腹水效价1.2×106。将SjA111McAb-HRP结合物用Dot-ELISA检测499例慢性血... 作者获得1株特异的抗血吸虫成虫20-24kDa蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株(SjA111)。分泌McAb为IgG1,腹水效价1.2×106。将SjA111McAb-HRP结合物用Dot-ELISA检测499例慢性血吸虫病患者的循环抗原(CAg),阳性者390例(78.16%);25例肺吸虫病人,36例华支睾吸虫病人及132例正常人血清中,仅1例肺吸虫病人出现交叉反应。CAg的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值(GMRT)随着每g粪便虫卵数(EPG)的增加而递增。吡喹酮治疗后各期病人粪孵阴性者CAg的转阴率:半年为75.50%(114/51),1年为73.68%(84/114),1年半为88.04%(103/117)。 展开更多
关键词 血吸虫 多肽表位 ELISA 单克隆抗体 细胞株
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抗鸡IgG、抗鸭IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的稳定性研究 被引量:2
9
作者 张春红 伍惠卿 +1 位作者 杜伟贤 黄忠 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第3期7-8,共2页
抗鸡IgG、抗鸭IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的稳定性研究张春红伍惠卿杜伟贤黄忠(广东省农业科学院兽医研究所,广州510640)自1975年Kohler和Milstein首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术生产单克隆抗体(Mc... 抗鸡IgG、抗鸭IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的稳定性研究张春红伍惠卿杜伟贤黄忠(广东省农业科学院兽医研究所,广州510640)自1975年Kohler和Milstein首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术生产单克隆抗体(McAb)以来,为所有需要制备和使用抗... 展开更多
关键词 免疫球蛋白G 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 稳定性
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睾酮单克隆杂交瘤细胞株的筛选及性能鉴定 被引量:1
10
作者 李超英 姜金庆 +3 位作者 李凤云 杨金明 刘明成 吴世秀 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第6期22-25,共4页
为建立大批量样品中睾酮残留的检测方法,采用细胞融合技术、间接ELISA和间接竞争ELISA(icELISA)等方法,对睾酮单克隆杂交瘤细胞株进行了筛选及性能鉴定。结果表明:筛选出5株(T2C3,T2D9,T3A5,T4B1、T4E8)杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG1型,... 为建立大批量样品中睾酮残留的检测方法,采用细胞融合技术、间接ELISA和间接竞争ELISA(icELISA)等方法,对睾酮单克隆杂交瘤细胞株进行了筛选及性能鉴定。结果表明:筛选出5株(T2C3,T2D9,T3A5,T4B1、T4E8)杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG1型,具k轻链,亲和常数为4.38×108~5.24×109 L/mol;腹水纯化后的抗体效价和灵敏度(IC50)分别为0.64×105~2.56×105和1.58~2.92ng/mL。以T2D9细胞株建立icELISA标准曲线,其线性范围为0.06~63.5ng/mL,检测限和IC50值分别为0.04和1.55ng/mL。 展开更多
关键词 睾酮 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 间接竞争ELISA
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人促甲状腺激素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:2
11
作者 罗敏 陈淑菁 +3 位作者 姬秋和 曹文俊 赵萸 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1996年第3期159-161,共3页
以进口纯人促甲状腺激素(h—TSH)作免疫原,经用Galfre等杂交瘤制备法,分别制备成13B4、13C4、8H10、3E4四株具有抗h—TSH特异性,与促黄体素、促卵泡素、绒毛膜促性腺素无明显交叉反应。具有稳定分泌... 以进口纯人促甲状腺激素(h—TSH)作免疫原,经用Galfre等杂交瘤制备法,分别制备成13B4、13C4、8H10、3E4四株具有抗h—TSH特异性,与促黄体素、促卵泡素、绒毛膜促性腺素无明显交叉反应。具有稳定分泌功能的杂交细胞株。经亚型鉴定均为IgG1。液相中与125I—hTSH的最大结合率依次为13B4、3E4、8H10和13C4,分别为61%、59%、56%和34%。表位分析表明,4株单抗主要针对两个不同表位。在此基础上已成功地建立h—TSH固相免放和酶免吸附超敏测定法。 展开更多
关键词 垂体 促甲状腺激素 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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分泌抗猪细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:2
12
作者 谢琴 王东 +2 位作者 何存利 陈祝三 余桂芳 《中国畜禽传染病》 CSCD 1995年第5期48-50,共3页
