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基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制
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作者 章帅 刘靓靓 +2 位作者 赵轶峰 盛茹 李曙光 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期508-514,共7页
目的探讨基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制。方法30只大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,MAGE-3沉默(SM)组,每组10只,对MO组、SM组采用MNNG灌胃法建模,建模成功后,... 目的探讨基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制。方法30只大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,MAGE-3沉默(SM)组,每组10只,对MO组、SM组采用MNNG灌胃法建模,建模成功后,对SM组腹腔注射20μg·kg^(-1) shRNA MAGE-3慢病毒载体,肠道菌群选择性培养基检测大鼠肠道菌群数量,免疫组化法检测胃黏膜PTEN表达,HE染色检测肝转移情况,免疫印迹法检测MAPK/ERK信号通路蛋白表达,体外实验验证siRNA介导MAGE-3沉默对MAPK/ERK信号通路的调节作用。结果与CO组相比,MO组肠球菌、大肠埃希菌含量、p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达升高(P<0.05),乳酸杆菌、双岐杆菌含量、PTEN表达降低(P<0.05),与MO组比较,SM组肠球菌、大肠埃希菌含量、p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达降低(P<0.05),乳酸杆菌、双岐杆菌含量、PTEN表达升高(P<0.05);与CO组相比,MO组细胞p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达无明显差异(P>0.05),与MO组比较,SM组细胞p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达降低(P<0.05)。结论siRNA介导MAGE-3沉默可明显改善胃癌大鼠肠道菌群,促进胃黏膜PTEN表达,并抑制肝转移,其作用机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 mapk/erk信号通路 MAGE-3 胃癌 肠道菌群 PTEN 肝转移
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色胺酮通过调控MAPK/ERK信号通路抑制胶质瘤细胞的演进
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作者 魏静 周涵 +3 位作者 焦方正 袁子涵 乔伊璠 方艳 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第5期618-626,共9页
目的探讨TRYP是否可以抑制胶质瘤细胞的恶性行为能力,并阐明其作用的具体机制。方法MTT实验检测TRYP对胶质瘤细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测TRYP对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡实验检测TRYP对胶... 目的探讨TRYP是否可以抑制胶质瘤细胞的恶性行为能力,并阐明其作用的具体机制。方法MTT实验检测TRYP对胶质瘤细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测TRYP对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡实验检测TRYP对胶质瘤细胞凋亡能力的影响。PI/RNase细胞周期实验检测TRYP对胶质瘤细胞周期分布的影响。Western blot实验检测TRYP对胶质瘤细胞p-ERK和c-Myc蛋白表达的影响。通过构建裸鼠皮下移植瘤模型,验证TRYP在体内对胶质瘤细胞增殖能力的影响。TUNEL实验检测TRYP对移植瘤中细胞凋亡能力的影响。免疫组化法检测TRYP对移植瘤组织中Ki67、BRAF、c-Myc、p-ERK蛋白表达的影响。结果MTT实验结果显示:TRYP能有效抑制胶质瘤细胞的增殖能力(P<0.001)。Transwell实验结果显示:TRYP能够抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力(P<0.001)。AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测结果显示:TRYP能够促进胶质瘤细胞发生凋亡(P<0.001)。PI/RNase细胞周期实验结果显示:TRYP能够促进胶质瘤细胞发生G 2期周期阻滞(P<0.001)。Western blot结果显示:TRYP处理后胶质瘤细胞内c-Myc、p-ERK蛋白表达水平均显著降低(P<0.001)。裸鼠皮下移植瘤模型结果显示:TRYP能够有效抑制移植瘤的增长速度(P<0.01)和重量(P<0.05)。TUNEL实验表明:TRYP能够促进移植瘤中肿瘤细胞发生凋亡(P<0.001)。免疫组化结果显示:TRYP能够有效抑制移植瘤中Ki67的表达(P<0.01),并抑制MAPK/ERK信号通路中BRAF、c-Myc和p-ERK的蛋白表达(P<0.001)。结论TRYP可以抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进胶质瘤细胞的凋亡,使胶质瘤细胞周期发生阻滞。TRYP可能通过抑制MAPK/ERK信号通路中BRAF、c-Myc和p-ERK的蛋白表达,抑制胶质瘤的恶性进程。 展开更多
关键词 胶质瘤 色胺酮 mapk/erk信号通路
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积雪草苷调节Ras/ERK/MAPK信号通路对肾小球肾炎大鼠炎症反应和氧化应激的影响
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作者 吴紫娟 郭山脉 +2 位作者 商晶晶 王康 徐珊 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期116-121,128,共7页
