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环状RNA mmu_circ_0000818在地塞米松导致的MC3T3-E1细胞凋亡中的作用及机制
1
作者 杨慧霞 丁宁 +5 位作者 马润秋 李桂忠 郝银菊 马胜超 姜怡邓 白志刚 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第4期478-489,共12页
目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dex... 目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dexamethasone(DEX)组;(2)采用Western blot检测各组细胞BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达,TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;(3)提取正常和DEX处理的MC3T3-E1细胞RNA,进行RNA测序,筛选出差异表达的circRNAs,并通过GO和KEGG分析其功能;(4)筛选出差异表达的mmu_circ_0000818并进行细胞水平验证以及UCSC Genome Browser Gateway和circbase网站分析mmu_circ_0000818在染色体的位置和保守性;(5)构建mmu_circ_0000818过表达质粒及小干扰RNA(siRNA)并转染细胞,流式细胞术检测各组MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果(1)与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞凋亡升高(P<0.01);(2)根据log2foldchange(≥2)和P值(P<0.05)筛选差异表达的circRNAs,与Control组相比,DEX组中共有234个表达差异的circRNAs,其中上调的138个,下调的96个。差异表达circRNAs的靶基因利用GO和KEGG进行富集分析,Apoptosis(凋亡)和PI3K-Akt signaling pathway(磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路)差异最显著。(3)qRT-PCR结果显示,与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞中mmu_circ_0000818表达明显升高(P<0.01),UCSC Genome Browser Gateway和circbase分析发现mmu_circ_0000818主要位于17:78712463-78715086,由Crim1基因第6~7外显子环化形成并且在不同物种间具有高的保守性。(4)流式细胞术结果提示抑制mmu_circ_0000818可改善DEX引起的MC3T3-E1细胞凋亡,过表达则促进其凋亡。结论mmu_circ_0000818在DEX处理的MC3T3-E1细胞中显著增高,降低其可抑制DEX引起的细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA mmu_circ_0000818 地塞米松 mc3t3-e1细胞 RNA测序 凋亡
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蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒的制备、结构表征及其对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响
2
作者 陈旭洁 梁慧嘉 +5 位作者 焦春伟 何春艳 陈少丹 陈秋颜 谢意珍 高雄 《食品工业科技》 北大核心 2025年第7期123-132,共10页
本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法... 本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法、高效凝胶渗透色谱法和高效阴离子交换色谱法分析PHPW的基本理化特性;以PHPW为模板,通过氧化还原法制备PHPW-SeNPs,采用纳米粒度仪、透射电子显微镜、X射线衍射仪、X射线光电子能谱仪、傅里叶变换红外光谱仪表征PHPW-SeNPs结构,并评价其稳定性;采用CCK-8法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒及实时定量PCR技术评价PHPW-SeNPs对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响。结果表明,PHPW是一种以葡萄糖为主的中性多糖,其多糖含量和重均分子量分别为99.1%和29.4 kDa。利用200μg/mL PHPW制备获得的PHPW-SeNPs粒径最小且分散性好,呈现零价态、无定形、球状的结构,分析测定的元素中含有碳(63.1%)、氧(3.5%)和硒(33.4%),PHPW中的羟基可通过类似氢键作用稳定SeNPs。PHPW-SeNPs溶液在pH6~8、4℃避光条件下具有较好的稳定性。PHPW-SeNPs在1.25~20μmol/L浓度范围内,MC3T3-E1细胞增殖率呈剂量、时间依赖性提高,当浓度为20μmol/L时,MC3T3-E1细胞ALP活力增强至对照组的1.8倍,骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、RUNT相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、osteorix(OSX)及ALP mRNA表达量分别上调至对照组的2.9、4.7、3.2和3.8倍。综上所述,以多糖组分PHPW为模板可成功制备稳定性较好的PHPW-SeNPs,其能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化,在预防骨质疏松方面具有良好的应用潜力,有望开发成促进骨健康的保健品。 展开更多