将猪细小病毒(PPV)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP_2/O细胞在聚乙二醇作用下融合,用血凝抑制试验(HI)筛选,以有限稀释法克隆3次,得到5株分泌抗PPV单克隆抗体(McAb),选择抗体分泌较高的4F_4、A_4或E_8进行较详细的研究,结果表明,其核内染色... 将猪细小病毒(PPV)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP_2/O细胞在聚乙二醇作用下融合,用血凝抑制试验(HI)筛选,以有限稀释法克隆3次,得到5株分泌抗PPV单克隆抗体(McAb),选择抗体分泌较高的4F_4、A_4或E_8进行较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为93和87,抗体属性为IgG_1,其中1株为K轻链,用交叉HI法对2株McAb作特异性分析,该McAb只特异地与PPV发生反应,而不与日本乙型脑炎(JEV)、犬细小病毒(CPV-b)发生反应,将其中3株杂交瘤细胞注射BALB/C小鼠,抗体HI效价介于1:256~1:10240之间。 展开更多
关键词 猪细小病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 小鼠 免疫
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堆型艾美耳球虫单克隆抗体细胞株的鉴定 被引量:2
13
作者 秦建华 冯雪领 +3 位作者 赵月兰 王承民 郝延刚 李铁栓 《中国动物检疫》 CAS 2003年第6期25-26,共2页
通过对杂交瘤细胞染色体分析、单克隆抗体的免疫组化和免疫荧光等指标的检测 ,对已建立的单克隆抗体细胞株5B4和5G7进行鉴定 ,结果表明 :两株单克隆抗体细胞株的染色体数目均接近两亲本的染色体数目之和 ;所建立的单克隆抗体细胞株所分... 通过对杂交瘤细胞染色体分析、单克隆抗体的免疫组化和免疫荧光等指标的检测 ,对已建立的单克隆抗体细胞株5B4和5G7进行鉴定 ,结果表明 :两株单克隆抗体细胞株的染色体数目均接近两亲本的染色体数目之和 ;所建立的单克隆抗体细胞株所分泌的特异性抗体是针对子孢子的。 展开更多
关键词 堆型艾美耳球虫 单克隆抗体细胞株 杂交瘤细胞 染色体分析 子孢子
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抗鹦鹉热衣原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用 被引量:3
14
作者 邱洪流 谢琴 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1125-1126,共2页
关键词 鹦鹉热衣原体 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 初步 检测技术 诊断研究 病原体 敏感性 牦牛 异性
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抗鸡败血支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:1
15
作者 杨百亮 廉慧锋 +1 位作者 郭建华 赵翠萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期199-201,共3页
应用杂交瘤技术获得了4株抗鸡败血支原体单克隆抗体。4株单克隆抗体与鸡滑液支原体、传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌抗原均无交叉反应。1株单克隆抗体为IgG2a,其余3株单克隆抗体均为IgM。4... 应用杂交瘤技术获得了4株抗鸡败血支原体单克隆抗体。4株单克隆抗体与鸡滑液支原体、传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌抗原均无交叉反应。1株单克隆抗体为IgG2a,其余3株单克隆抗体均为IgM。4株杂交瘤细胞染色体均有少量中部或亚中部着丝点染色体。 展开更多
关键词 鸡败血支原体 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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猪鼻支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 被引量:1
16
作者 辛颜彬 杨保安 +1 位作者 孟玲珍 刘景兰 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第4期17-19,共3页
作者用提纯的猪鼻支原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,在PEG1000作用下,与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag14融合,共获得5株稳定分泌抗猪鼻支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株行进了鉴定。上述细胞株经3~... 作者用提纯的猪鼻支原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,在PEG1000作用下,与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag14融合,共获得5株稳定分泌抗猪鼻支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株行进了鉴定。上述细胞株经3~6个月稳定传代,冻存于液氮中,复苏后其分泌抗体的水平未见下降。 展开更多
关键词 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 鉴定 BALB/c小鼠 小鼠骨髓瘤细胞 抗猪鼻支原体 抗原免疫 腹水抗体 分泌抗体 细胞 复苏后
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抗人Ⅲ型前胶原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
17
作者 邓修惠 黄学梅 +4 位作者 李伟道 叶学正 刘兴明 林丁 宋蓉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期145-145,85,共2页