目的:探究积雪草苷(AS)调节大鼠肉瘤(Ras)/细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠炎症反应和氧化应激的影响。方法:将60只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、MsPGN模型组(Mo... 目的:探究积雪草苷(AS)调节大鼠肉瘤(Ras)/细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠炎症反应和氧化应激的影响。方法:将60只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、MsPGN模型组(Model组)、AS低剂量组(AS-L组,40 mg/kg)、AS高剂量组(AS-H组,80 mg/kg)、高剂量AS+Ras/ERK/MAPK信号通路激活剂组(AS-H+茴香霉素组,80 mg/kg AS+10 mg/kg茴香霉素),每组12只。采用改良血清免疫法构建大鼠MsPGN模型。考马斯亮蓝法检测各组大鼠24 h尿蛋白含量。HE染色、PSA染色观察各组大鼠肾组织病理学变化。TUNEL染色检测各组大鼠肾小球细胞凋亡。ELISA检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、超氧化物歧化酶(SOD)、血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)水平和肾组织中IL-18、IL-1β、TNF-α、SOD和MDA水平。Western blot检测各组大鼠肾组织中Ras、p-ERK1/2、ERK1/2、MAPK、p-MAPK蛋白水平。结果:①AS减轻MsPGN大鼠的炎症反应和氧化应激损伤。与Sham组相比,Model组大鼠24 h尿蛋白含量、肾小球细胞凋亡率、血清Scr、BUN、MDA水平、肾组织IL-18、IL-1β、TNF-α、MDA水平显著升高(P<0.05),血清和肾组织SOD水平显著降低(P<0.05),HE染色观察到大鼠肾小球出现严重的系膜增生,基质出现大量沉积,基底膜明显增厚。与Model组相比,AS-H组大鼠24 h尿蛋白含量、肾小球细胞凋亡率、血清Scr、BUN、MDA水平、肾组织IL-18、IL-1β、TNF-α、MDA水平显著降低(P<0.05),血清和肾组织SOD水平显著升高(P<0.05),HE染色观察到大鼠肾小球系膜增生和损伤减轻。②AS下调Ras/ERK/MAPK信号通路。与Sham组相比,Model组大鼠Ras蛋白表达、ERK1/2和MAPK的磷酸化水平显著升高(P<0.05);与Model组相比,AS-H组大鼠Ras蛋白表达、ERK1/2和MAPK的磷酸化水平显著降低(P<0.05),茴香霉素减轻了AS对MsPGN大鼠炎症反应和氧化应激损伤的抑制作用(P<0.05)。结论:AS可能通过下调Ras/ERK/MAPK信号通路减轻MsPGN大鼠的炎症反应和氧化应激损伤。 展开更多
关键词 积雪草苷 Ras/erk/mapk信号通路 肾小球肾炎 炎症反应 氧化应激
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艾附暖宫丸通过调控MAPK/ERK信号通路对寒凝血瘀型原发性痛经大鼠的影响 被引量:2
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作者 李玉兰 赵娜 +2 位作者 王彦娇 刘素军 聂晓博 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3131-3136,共6页
目的探讨艾附暖宫丸对寒凝血瘀型原发性痛经(PD)大鼠MAPK/ERK信号通路的影响。方法采用冰水浸泡法联合苯甲酸雌二醇和缩宫素建立寒凝血瘀PD模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、布洛芬组(0.06 g/kg)和艾附暖宫丸低、中、高剂量组(0.3... 目的探讨艾附暖宫丸对寒凝血瘀型原发性痛经(PD)大鼠MAPK/ERK信号通路的影响。方法采用冰水浸泡法联合苯甲酸雌二醇和缩宫素建立寒凝血瘀PD模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、布洛芬组(0.06 g/kg)和艾附暖宫丸低、中、高剂量组(0.36、0.72、1.44 g/kg),每组10只;另取10只正常饲养的大鼠为空白组,各组大鼠灌胃给予相应剂量药物,连续6 d。给药前后,分别对大鼠进行症候评分。末次给药后,观察大鼠扭体反应,取子宫组织测定平滑肌收缩最大张力和频率;ELISA法检测子宫组织PGF_(2α)、IL-6、TNF-α水平;HE染色观察子宫组织病理形态;免疫荧光法观察子宫组织HSP70蛋白表达;Western blot法检测大鼠子宫组织中p38MAPK和ERK1/2蛋白磷酸化表达。结果与模型组比较,艾附暖宫丸各剂量组寒凝血瘀型PD的症候评分降低(P<0.05,P<0.01),扭体次数减少(P<0.05,P<0.01),子宫组织中HSP70蛋白及ERK1/2、p38MAPK蛋白磷酸化表达降低(P<0.05,P<0.01);艾附暖宫丸中、高剂量组大鼠扭体潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),子宫平滑肌收缩的最大强度和频率降低(P<0.05,P<0.01),子宫组织PGF_(2α)、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论艾附暖宫丸对大鼠实验性寒凝血瘀型PD有良好的改善作用,其机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路活化有关。 展开更多
关键词 艾附暖宫丸 原发性痛经 寒凝血瘀 mapk/erk信号通路
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PCSK9通过MAPK/ERK通路促进卵巢癌细胞体外增殖和侵袭的实验研究
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作者 吴敏敏 骆婕 +3 位作者 廖凤儿 郑婷 范荻 郭琴 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期444-452,共9页