关键词 蝙蝠蛾拟青霉 菌丝体多糖 纳米硒 结构特性 mc3t3-e1细胞 成骨分化
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金纳米棒的温和光热效应对MC3T3-E1成骨性能的研究
3
作者 闫佩博 宋文 +2 位作者 慕昭 刘金婵 马志伟 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第3期314-320,共7页
目的:探究金纳米棒(AuNRs)的温和光热效应对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化性能的影响。方法:采用牛血清白蛋白(BSA)涂层对AuNRs进行表面改性。采用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、近红外激光器等分别对AuNRs@CTAB和AuNRs@... 目的:探究金纳米棒(AuNRs)的温和光热效应对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化性能的影响。方法:采用牛血清白蛋白(BSA)涂层对AuNRs进行表面改性。采用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、近红外激光器等分别对AuNRs@CTAB和AuNRs@BSA进行表征分析并测定其光热效应和光热稳定性;活死染色和CCK-8实验分别检测了AuNRs@BSA的生物安全性;ALP染色、茜素红染色及半定量检测AuNRs@BSA的温和光热作用对MC3T3-E1成骨分化能力的影响。结果:成功制备了具有生物安全性且响应近红外光的AuNRs@BSA,体外实验结果表明,AuNRs@BSA的温和光热效应增强MC3T3-E1的ALP活性和矿化能力(P<0.0001)。结论:AuNRs@BSA的温和光热作用可以促进MC3T3-E1的成骨分化。 展开更多
关键词 金纳米棒 BSA 温和光热效应 mc3t3-e1 成骨性能
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薯蓣皂苷通过上调Lrp5、β-catenin表达促进成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化 被引量：11
4
作者 张春芳 吴珊 +6 位作者 彭金咏 夏凡 王长远 刘琦 孟强 刘克辛 孙慧君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1255-1260,共6页
目的探讨薯蓣皂苷对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响,并初步探讨薯蓣皂苷预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法①体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分别加入含不同浓度的薯蓣皂苷(0.3、0.6、1.2μmol·L-1)进行培养,以洛伐... 目的探讨薯蓣皂苷对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响,并初步探讨薯蓣皂苷预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法①体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分别加入含不同浓度的薯蓣皂苷(0.3、0.6、1.2μmol·L-1)进行培养,以洛伐他汀(0.04μmol·L-1)作为阳性对照。采用MTT法检测细胞增殖情况;用ALP试剂盒检测细胞内ALP的活性;采用RT-PCR检测Lrp5、β-catenin、OPG/RANKL mRNA表达情况;Von Kossa染色法检测细胞矿化能力。②通过RNAi技术将Lrp5基因沉默,检测薯蓣皂苷是否依赖于Lrp5来调节OPG/RANKL的比值。结果①薯蓣皂苷可以剂量依赖的促进MC3T3-E1细胞的增殖;②薯蓣皂苷可以剂量依赖的增加MC3T3-E1细胞ALP的活性;③薯蓣皂苷可以剂量依赖的上调MC3T3-E1细胞Lrp5、β-catenin、OPG/RANKL mRNA表达水平;④薯蓣皂苷可以使MC3T3-E1细胞产生的矿化结节数增加;⑤薯蓣皂苷依赖于Lrp5来调节MC3T3-E1的OPG/RANKL比值。结论①适量浓度的薯蓣皂苷可以促进MC3T3-E1细胞的增殖与分化;②薯蓣皂苷可以调节Lrp5等与骨代谢相关的基因的表达以产生抗骨质疏松作用。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷 mc3t3-e1细胞 Lrp5 OPG RANKL 增殖 分化
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续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1细胞分化及增殖的影响 被引量：12
5
作者 陈娟 陈赛楠 +4 位作者 叶云金 李生强 谢丽华 黄景文 葛继荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1545-1549,1584,共6页