抗人Ⅲ型前胶原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立邓修惠黄学梅李伟道叶学正刘兴明林丁宋蓉(重庆市肿瘤研究所,重庆630030)本文报道用人工流产胎皮提取的Ⅲ型前胶原(hPCⅢ)免疫Balb/c小鼠,获得2株抗hPCⅢmAb的... 抗人Ⅲ型前胶原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立邓修惠黄学梅李伟道叶学正刘兴明林丁宋蓉(重庆市肿瘤研究所,重庆630030)本文报道用人工流产胎皮提取的Ⅲ型前胶原(hPCⅢ)免疫Balb/c小鼠,获得2株抗hPCⅢmAb的杂交瘤细胞(MA1和MH8),并对... 展开更多
关键词 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 建立 Ⅲ型前胶原
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分泌抗RSV单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
18
作者 范桂香 董晓慧 +1 位作者 房益兰 王建安 《西安医科大学学报》 CSCD 1989年第4期316-319,共4页
本实验用呼吸道合胞病毒(RSV)Long 株免疫的 BALB/c 小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 Sp2/o 融合,经次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶(HAT)选择培养,获得5株抗体阳性杂交瘤细胞株.将2F4株3次克隆化,阳性率100%。连续传代3个月和液氮冻存3个月后... 本实验用呼吸道合胞病毒(RSV)Long 株免疫的 BALB/c 小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 Sp2/o 融合,经次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶(HAT)选择培养,获得5株抗体阳性杂交瘤细胞株.将2F4株3次克隆化,阳性率100%。连续传代3个月和液氮冻存3个月后仍能稳定分泌 RSV 单克隆抗体(McAb)。该抗体属 IgGl亚类.只与 RSV 抗原反应;能中和 RSV 的感染性;可被 RSV Long 株感染的 Hep-2细胞吸收.ELISA 测定,2F4株上清和腹水效价分别为10^(-2)和10^(-7)。4℃保存3个月其抗体活性无明显变化. 展开更多
关键词 合胞病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用 被引量:3
19
作者 丁壮 李佑民 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期11-16,共6页
用提纯的猪流行性腹泻病毒抗原免疫BALB/c小鼠,脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选,以有限稀释法克隆化,阳性率达100%,建立了1D_8、5D_7、4B_1、2B_8、1A_4五株杂交瘤细胞系。用ELISA检测培养上清及诱生... 用提纯的猪流行性腹泻病毒抗原免疫BALB/c小鼠,脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选,以有限稀释法克隆化,阳性率达100%,建立了1D_8、5D_7、4B_1、2B_8、1A_4五株杂交瘤细胞系。用ELISA检测培养上清及诱生的腹水的效价。培养上清效价为1D_8 1∶1280~×、5D_7 1∶640~×、4B_1 1∶320~×、2B_8 1∶320~×、1A_4 1∶640~×,腹水效价为1D_8 10^(-7)、5D_7 10^(-7)、4B_110^(-7)、2B_8 10^(-5)、1A_4 10^(-4)。用免疫双扩散试验结果,五株单抗中有一株属IgG类,四株属IgG类。将单抗提纯后用ELISA夹心间接法及间接免疫荧光试验(IFA)对6种冠状病毒进行了特异性鉴定,除猪流行腹泻病毒外,不与其它冠状病毒发生交叉反应。取效价高而稳定的1D_8、5D_7、4B_1细胞系单克隆抗体做IFA及直接ELISA试验初步证明该McAb具有敏感性高,特异性强的优点,可作为猪流行性腹泻病毒检测的一种新试剂。 展开更多
关键词 单克隆抗体 腹泻病毒 杂交瘤细胞株 酶联免疫吸附试验(ELISA) 初步应用 BALB/c小鼠 间接免疫荧光试验 ELISA检测 培养上清 IGG类 冠状病毒 有限稀释法 免疫双扩散 特异性鉴定 流行性腹泻 抗原免疫 细胞融合 试验结果
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分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与鉴定
20
作者 王莉娟 祁小乐 崔保安 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第4期43-45,共3页
用纯化的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞与NS0 骨髓瘤细胞融合,经间接EL ISA筛选,3次有限稀释法克隆,得到1株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株:6 P... 用纯化的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞与NS0 骨髓瘤细胞融合,经间接EL ISA筛选,3次有限稀释法克隆,得到1株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株:6 PR。经鉴定,该单抗为Ig G1 亚类,杂交瘤细胞的平均染色体数目为99条,杂交瘤细胞培养上清及小鼠腹水单克隆抗体的EL ISA效价分别为1∶2 5 6和1∶2 0 4 80。经Western- blot鉴定为针对N蛋白的单抗。6 PR 株单克隆抗体与伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒均不发生交叉反应,显示出良好的特异性。连续培养2 0代后能稳定分泌抗体。此单克隆抗体的获得为PRRSV的研究及快速诊断方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 繁殖呼吸障碍综合征病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 制备 鉴定
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