目的:探讨前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/可辛蛋白酶9型(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9, PCSK9)在卵巢癌中的作用及机制。方法:比较卵巢癌标本与相应的癌旁组织中PCSK9的表达水平的差异,并同步检测其在卵巢癌细胞系中的... 目的:探讨前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/可辛蛋白酶9型(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9, PCSK9)在卵巢癌中的作用及机制。方法:比较卵巢癌标本与相应的癌旁组织中PCSK9的表达水平的差异,并同步检测其在卵巢癌细胞系中的表达情况。用shRNA敲减体外培养的卵巢癌细胞系中PCSK9的表达并通过Western blot进行证实。通过EdU、集落形成和Transwell实验分析敲减PCSK9对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。用Western blot研究敲减PCSK9对MAPK/ERK信号通路的影响,并用MAPK/ERK信号通路激动剂以及PCSK9过表达质粒挽救实验验证MAPK/ERK信号通路参与PCSK9调控卵巢癌细胞的恶性生物学行为。结果:PCSK9在卵巢癌组织和细胞系中显著上调(P<0.01)。敲减PCSK9抑制了卵巢癌细胞的细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.01)。Western blot结果显示,敲减PCSK9降低了MAPK/ERK信号通路关键分子的表达水平(P<0.01)。反向激活MAPK/ERK信号通路和回补PCSK9表达逆转了敲减PCSK9对卵巢癌细胞的抑制作用。结论:PCSK9通过激活MAPK/ERK信号通路途径促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 卵巢癌 PCSK9蛋白 生物标志物 mapk/erk信号通路
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mTOR和ERK/MAPK信号通路调控自噬在孤独症发病中的作用
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作者 李延芳 邓亚楠 +1 位作者 王婷 张应花 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期225-228,共4页
孤独症是一种以重复刻板样行为和社交缺陷为主要特征的神经发育障碍性疾病,发病率高的特点使其逐渐成为研究的热点。中国与西方国家孤独症的发病率相似,约为1%,位于儿童精神疾病的前列^([1])。目前认为孤独症由环境和遗传因素共同决定,... 孤独症是一种以重复刻板样行为和社交缺陷为主要特征的神经发育障碍性疾病,发病率高的特点使其逐渐成为研究的热点。中国与西方国家孤独症的发病率相似,约为1%,位于儿童精神疾病的前列^([1])。目前认为孤独症由环境和遗传因素共同决定,病因复杂,具体机制尚不明确。随着研究的深入,自噬在孤独症发病机制中的作用受到广泛关注。 展开更多
关键词 孤独症 自噬 MTOR信号通路 erk/mapk信号通路
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miR-508-5p慢病毒过表达载体构建及对MAPK1/ERK信号通路靶向抑制作用的研究
7
作者 白静 范维宁 +3 位作者 邢译文 张涛 周林林 徐广贤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期34-39,共6页
目的:构建能高效表达成熟miR-508-5p小分子的慢病毒过表达载体,研究其对MAPK1/ERK信号通路靶向调控作用。方法:利用化学合成miR-508-5p茎环结构RNA,并将其克隆入线性化的pSicoR质粒中,经双酶切及测序鉴定;同时构建与miR-508-5p互补靶基... 目的:构建能高效表达成熟miR-508-5p小分子的慢病毒过表达载体,研究其对MAPK1/ERK信号通路靶向调控作用。方法:利用化学合成miR-508-5p茎环结构RNA,并将其克隆入线性化的pSicoR质粒中,经双酶切及测序鉴定;同时构建与miR-508-5p互补靶基因MAPK1的3'非翻译区,将其克隆入线性化的Report载体中。利用脂质体转染试剂将鉴定阳性的pSicoR-miR-508-5p重组质粒转染HEK-293T细胞,进一步通过Relative luciferase activity、Western blot及real-time PCR试验检测MAPK1蛋白和mRNA相对表达水平。结果:酶切及测序结果证明成功构建pSicoR-miR-508-5p及Report-MAPK1 3'-UTR重组质粒,并通过实验证实miR-508-5p过表达明显抑制MAPK1的蛋白表达水平及mRNA相对含量(P<0.05);抑制miR-508-5p的表达,又明显上调MAPK1的蛋白表达水平及mRNA相对含量(P<0.05)。结论:成功构建pSicoR-miR-508-5p慢病毒过表达载体,证实miR-508-5p直接靶标MAPK1的表达,在转录后水平对其进行负调控,为进一步研究miRNA对细胞通路和细胞周期的调控作用奠定了基础。 展开更多
关键词 miR-508-5P 细胞通路 丝裂原活化蛋白激酶(mapk1) 细胞外信号调节激酶(erk)
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MAPK/ERK信号通路在益气解毒方水提物诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用 被引量:20
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作者 胡晶 刘洁 +7 位作者 徐冰雁 戴娜 胡梅 周芳亮 史红健 罗晶婧 蔺婷 何迎春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1613-1621,共9页
目的 研究益气解毒方水提物对鼻咽癌细胞凋亡的影响,并从MAPK/ERK信号通路探讨其诱导凋亡的作用机制。方法 CCK-8法检测益气解毒方水提物对CNE1、CNE2细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色法、JC-10染色法、荧光双染流式细胞仪检测其对CNE1... 目的 研究益气解毒方水提物对鼻咽癌细胞凋亡的影响,并从MAPK/ERK信号通路探讨其诱导凋亡的作用机制。方法 CCK-8法检测益气解毒方水提物对CNE1、CNE2细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色法、JC-10染色法、荧光双染流式细胞仪检测其对CNE1、CNE2细胞凋亡的影响;Western blot法检测其对CNE1、CNE2细胞蛋白表达的影响。结果 益气解毒方水提物能抑制CNE1、CNE2细胞增殖( P <0.05)、诱导凋亡( P <0.05);药物作用48 h后,Survivin、XIAP、Bcl-2表达下降,Bax表达上升,MAPK/ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf、p-MEK、p-ERK表达下降( P <0.05);在此基础上,加入激活剂ISO和益气解毒方水提物后,与单用益气解毒方水提物相比,p-c-Raf、p-MEK、p-ERK1/2表达上调,Survivin、XIAP、Bcl-2表达增加,Bax表达下降,促凋亡效应也降低( P <0.05)。结论 益气解毒方水提物可诱导鼻咽癌细胞凋亡,该效应与其抑制MAPK/ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf、p-MEK、p-ERK1/2表达,进而下调Survivin、XIAP、Bcl-2表达,上调Bax表达有关。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 细胞凋亡 mapk/erk信号通路 Survivin XIAP