目的 探讨续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1成骨细胞分化及增殖的影响。 方法 制备续苓健骨汤含药血清,实验分为空白对照组、含药血清低剂量组、中剂量组和高剂量组。采用CCK-8法和流式细胞术检测续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1细胞增殖和... 目的 探讨续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1成骨细胞分化及增殖的影响。 方法 制备续苓健骨汤含药血清,实验分为空白对照组、含药血清低剂量组、中剂量组和高剂量组。采用CCK-8法和流式细胞术检测续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响;碱性磷酸酶(ALP)活性测定MC3T3-E1细胞的成骨分化能力;茜素红染色检测MC3T3-E1细胞的矿化能力;实时荧光定量PCR检测成骨分化基因Runx2、OC、Bmp2、Col1a1mRNA水平。 结果 与空白对照组比较,中、高剂量续苓健骨汤含药血清能促进 MC3T3-E1 细胞增殖、S期细胞比率和细胞增殖指数,并且呈现一定的剂量依赖性;同时中高剂量续苓健骨汤含药血清组能明显提高 MC3T3-E1 细胞ALP活性( P <0.01)和钙化能力( P <0.01),促进 Runx2、OC、Bmp2、Col1a1 mRNA的表达( P <0.05)。 结论 续苓健骨汤含药血清能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,并通过上调骨形成相关基因Runx2、OC、BMP2、Col1a1的表达水平,提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。 展开更多
关键词 中医中药 续苓健骨 含药血清 mc3t3-e1细胞 细胞增殖 成骨分化
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鲫鱼卵唾液酸糖蛋白化学结构分析及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响 被引量：10
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作者 夏光华 贺敏 +2 位作者 詹麒平 薛长湖 王静凤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第13期203-207,共5页
目的:成熟的鲫鱼卵经提取、分离纯化得到唾液酸糖蛋白(sialyglycoproteins of Carassius auratus eggs,CA-SGP),分析其化学结构,及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响。方法:采用水提法从成熟鲫鱼卵中提取水溶性蛋白,经阴离子交换色谱... 目的:成熟的鲫鱼卵经提取、分离纯化得到唾液酸糖蛋白(sialyglycoproteins of Carassius auratus eggs,CA-SGP),分析其化学结构,及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响。方法:采用水提法从成熟鲫鱼卵中提取水溶性蛋白,经阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱分离纯化鲫鱼卵水溶性蛋白得到CA-SGP,测定其基本组成,采用高效凝胶液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子质量和纯度,PMP柱前衍生高效液相色谱法测定其单糖组成;采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞的增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性,茜素红染色法测定矿化结节的数量。结果:得到单一的组分CA-SGP,在高效凝胶过滤色谱色谱图上呈现单一的糖和蛋白的检测重叠峰,在凝胶电泳图上呈现单一弥散性条带,其蛋白质含量为14.33%,己糖含量为62.81%,N-乙酰神经氨酸(N-acetylneurainic acid,Neu5Ac)含量为19.72%。单糖组成测定结果显示:CA-SGP主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖胺组成,其物质的量比为7.61∶6.70∶1.00;MC3T3-E1细胞与CA-SGP共同孵育后,其增殖率显著增加,COLⅠ和OCN的分泌量分别增加了39.28%和83.06%,ALP活性提高了285.08%,矿化结节的数量增加了96.41%,说明CA-SGP显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化。结论:CA-SGP为富含Neu5Ac的糖蛋白,具有显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的作用,对开发抗骨质疏松功能性食品具有重要意义。 展开更多
关键词 鲫鱼卵唾液酸糖蛋白 分离纯化 mc3t3-e1细胞 增殖 分化
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巴戟天多糖的理化性质及其对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响 被引量：9
7
作者 段宙位 何艾 +3 位作者 陈婷 谢辉 王世萍 窦志浩 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第23期312-316,共5页
