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MDCK单克隆细胞的制备方法研究
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作者 张松 张丽 +3 位作者 乔自林 王家敏 马桂兰 侯兰新 《浙江农业科学》 2019年第2期283-286,共4页
为优化有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的参数条件,从而提高有限稀释法制备MDCK单克隆细胞株的效率。使用有限稀释法制备MDCK单克隆细胞,通过比较不同类型血清、血清浓度和单孔接种密度对制备MDCK单克隆细胞数的影响,确定有限稀释法制备M... 为优化有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的参数条件,从而提高有限稀释法制备MDCK单克隆细胞株的效率。使用有限稀释法制备MDCK单克隆细胞,通过比较不同类型血清、血清浓度和单孔接种密度对制备MDCK单克隆细胞数的影响,确定有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的最佳实验条件。结果显示,添加15%胎牛血清、最佳单孔接种密度为1个·孔^(-1)是制备MDCK单克隆细胞的最佳条件。 展开更多
关键词 有限稀释法 mdck单克隆细胞 接种密度 血清浓度
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不同MDCK单克隆细胞株对H5亚型禽流感病毒增殖条件和放大工艺的研究 被引量:1
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作者 方琳 朱辉 +3 位作者 黄皓源 彭思力 覃海康 梁昭平 《动物医学进展》 北大核心 2020年第4期38-41,共4页
为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;... 为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;在摇瓶工艺的基础上,将该细胞在100 L生物反应器中接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,检测接种后不同时间病毒HA效价和病毒滴度(EID 50),确定最适接毒量和收获时间。共筛选出22株MDCK全悬浮细胞单克隆细胞株,其中5株对H5亚型禽流感病毒rFJ56株最敏感,接种后病毒HA效价均可达到9 log2;对MDCK单克隆细胞株按0.01%体积比接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,在100 L生物反应器中培养60 h,HA效价可达10 log2,病毒含量可达108.17 EID 50/0.1 mL,可为H5亚型禽流感病毒无血清全悬浮培养放大工艺提供参考。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感病毒 mdck单克隆细胞 无血清全悬浮培养 接毒量 收获时间
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