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少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症大鼠MAPK/ERK信号通路的影响 被引量:27
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作者 王金霞 崔宇红 +3 位作者 成映霞 范琳琳 张小花 范东英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期181-187,共7页
目的:观察少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症大鼠丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤治疗子宫内膜异位症的分子机制。方法:健康雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、痛经宝阳性对照组及少腹... 目的:观察少腹逐瘀汤对子宫内膜异位症大鼠丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤治疗子宫内膜异位症的分子机制。方法:健康雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、痛经宝阳性对照组及少腹逐瘀汤低、中、高剂量组。构建大鼠子宫内腹异位症模型,药物处理4周后,HE染色观察异位子宫组织的病理变化; ELISA法检测宫腔组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及IL-8的含量; RT-qPCR检测宫腔组织中ERK、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的mRNA表达量; Western blot检测宫腔组织中核因子-κB(NF-κB)、MAPK和MAPK-ERK激酶(MEK)的蛋白含量。结果:与模型组相比,少腹逐瘀汤中、高剂量组大鼠子宫组织中TNF-α、IL-6及IL-8含量显著降低(P <0. 05),ERK、VEGF和MMP-9的m RNA表达量显著降低(P <0. 05),NF-κB、MEK和MAPK的蛋白表达显著下降(P <0. 05)。结论:少腹逐瘀汤通过调节MAPK/ERK信号通路中关键分子的作用,达到治疗子宫内膜异位症的效果。 展开更多
关键词 少腹逐瘀汤 子宫内膜异位症 mapk/erk信号通路
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心衰康抑制慢性心衰大鼠心肌自噬及MAPK/ERK1/2信号通路 被引量:28
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作者 柴松波 王振涛 +1 位作者 张淑娟 刘舜禹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期981-987,共7页
目的:探究心衰康对慢性心衰大鼠心肌自噬的影响及其与MAPK/ERK1/2通路的关系。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、模型(model,结扎左冠状动脉前降支法复制大鼠慢性心衰模型)组、心衰康低、中和高剂量(TL、TM和TH)组及卡托普... 目的:探究心衰康对慢性心衰大鼠心肌自噬的影响及其与MAPK/ERK1/2通路的关系。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、模型(model,结扎左冠状动脉前降支法复制大鼠慢性心衰模型)组、心衰康低、中和高剂量(TL、TM和TH)组及卡托普利(captopril)组,每组12只,采用彩色多普勒超声仪评估大鼠心脏功能;HE染色观察心肌组织形态学变化;TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡情况;免疫荧光法检测心肌组织中微管相关蛋白1轻链3II(LC3-Ⅱ)表达情况;Western blot法检测心肌组织p-ERK、p-p38 MAPK、LC3-Ⅱ、beclin-1和p62的蛋白水平。结果:与sham组相比,model组左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)升高,舒张末期左室后壁厚度(LVPWTd)、收缩末期左室后壁厚度(LVPWTs)和左心室射血分数(LVEF)降低,心输出量(CO)、左心室舒张压(LVDP)、左心室收缩压(LVSP)和左心室压力最大上升/下降速率(+dp/dtmax/-dp/dtmax)降低(P<0.05);心肌细胞变形、坏死,心肌纤维断裂,伴有炎性细胞浸润;细胞凋亡率升高,LC3-II阳性率升高,p-ERK、p-p38 MAPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和beclin-1的蛋白水平均升高,p62蛋白表达降低(P<0.05)。与model组相比,心衰康各组与卡托普利组的LVEDD和LVESD降低,LVPWTd、LVPWTs和LVEF升高,CO、LVSP、LVDP、+dp/dtmax和-dp/dtmax升高(P<0.05);心肌细胞形态逐渐恢复正常,炎性细胞浸润减轻;细胞凋亡率降低,LC3-Ⅱ阳性率降低,p-ERK、p-p38 MAPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和beclin-1的蛋白水平均降低,p62蛋白表达升高(P<0.05)。结论:心衰康能够抑制心肌自噬,发挥心肌保护作用,其机制可能与抑制MAPK/ERK1/2通路有关。 展开更多
关键词 心衰康 慢性心力衰竭 自噬 mapk/erk1/2信号通路
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转化生长因子β1通过ERK/MAPK信号转导通路促进脑胶质瘤细胞侵袭 被引量:9
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作者 刘丽华 代勤 +1 位作者 闵志刚 张明 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1744-1747,共4页