以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(ost... 以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,评价多糖提取物对成骨细胞增殖的影响。结果表明,巴戟天多糖属于酸性多糖,pH为6.15±0.13,相对黏度为1.26±0.12,具有糖的特性和三股螺旋结构,溶解性较好,不含蛋白质或多肽;巴戟天多糖提取物浓度为50μg/m L时,MC3T3-E1细胞增殖率极显著增加(P <0.01),达149.67%,COLⅠ和OCN的分泌量极显著增加(P <0.01),分别增加44.98%和85.01%,ALP活性极显著提高(P <0.01),提高了258.95%。表明巴戟天多糖提取物能显著促进MC3T3-E1细胞增殖与分化。 展开更多
关键词 巴戟天 多糖 理化性质 mc3t3-e1细胞 增殖
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xy9902对MC3T3-E1细胞的增殖和分化作用 被引量：8
8
作者 侯进 熊晓云 +3 位作者 弥曼 王捷频 刘莉 梅其炳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期529-532,共4页
目的研究化合物xy9902对成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化的影响,并初步探讨其机制。方法采用MTT比色法测定化合物对成骨细胞MC3T3-E1的增殖作用;通过硝基苯磷酸盐法测定细胞内碱性磷酸酶(A lkaline phosphatase,ALP)活性的变化,观察化合... 目的研究化合物xy9902对成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化的影响,并初步探讨其机制。方法采用MTT比色法测定化合物对成骨细胞MC3T3-E1的增殖作用;通过硝基苯磷酸盐法测定细胞内碱性磷酸酶(A lkaline phosphatase,ALP)活性的变化,观察化合物对细胞分化的影响;用放射性配体结合法考察化合物与雌激素受体(Estrogen ic recep-tor,ER)的亲和力。结果化合物xy9902对成骨细胞有促增殖和促分化作用,这一作用可被tamoxifen阻断;xy9902与ER有亲和力,对ERα和ERβ的IC50分别为8.45×10-6mol.L-1和1.66×10-6mol.L-1。结论化合物xy9902对成骨细胞有促增殖和促分化作用,其作用机制可能与ER激动有关。 展开更多
关键词 mc3t3-e1细胞 雌激素受体(ER) 增殖 分化
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左归丸含药血清通过ERK/TGF-β/Smads信号级联调控MC3T3-E1细胞增殖与分化 被引量：11
9
作者 蒿长英 任艳玲 +2 位作者 刘立萍 宋囡 王智民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1670-1675,共6页
目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)/转化生长因子β(TGF-β)/Sma和Mad相关蛋白(Smads)信号级联在左归丸含药血清干预成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞增殖与分化中的作用。方法:以倍美力为阳性对照药,对Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠灌服高、... 目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)/转化生长因子β(TGF-β)/Sma和Mad相关蛋白(Smads)信号级联在左归丸含药血清干预成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞增殖与分化中的作用。方法:以倍美力为阳性对照药,对Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,7 d后腹主动脉取血分离含药血清。采用噻唑蓝(MTT)法检测左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞的增殖作用,采用改良钙钴染色法检测碱性磷酸酶(ALP)表达,采用茜素红染色法检测钙化结节,采用Western blotting法检测核结合因子α1(Cbfα1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白表达,采用real-time RT-PCR法检测TGF-β1、Smad4和Smad2 mRNA表达。结果:左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞的促增殖作用呈剂量和时间相关性,其中以低剂量且体积分数为15%作用48 h后对MC3T3-E1的促增殖作用最大;左归丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞ALP表达,增强细胞基质钙化,提高Cbfα1和ColⅠ蛋白分泌,上调TGF-β1、Smad4和Smad2 mRNA表达;加入ERK1/2信号通路特异性阻滞剂PD98059后,MC3T3-E1细胞增殖降低,ALP表达下降,细胞基质钙化减弱,Cbfα1和ColⅠ蛋白分泌降低,Smad4和Smad2 mRNA表达下调,TGF-β1mRNA表达进一步上调。结论:左归丸可能通过干预ERK/TGF-β/Smads信号级联而调控成骨细胞的增殖和分化,这可能是其防治骨质疏松症的机制之一。 展开更多