目的探讨转化生长因子β1对脑胶质瘤细胞SF767细胞侵袭能力的影响以及可能的分子机制。方法转化生长因子β1分别干预脑胶质瘤细胞SF767细胞12、24、48 h,Western blotting检测EMT和ERK/MAPK通路相关蛋白表达情况,MTT法检测和对比干预前... 目的探讨转化生长因子β1对脑胶质瘤细胞SF767细胞侵袭能力的影响以及可能的分子机制。方法转化生长因子β1分别干预脑胶质瘤细胞SF767细胞12、24、48 h,Western blotting检测EMT和ERK/MAPK通路相关蛋白表达情况,MTT法检测和对比干预前后细胞增殖情况,体外侵袭实验观察细胞侵袭能力改变。结果 Western blotting显示E-cadherin表达下调,而Vimentin和MMP-2表达上调。在ERK/MAPK信号转导通路中,ERK表达未见变化,但P-ERK表达上调,核转录因子Zeb-1表达增强。体外增殖实验显示干预后细胞倍增时间明显缩短;体外侵袭实验显示干预后穿膜细胞明显增多,统计学显示有显著性差异(P<0.05)。结论转化生长因子β1可能通过ERK/MAPK信号转导通路诱导EMT促进脑胶质瘤细胞SF767细胞侵袭。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 上皮间质转化 erk mapk信号转导通路 脑胶质瘤 E-CADHERIN
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SDF-1通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路对人微血管内皮细胞功能产生影响 被引量:6
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作者 高静 朱红霞 +2 位作者 王敏哲 苟静 张丽 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1205-1210,共6页
目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:... 目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:体外培养HMEC-1,分别在培养基中加入不同浓度的SDF-1(0、25、50、100μg/L),Western blot检测HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路的活化情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。采用PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路抑制剂LY294002和U0126阻断HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,再以SDF-1处理HMEC-1,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况;划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。结果:Western blot结果显示,25μg/L的SDF-1处理即可显著活化HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,且随着SDF-1处理浓度的升高,PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路活化水平逐渐升高。同0μg/L的SDF-1处理组相比,25、50、100μg/L的SDF-1均可显著加强HMEC-1的增殖和迁移能力(P<0.01),并抑制HMEC-1的凋亡水平(P<0.01),且这种作用具有剂量依赖性。当采用LY294002和U0126阻断HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,SDF-1促HMEC-1增殖和迁移能力及抑制HMEC-1凋亡的能力均显著降低(P<0.01)。结论:SDF-1可通过活化PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,进而促进HMEC-1的增殖和迁移,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而在糖尿病血管病变中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 信号通路 糖尿病 人微血管内皮细胞 PI3K/AKT mapk/erk
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miR-4306通过MAPK/ERK信号通路抑制血管紧张素Ⅱ诱导的主动脉夹层的形成 被引量:7
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作者 赵永波 岳月红 +2 位作者 王彦芝 赵伟超 冯光兴 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期405-409,416,共6页
目的探讨miR-4306对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的主动脉血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及作用机制。方法将miR-4306mimic转染至人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),按照细胞处理方式分为miRNA-NC组、miRNA-NC+AngⅡ组、miRNA-mimics组和miR... 目的探讨miR-4306对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的主动脉血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及作用机制。方法将miR-4306mimic转染至人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),按照细胞处理方式分为miRNA-NC组、miRNA-NC+AngⅡ组、miRNA-mimics组和miRNA-mimics+AngⅡ组;利用CCK-8细胞增殖法检测AngⅡ对HA-VSMC细胞的最佳作用时间、浓度以及miR-4306对AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞增殖的影响,细胞划痕实验检测miR-4306对AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞迁移的影响,Western blot检测HA-VSMC细胞MMP-9、MAPK/ERK信号通路相关蛋白表达。