关键词 左归丸 细胞外信号调节激酶类 转化生长因子β Smad蛋白类 mc3t3-e1细胞
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葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响 被引量：6
10
作者 曾祥伟 冯倩 +2 位作者 张莹莹 赵凤鸣 詹秀琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期977-982,共6页
目的观察葛根素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响。方法分别采用CCK-8法、碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色测定葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化、矿化作用的影响。流式细胞术检测葛根素对MC3T3-E... 目的观察葛根素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响。方法分别采用CCK-8法、碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色测定葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化、矿化作用的影响。流式细胞术检测葛根素对MC3T3-E1细胞周期及细胞内钙离子浓度的影响。RT-PCR检测葛根素对TRPM3基因m RNA表达的影响。结果 0.1、1、10μmol·L^(-1)葛根素能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,使G1期细胞比例减少,G_2+S期细胞比例增加,其中0.1μmol·L^(-1)浓度效果最为明显;与正常对照组相比较,0.1μmol·L^(-1)葛根素组细胞的ALP活性和矿化结节面积均明显提高;0.1μmol·L^(-1)葛根素组细胞的TRPM3 m RNA表达水平和细胞内钙离子浓度明显降低。结论葛根素可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化,可降低TRPM3 mRNA表达水平和细胞内钙离子浓度。 展开更多
关键词 葛根素 mc3t3-e1细胞 增殖 分化 矿化 tRPM3
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猪釉基质蛋白对MC3T3-E1成骨细胞增殖分化的影响 被引量：13
11
作者 束蓉 刘正 葛琳华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期226-228,共3页
目的 :探索釉基质蛋白 (EMPs)促进成骨细胞增殖分化的作用 ,为进一步研究提供基本数据。方法 :选择MC3T3 E1成骨细胞株 ,利用体外细胞培养方法 ,分别加入不同浓度的EMPsα MEM培养液 ,于培养 0、1、2、3、4,5、6d进行细胞计数 ,采用SAS... 目的 :探索釉基质蛋白 (EMPs)促进成骨细胞增殖分化的作用 ,为进一步研究提供基本数据。方法 :选择MC3T3 E1成骨细胞株 ,利用体外细胞培养方法 ,分别加入不同浓度的EMPsα MEM培养液 ,于培养 0、1、2、3、4,5、6d进行细胞计数 ,采用SAS软件对细胞计数数据作单因素方差分析。结果 :EMPs各组细胞计数均高于阴性对照 (C)组 (P <0 0 1)。第 2天 ,10 0 μg/ml和 15 0 μg/mlEMPs组的细胞计数高于阳性对照 (T)组 (P <0 0 1) ;第 5天 ,10 0μg/mlEMPs组的细胞计数不但高于C、T组 ,还明显高于其它EMPs浓度组。结论 :釉基质蛋白可明显促进成骨细胞的增殖分化。 展开更多
关键词 猪釉基质蛋白 mc3t3-e1 成骨细胞 牙槽骨再生
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8味中药提取物对MC3T3-E1细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响 被引量：11
12
作者 冯淑华 陈虹 刘薇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期661-663,共3页
目的:考察中药沙苑子、续断、桑寄生、鸡血藤、甘草、巴戟天、葫芦巴、射干不同提取部位对MC3T3-E1细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响。方法:将8味中药的醇提及不同极性溶剂萃取物与MC3T3-E1细胞体外培养,用MTT法检测各部位对成骨细胞MC3T... 目的:考察中药沙苑子、续断、桑寄生、鸡血藤、甘草、巴戟天、葫芦巴、射干不同提取部位对MC3T3-E1细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响。方法:将8味中药的醇提及不同极性溶剂萃取物与MC3T3-E1细胞体外培养,用MTT法检测各部位对成骨细胞MC3T3-E1的增殖影响;用PNPP法测定对成骨细胞MC3T3-E1细胞内和细胞外碱性磷酸酶活性的影响。结果:MC3T3-E1细胞经实验组药物和10-7 mol/L雌酚酮处理后96 h,与空白对照组相比,增殖速度显著加快的有:桑寄生的氯仿和乙酸乙酯萃取物、葫芦巴萃余物、射干的乙酸乙酯萃取物;细胞内ALP活性增加与对照组相比有显著性差异(P<0.01)的有:桑寄生、鸡血藤、巴戟天萃余物,细胞外ALP活性增加与对照组相比有显著性差异(P<0.01)的有:鸡血藤、巴戟天、射干的萃余物和葫芦巴石油醚萃取物。结论:鸡血藤、桑寄生、巴戟天、葫芦巴和射干具有促进成骨细胞合成和分泌ALP的作用,提示其具有促进成骨细胞增殖和分化的作用,可进一步研究其体内的作用,可为开发抗骨质疏松药物。 展开更多