结果 AngⅡ呈剂量和浓度依赖性的方式诱导HA-VSMC细胞增殖,组间和不同时间点之间差异具有统计学意义(均P<0.05)。miR-4306过表达可以抑制AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞增殖,与miRNA-NC+AngⅡ组比较,miRNA-mimics+AngⅡ组细胞增殖数量明显减少,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-4306过表达可以抑制AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞迁移,与miRNA-NC+AngⅡ组比较,miRNA-mimics+AngⅡ组细胞迁移距离增加,组间差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-4306过表达明显降低AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞MMP-9蛋白和p-ERK1/2蛋白表达,与miRNA-NC+AngⅡ组比较,miRNA-mimics+AngⅡ组MMP-9、p-ERK1/2蛋白表达明显降低,组间差异具有统计学意义(均P<0.01)。结论 miR-4306可能通过MAPK/ERK信号通路抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移功能。 展开更多
关键词 微小RNA 血管紧张素Ⅱ 主动脉夹层 mapk/erk信号通路
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ERK/MAPK信号通路与痛觉信息加工 被引量:10
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作者 曹红 张玉秋 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期370-373,共4页
疼痛是我们每个人都曾有过的一种体验,根据其功能可以分为生理性疼痛和病理性疼痛。生理性疼痛(有时我们也称之为"急性痛")是适应性的、瞬时的,对机体具有保护功能。正因为它的存在,机体受到伤害性刺激时才能迅速做出回应,从而免... 疼痛是我们每个人都曾有过的一种体验,根据其功能可以分为生理性疼痛和病理性疼痛。生理性疼痛(有时我们也称之为"急性痛")是适应性的、瞬时的,对机体具有保护功能。正因为它的存在,机体受到伤害性刺激时才能迅速做出回应,从而免受进一步的损伤,因此有时候我们也称之为“好痛”。 展开更多
关键词 mapk信号通路 信息加工 erk 病理性疼痛 生理性疼痛 痛觉 伤害性刺激 保护功能
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电针对慢性炎性疼痛大鼠Wnt/β-catenin以及ERK/MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 桑亚男 郭现辉 +3 位作者 董升 王权亮 张安东 闫瑞 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第11期4427-4434,共8页
目的 探究电针(EA)对慢性炎性疼痛大鼠Wnt/β-catenin信号通路和ERK/MAPK信号通路的调控作用。方法 通过完全弗氏佐剂建立慢性炎性疼痛大鼠(CFA)模型。实验分为4组:对照组(NS组)、模型组(CFA组)、模型组+电针组(CFA+EA组)和模型组+假电... 目的 探究电针(EA)对慢性炎性疼痛大鼠Wnt/β-catenin信号通路和ERK/MAPK信号通路的调控作用。方法 通过完全弗氏佐剂建立慢性炎性疼痛大鼠(CFA)模型。实验分为4组:对照组(NS组)、模型组(CFA组)、模型组+电针组(CFA+EA组)和模型组+假电针组(CFA+Sham EA组),每组6只大鼠。模型建立8天后进行EA治疗,每天1次,每次30 min。用Up-down法评价机械痛阈值,用丙酮刺激大鼠致炎足底观察冷刺激诱发痛的反应评分,用ELISA检测血清和左后足组织中前列腺素E2(Urinary prostaglandin E2,PGE2)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达水平,用Western blot检测左后足组织中Wnt家族成员1蛋白(Wnt family member 1,Wnt-1)、β连环蛋白(catenin beta1,β-catenin)和糖原合酶激酶-3(Glycogen synthase kinase-3 beta,GSK-3β)的表达水平以及cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)和细胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase,ERK)蛋白的磷酸化水平。结果 与CFA模型组相比,治疗后第5天及第7天,EA显著提高了CFA大鼠的机械痛阈值(P<0.05),并显著降低了CFA大鼠的冷刺激评分(P<0.05)。此外,EA显著降低了CFA大鼠血清和左后足组织中PGE2、IL-6、TNF-α、IL-1β和BDNF的表达水平和左后足组织中Wnt-1和β-catenin的蛋白表达水平以及CREB和ERK蛋白的磷酸化水平(均P<0.05),并显著升高了左后足组织中GSK-3β的蛋白表达水平(P<0.05)。结论 EA显著改善了大鼠慢性炎性疼痛,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路和ERK/MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 电针 WNT/Β-CATENIN信号通路 erk/mapk信号通路 慢性炎症 疼痛 完全弗氏佐剂
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重组人转化生长因子-β1对大鼠正畸牙移动模型成骨细胞分化及ERK/MAPK信号通路的影响 被引量:5
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作者 林维龙 吴晓沛 +1 位作者 何薇薇 安峰 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期118-123,共6页