关键词 mc3t3-e1细胞株 碱性磷酸酶 骨质疏松 成骨细胞
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铁调素对MC3T3-E1小鼠成骨细胞骨保护素和骨钙素基因表达的影响 被引量：6
13
作者 刘虎 徐又佳 +3 位作者 张积森 马勇 张鹏 钱忠明 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2010年第1期1-4,共4页
目的研究铁调素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞骨保护素(OPG)和骨钙素(BGP)基因表达的影响。方法小鼠MC3T3-E1细胞体外培养后,以不同浓度(100 nmol/ml,200 nmol/ml,300 nmol/ml)的铁调素作用72 h,用RT-PCR方法检测OPG、BGP mRNA的表达水平... 目的研究铁调素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞骨保护素(OPG)和骨钙素(BGP)基因表达的影响。方法小鼠MC3T3-E1细胞体外培养后,以不同浓度(100 nmol/ml,200 nmol/ml,300 nmol/ml)的铁调素作用72 h,用RT-PCR方法检测OPG、BGP mRNA的表达水平。结果RT-PCR检测显示在不同浓度铁调素干预后,各组均有OPG mRNA和BGP mRNA表达;不同浓度组的OPG mRNA和BGP mRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在显著性差异(P<0.05)。结论铁调素可上调MC3T3-E1细胞OPG及BGP mRNA表达,铁调素浓度增加转录水平逐渐增加,结果显示有浓度依赖性。 展开更多
关键词 铁调素 骨钙素 骨保护素 mc3t3-e1细胞 Rt—PCR
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补肾活血固齿方对大鼠MC3T3-E1细胞BMP2表达及超微结构的影响 被引量：5
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作者 李立芳 李敏 +2 位作者 刁志虹 高毅 王双双 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第7期1663-1665,I0011,共4页
目的:研究补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞(MC3T3-E1细胞)BMP2表达及超微结构的影响,探讨该方剂治疗牙周炎的作用机理。方法:MC3T3-E1细胞分别于补肾活血固齿方含药血清、无药血清中培养24、48、72 h,ELISA法检测MC3T3-E1细胞BMP2... 目的:研究补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞(MC3T3-E1细胞)BMP2表达及超微结构的影响,探讨该方剂治疗牙周炎的作用机理。方法:MC3T3-E1细胞分别于补肾活血固齿方含药血清、无药血清中培养24、48、72 h,ELISA法检测MC3T3-E1细胞BMP2的表达;培养14 d后,透射电镜观察MC3T3-E1细胞超微结构的变化。结果:含药血清组培养上清液的光密度值明显高于无药血清组,统计结果显示差异有显著性(P<0.05)。MC3T3-E1细胞经药物作用后呈现成骨细胞样表型,细胞表面突起变多,核卵圆形、较大,核膜凹陷,核仁明显;胞质丰富,粗面内质网扩张明显,网腔内充满低电子密度絮状物;高尔基复合体、线粒体发达,具有良好的的分泌功能,细胞代谢活跃。结论:补肾活血固齿方能促进MC3T3-E1细胞分泌BMP2,参与诱导成骨作用;补肾活血固齿方能诱导MC3T3-E1细胞呈成骨细胞样表型,促进成骨细胞的分化生长。 展开更多
关键词 补肾活血固齿方 mc3t3-e1细胞 BMP2 透射电镜 细胞超微结构
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Fe_3O_4涂层多巴胺修饰PET人工韧带对MC3T3-E1细胞粘附、增殖和分化影响的实验研究 被引量：5
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作者 俞斌 丁惠锋 +2 位作者 杨超华 禹宝庆 黄建明 《中国运动医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第5期438-444,共7页