目的:探讨重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对大鼠正畸牙移动模型细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及成骨细胞分化的影响。方法:将SD大鼠随机分为:对照组、模型组、rhTGF-β1低剂量组、rhTGF-β1中剂量组、r... 目的:探讨重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对大鼠正畸牙移动模型细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及成骨细胞分化的影响。方法:将SD大鼠随机分为:对照组、模型组、rhTGF-β1低剂量组、rhTGF-β1中剂量组、rhTGF-β1高剂量组。模型组、rhTGF-β1低、中、高剂量组建立大鼠正畸牙移动模型,各组从造模第1天开始给药,rhTGF-β1(低、中、高)剂量组于双侧上颌第一磨牙近中牙龈黏膜下分别注射1.25、2.5、5 ng/mL的rhTGF-β1溶液0.1 mL,对照组注射0.1 mL生理盐水,每2 d给药1次,持续14 d。游标卡尺测量大鼠上颌第一磨牙移动距离;苏木精-伊红染色观察大鼠牙周及牙槽骨组织病理形态;酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平;Western blot检测大鼠牙周及牙槽骨组织成骨相关蛋白[骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)]和ERK/MAPK通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠牙张力侧牙周组织膜纤维拉伸变长,组织间隙变宽,基质增生,成骨细胞数量大量减少近乎消失,呈现病理损伤,上颌第一磨牙移动距离、血清TNF-α、IL-6、RANKL、牙周及牙槽骨组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达水平明显升高,血清OPG、牙周及牙槽骨组织OCN、OPN、Runx2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,rhTGF-β1低、中、高剂量组大鼠牙张力侧牙周及牙槽骨组织病理损伤逐步减轻,血清TNF-α、IL-6、RANKL、牙周及牙槽骨组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达水平依次降低,上颌第一磨牙移动距离、血清OPG、牙周及牙槽骨组织OCN、OPN、Runx2蛋白表达水平依次升高(P<0.05),且各组之间呈剂量依赖性。结论:rhTGF-β1可减轻大鼠正畸牙移动模型炎症反应,促使成骨分化,加速正畸牙移动,可能与抑制ERK/MAPK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 重组人转化生长因子-β1 大鼠正畸牙移动模型 erk/mapk信号通路 成骨细胞分化
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参苓白术散通过ERK/p38 MAPK信号通路干预溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4的表达 被引量:62
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作者 李姿慧 王键 +2 位作者 蔡荣林 刘晓丽 蒋怀周 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1883-1888,共6页
目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型... 目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型组(氯化钠注射液)、参苓白术散组、U0126+参苓白术散组、SB203580+参苓白术散组。除正常组外,脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠,结合环境与饮食干预复制。14 d后采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测其mRNA表达情况。结果模型组大鼠AQP3、AQP4蛋白表达及其mRNA的表达水平明显低于正常组(P<0.05),参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组明显升高,组间比较有显著性差异(P<0.05),SB203580+参苓白术散组及U0126+参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组有较小幅度升高,与正常组和参苓白术散组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论参苓白术散可显著改善大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达,ERK/p38 MAPK信号通路参与了参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4表达的调节作用。 展开更多
关键词 参苓白术散 溃疡性结肠炎 细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(erk/p38 mapk) AQP3 AQP4 1 4-二氨基-2 3-二氰基-1 4-双(邻氨基苯巯基)丁二烯(U0126) 4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑(SB203580)
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锌指蛋白-36缺陷抑制小鼠的成骨细胞分化:基于激活ERK/ MAPK通路 被引量:1
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作者 戎圣炜 李宏芳 +4 位作者 魏怡然 冯子航 甘露 邓仲豪 赵亮 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期697-705,共9页