目的:观察MC3T3-E1细胞在Fe_3O_4涂层多巴胺修饰聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)人工韧带材料表面的粘附、增殖及成骨分化情况。方法:按PET材料表面涂层情况分为4组:PET组,即PET表面未处理组;多巴胺(DA)组,即PET表面进行多巴胺涂层组;100 Fe_... 目的:观察MC3T3-E1细胞在Fe_3O_4涂层多巴胺修饰聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)人工韧带材料表面的粘附、增殖及成骨分化情况。方法:按PET材料表面涂层情况分为4组:PET组,即PET表面未处理组;多巴胺(DA)组,即PET表面进行多巴胺涂层组;100 Fe_3O_4组和200 Fe_3O_4组,分别为PET经多巴胺处理后表面涂有100μg/ml和200μg/ml的Fe_3O_4溶液组。在上述4组PET材料上分别培养MC3T3-E1细胞,进行各项检测。扫描电镜(SEM)和X射线能谱分析(EDS)材料涂层情况。细胞在材料上培养3天和7天后行荧光染色,观察细胞粘附情况。培养1、3、7天后,行CCK-8检测MC3T3-E1细胞的增殖。诱导培养基培养7天检测碱性磷酸酶活性;培养21天行茜素红染色,检测细胞矿化情况;培养14天行Real Time PCR检测骨钙蛋白和胶原I基因的表达。结果:SEM和EDS检测验证涂层成功。荧光染色显示涂层组有效增加了细胞的粘附。细胞增殖实验示涂层组对细胞增殖有促进作用,各涂层组与未涂层组差异具有统计学意义(P<0.05)。涂层材料组碱性磷酸酶OD值明显高于未涂层组(P<0.05)。茜素红染色示各组都有较多矿化结节形成,定量分析显示100 Fe_3O_4组和200 Fe_3O_4组与PET组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PCR检测显示涂层组骨钙蛋白和I型胶原基因的表达都较未涂层组增加,骨钙蛋白:Fe_3O_4组与PET组比较差异有统计学意义(P<0.01);I型胶原:DA组、Fe_3O_4组与PET组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:经多巴胺修饰四氧化三铁涂层处理的PET人工韧带材料,能明显促进MC3T3-E1细胞的粘附、增殖和分化。 展开更多
关键词 聚对苯二甲酸乙二醇酯 多巴胺 四氧化三铁 mc3t3-e1
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卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响 被引量：4
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作者 刘钰瑜 姚卫民 +1 位作者 徐道华 崔燎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1259-1262,共4页
目的观察卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化和Ⅰ型胶原基因表达水平影响。方法在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度的卡托普利,应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、RT-PCR的方法观察卡托普利对MC3T3-E1细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和Ⅰ型胶原mRNA表... 目的观察卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化和Ⅰ型胶原基因表达水平影响。方法在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度的卡托普利,应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、RT-PCR的方法观察卡托普利对MC3T3-E1细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果 10-11 mol.L-1浓度的卡托普利作用24 h能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,作用3 d能明显促进MC3T3-E1细胞表达碱性磷酸酶。卡托普利可刺激MC3T3-E1细胞表达Ⅰ型胶原,以10-11 mol.L-1作用最强。结论卡托普利有促进MC3T3-E1细胞增殖、促进碱性磷酸酶表达和增加Ⅰ型胶原mRNA表达的作用。 展开更多
关键词 卡托普利 mc3t3-e1细胞 增殖 SY化 I型胶原 骨质疏松
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克老素抑制地塞米松诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡 被引量：3
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作者 黄倩 李宝善 +2 位作者 梁霄 刘丹 马厚勋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期570-576,共7页
目的探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运... 目的探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运用荧光倒置显微镜观察重组腺病毒的转染效果,qPCR与Western blot法分析KL mRNA和蛋白表达情况;CCK-8法检测不同浓度DEX作用于MC3T3-E1细胞后的存活率及各研究组细胞的生存情况;流式细胞仪分析各研究组细胞的凋亡率;qPCR与Western blot分析凋亡标志物的mRNA、蛋白表达;免疫荧光分析caspase-9的荧光蛋白表达情况。结果重组腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨细胞,KL组和KL+DEX组的KL mRNA与蛋白表达量较非转染组明显升高。CCK-8法检测出DEX的适宜干预浓度为2.0 mmol·L^(-1)。DEX组、GFP+DEX组较其余组细胞存活率明显降低、凋亡率明显增加,Bax、Bcl-2的mRNA与蛋白表达分别表现出增加和降低趋势;KL组细胞存活率、凋亡率,以及Bcl-2、Bax mRNA与蛋白表达较DEX组及KL+DEX组均明显改善。结论大剂量DEX的运用能够诱发MC3T3-E1成骨细胞凋亡,上调KL表达具有抵抗DEX诱导成骨细胞凋亡的作用,提示上调KL表达可改善糖皮质激素诱导性骨质疏松,为大剂量使用糖皮质激素所致医源性骨质疏松的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 克老素 地塞米松 mc3t3-e1成骨细胞 凋亡 Bcl-2 BAX CASPASE-9
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脂多糖刺激的单核巨噬细胞培养上清液对小鼠MC3T3-E1细胞c-fos表达的影响 被引量：4
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作者 徐春燕 邓辉 +2 位作者 叶洁 王海燕 胡荣党 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期786-789,共4页
目的:研究经牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)脂多糖(LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)c-fos表达的影响。方法:收集100μg/L的Pg LPS刺激RAW264.724h后的上清液,以20%稀释浓度分... 目的:研究经牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)脂多糖(LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)c-fos表达的影响。方法:收集100μg/L的Pg LPS刺激RAW264.724h后的上清液,以20%稀释浓度分别作用于MC3T3-E1,分别在1、3、6、12、24、48、72h时,采用RT-PCR和Western blot检测ALP mRNA、c-fos mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:Pg LPS刺激RAW264.7细胞培养上清作用于MC3T3-E1后,ALP mRNA表达均下降,在6h时表达最低,而c-fos的mRNA和蛋白水平均提高,分别在3h和6h时达最高水平。结论:Pg LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清可通过上调成骨细胞c-fos的表达而抑制其成骨能力。 展开更多
关键词 脂多糖 mc3t3-e1 C-FOS
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MC3T3-E1细胞在不同机械应力刺激下成骨表达机制的研究进展 被引量：5
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作者 宋志靖 王薇 +5 位作者 宋敏 董万涛 巩彦龙 王凯 范凯 张亚彬 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期289-292,307,共5页
机械应力是刺激骨组织生长的有效条件,它的加载和卸载通过影响成骨细胞的成骨进程和功能,以维持骨重建与动态平衡,从而对骨骼微环境和骨代谢产生重要影响。成骨样细胞系MC3T3-E1细胞作为力学刺激敏感细胞,常被用作应力环境下研究成骨机... 机械应力是刺激骨组织生长的有效条件,它的加载和卸载通过影响成骨细胞的成骨进程和功能,以维持骨重建与动态平衡,从而对骨骼微环境和骨代谢产生重要影响。成骨样细胞系MC3T3-E1细胞作为力学刺激敏感细胞,常被用作应力环境下研究成骨机制的经典细胞。本文主要综述了5种体外不同机械应力刺激下的MC3T3-E1细胞成骨表达机制最新进展,以期阐明成骨细胞接收和传导力学刺激的转导网络,并对研究不同机械应力刺激下保持骨骼稳定和损伤重建的机制有所指导。 展开更多
关键词 mc3t3-e1细胞 机械应力 成骨 机制
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葛根素对MC3T3-E1细胞TGF-β_1/Smad信号通路的作用 被引量：5
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作者 詹秀琴 钱康琦 孙玉明 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1121-1124,共4页
目的探讨葛根素通过TGF-β1通路促进MC3T3-E1细胞增殖的分子机理。方法 MTT法检测MC3T3-E1细胞增殖水平;实时荧光定量PCR法和Western blot法测定TGF-β1、Smad2、Smad3基因表达水平。结果葛根素能促进MC3T3-E1细胞的增殖;不同质量浓度... 目的探讨葛根素通过TGF-β1通路促进MC3T3-E1细胞增殖的分子机理。方法 MTT法检测MC3T3-E1细胞增殖水平;实时荧光定量PCR法和Western blot法测定TGF-β1、Smad2、Smad3基因表达水平。结果葛根素能促进MC3T3-E1细胞的增殖;不同质量浓度葛根素作用于MC3T3-E1细胞24 h后,TGF-β1、Smad2、Smad3基因表达水平同对照组比较具有显著性差异,其中尤以1 mg/mL质量浓度组效果最为显著。结论葛根素可通过细胞内TGF-β1/Smad信号通路促进骨形成。 展开更多
关键词 葛根素 mc3t3-e1细胞 基因表达
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