目的探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制。方法通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化。通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的... 目的探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制。方法通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化。通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的细胞,观察成骨分化作用的改变。通过第二代转录组测序技术探究Zfp36缺陷细胞成骨分化过程中的转录组水平改变。通过ERK/MAPK信号抑制分子U0126验证Zfp36缺陷对成骨分化作用的调控机制。结果小鼠原代骨髓间充质细胞以及MC3T3-E2细胞中Zfp36表达在成骨分化0~14d过程中呈逐渐升高趋势,在第7天到达峰值时较第0天升高3.85倍(P<0.0001)。抑制上述细胞Zfp36的表达后,成骨分化过程中碱性磷酸酶染色及茜素红染色弱于对照组,成骨分化标志基因Alpl(P<0.01)、Sp7(P<0.001)、Bglap(P<0.01)、Ibsp(P<0.0001)表达显著减弱。转录本测序结果提示Zfp36缺陷细胞的下调基因富集到骨矿化相关基因集中,且与ERK信号相关。蛋白表达检测显示Zfp36缺陷细胞的磷酸化ERK蛋白比例较对照组升高2.1倍(P=0.0274)。通过分子化合物U0126抑制Zfp36缺陷细胞中被激活的ERK/MAPK信号,可观察到表型挽救现象,并且呈剂量依赖。Zfp36缺陷细胞在10μmol/L度U0126作用下碱性磷酸酶染色增强,成骨细胞分化标志基因Runx2(P<0.05)及Bglap(P<0.05)表达显著增高。结论ZFP36参与了小鼠成骨细胞的分化调控过程,Zfp36缺陷会引起ERK/MAPK信号通路的激活,进而抑制成骨细胞向骨细胞的分化。 展开更多
关键词 锌指蛋白-36 成骨细胞分化 erk/mapk信号通路 骨髓间充质干细胞
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蛇床子素对髓核致神经根炎性痛大鼠ERK/MAPK信号通路及COX-2mRNA表达的影响 被引量:22
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作者 吴海璇 冯璐璐 +5 位作者 徐辉 贺秋兰 李梅娜 魏明 孙来保 邹学农 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1096-1101,共6页
目的观察硬膜外腔给予蛇床子素对髓核致神经根炎性痛大鼠的镇痛作用,及对脊髓背角ERK/MAPK信号通路和COX-2 mRNA表达的影响。方法成年♂SD大鼠125只,随机分为5组,每组25只,分别为Blank组、Sham组、手术模型组(NP组)、蛇床子素组(Ost组)... 目的观察硬膜外腔给予蛇床子素对髓核致神经根炎性痛大鼠的镇痛作用,及对脊髓背角ERK/MAPK信号通路和COX-2 mRNA表达的影响。方法成年♂SD大鼠125只,随机分为5组,每组25只,分别为Blank组、Sham组、手术模型组(NP组)、蛇床子素组(Ost组)、溶剂对照组(Vehicle组),其中Ost组于术后d 6于硬膜外腔给予50μl蛇床子素1 mg/rat,Vehicle组给予相同体积的溶剂。各组大鼠分别于术前1 d,术后3、6、7、10、14、21 d测定机械痛阈值(50%MWT),在术后14 d测定机械痛阈后每组随机取15只大鼠,取术侧腰段脊髓背角,Western blot法和荧光定量PCR法检测ERK、pERK和COX-2 mRNA的表达。结果与Blank组相比,Sham组仅在术后d 1 50%MWT降低,差异有统计学意义(P<0.05),后逐渐恢复至术前水平,pERK和COX-2 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);而NP组、Vehicle组和Ost组术后50%MWT值明显降低(P<0.05),pERK和COX-2 mRNA的表达明显上调(P<0.05)。硬膜外腔给药后,与Vehicle组相比,Ost组50%MWT明显升高(P<0.05),给药后d 8 pERK和COX-2 mRNA的表达明显下调(P<0.05)。各组间ERK的表达差异无统计学意义(P>0.05)。对pERK1、pERK2和COX-2 mRNA的表达进行相关性分析,Spearman秩相关系数为0.878(P<0.01)和0.910(P<0.01),表明pERK和COX-2 mRNA的表达呈正相关(P<0.05)。结论术后早期应用蛇床子素对髓核导致的神经根炎性痛具有明显的镇痛效应,其机制可能是通过抑制脊髓背角pERK的活化,从而下调COX-2 mRNA的表达。 展开更多
关键词 蛇床子素 erk mapk信号通路 COX-2 神经根炎 性痛 髓核 脊髓背角
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人参二醇组皂苷对再生障碍性贫血小鼠造血组织MAPK/ERK信号通路的诱导作用 被引量:23
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作者 张爱萍 高瑞兰 +4 位作者 尹利明 罗梅宏 成志 夏乐敏 郑智茵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期686-692,共7页
目的:观察人参二醇组皂苷(PDS)对免疫介导型再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓细胞MAPK/ERK信号通路蛋白激酶及脾脏调节性T细胞的诱导作用,探讨其治疗再障的作用机制。方法:用[60Co]-γ射线5.0 Gy全身照射BALB/c小鼠,后经尾静脉输入DBA/... 目的:观察人参二醇组皂苷(PDS)对免疫介导型再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓细胞MAPK/ERK信号通路蛋白激酶及脾脏调节性T细胞的诱导作用,探讨其治疗再障的作用机制。方法:用[60Co]-γ射线5.0 Gy全身照射BALB/c小鼠,后经尾静脉输入DBA/2小鼠的淋巴细胞悬液,制备免疫介导型再障小鼠模型。60只小鼠随机分为6组,即正常组,模型组,PDS低、中、高剂量组,环孢素组。不同浓度药物灌胃治疗14 d测定各组小鼠外周血象,观察骨髓病理切片,Western blot法及免疫组织化学法测定骨髓细胞MEK1/2、p-MEK1/2、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白水平,流式细胞术检测脾脏调节性T细胞比例。结果:再障小鼠外周血全血细胞减少,骨髓呈抑制状态;PDS治疗能够显著升高再障小鼠外周血象,增加脾脏调节性T细胞比例,呈剂量依赖性(P<0.05)。PDS中、高剂量组显著上调骨髓细胞MEK1/2、p-MEK1/2、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白水平(P<0.05)。结论:PDS能有效促进造血,上调再障模型小鼠骨髓细胞MAPK/ERK信号通路多种蛋白激酶的表达,可能是PDS促进骨髓造血功能恢复的作用机制之一。另外,PDS对再障模型小鼠的免疫功能有一定的调节作用。 展开更多
关键词 人参二醇组皂苷 再生障碍性贫血 mapk/erk信号通路
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