白藜芦醇通过激活去乙酰化酶1/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶信号通路影响牛脂肪细胞凋亡 被引量：6

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作者 成海建 游伟 +7 位作者 靳青 刘倚帆 万发春 宋恩亮 刘桂芬 谭秀文 张相伦 刘晓牧 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期4398-4407,共10页

本试验旨在研究植物提取物白藜芦醇(RES)对牛皮下脂肪细胞凋亡率以及去乙酰化酶1(SIRT1)/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路关键因子的mRNA和蛋白质表达量的影响。选取18月龄鲁西黄牛的皮下前体脂肪细胞,在细胞分化的第0天,更换为... 本试验旨在研究植物提取物白藜芦醇(RES)对牛皮下脂肪细胞凋亡率以及去乙酰化酶1(SIRT1)/腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路关键因子的mRNA和蛋白质表达量的影响。选取18月龄鲁西黄牛的皮下前体脂肪细胞,在细胞分化的第0天,更换为RES浓度分别为0(对照)、100、200和400μmol/L的培养液处理48 h,每组设3个重复。应用Hoechst33342染色检测细胞凋亡的形态学变化,流式细胞分析仪检测细胞凋亡率,荧光定量PCR(q PCR)和免疫印迹试验(Western-blot)分别检测SIRT1/AMPK信号通路上的关键因子SIRT1、A MPKα、叉头转录因子1(Fox O1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA和蛋白质表达量,并利用油红O染色鉴定脂肪细胞。结果表明,与对照组相比:不同浓度RES处理后的牛皮下脂肪细胞凋亡率均极显著增高(P<0.01);不同浓度RES处理后的SIRT1、AMPKα、caspase-3、Bax的mRNA表达量均显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P<0.01);不同浓度RES处理后的SIRT1、AMPKα、caspase-3的蛋白质表达量均显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);200和400μmol/L RES处理后,Fox O1的mRNA和蛋白质表达量显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),Bax的蛋白质表达量极显著提高(P<0.01),Bcl-2的蛋白质表达量极显著降低(P<0.01)。100μmol/L RES处理后时,Fox O1的mRNA和蛋白质表达量以及Bcl-2、Bax的蛋白质表达量均与对照组差异不显著(P>0.05)。由此可见,RES通过激活SIRT1/AM PK信号通路,同时激活通路下游的Fox O1,促进了牛皮下脂肪细胞的凋亡,为通过营养调控技术降低牛皮下脂肪沉积提供了一定的理论基础。 展开更多

关键词 去乙酰化酶1 腺苷-磷酸激活的蛋白激酶 叉头转录因子1 白藜芦醇 牛 脂肪细胞 凋亡

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环磷酸鸟苷/蛋白激酶G信号通路的激活与再灌注损伤挽救激酶信号通路的关系 被引量：5

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作者 潘国焰 林荣 +3 位作者 吴兵 洪美满 陈乘波 黄雪娥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1438-1444,共7页

目的:观察脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)激活环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G,cGMP/PKG)信号通路的心肌保护作用是否与细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1... 目的:观察脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)激活环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G,cGMP/PKG)信号通路的心肌保护作用是否与细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1/2,ERK1/2)、磷酸酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)蛋白激酶的激活有关。方法:将84只新西兰兔随机分为7组(n=12):假手术组;对照组;BNP组;BNP+LY294002组(LY294002为PI3K抑制剂);LY294002组;BNP+PD98059组(PD98059为ERK1/2抑制剂);PD98059组。除了假手术组只开胸不结扎冠状动脉外,其余6组均于结扎左回旋支45 min后恢复左回旋支血流,进行再灌注180 min。全程观察血流动力学及心电变化;实验终末,各组随机抽取6只兔子心脏做左室梗死面积测定,采用伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积;每组另外6只兔子心脏取梗死边缘区组织,Western blot方法测定PAkt/Akt、P-ERK1/2/ERK1/2的表达。结果:心率(heart rate,HR)和平均动脉压(mean arterial blood pressure,MABP)在基线水平上无明显差异(P>0.05)。与基线水平相比,HR和MABP在缺血以及再灌注时期有明显下降(P<0.05),而在再灌注时期维持较稳定的水平。各组之间HR、MABP差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,BNP组心律失常发生率明显减少(P<0.003 125)。与BNP组比较,BNP+LY294002组、LY294002组、BNP+PD98059组及PD98059组心律失常明显增加(P<0.003 125),BNP+LY294002组和LY294002组,BNP+PD98059组和PD98059组差异无统计学意义(P>0.003 125);假手术组无心肌梗死。与对照组比较,BNP组心肌梗死范围明显减少(P<0.05)。与BNP组比较,BNP+LY294002组、LY294002组、BNP+PD98059组及PD98059组梗死面积明显增加(P<0.05)。BNP+LY294002组和LY294002组,BNP+PD98059组和PD98059组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,BNP组Akt、ERK1/2的磷酸化水平明显增加(P<0.05)。与BNP组相比,BNP+LY294002组Akt的磷酸化水平及BNP+PD98059组ERK1/2的磷酸化水平分别明显降低(P<0.05)。BNP+LY294002组和LY294002组Akt的磷酸化水平,BNP+PD98059组和PD98059组ERK1/2的磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BNP激活cGMP/PKG信号通路,对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,且该通路的激活与再灌注损伤挽救激酶通路的激活有关。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注损伤 环磷酸鸟苷 蛋白激酶G信号通路 再灌注损伤挽救激酶信号通路 磷酸酰肌醇-3-激酶 蛋白激 酶B 细胞外调节蛋白激酶1 2

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Compound C抑制腺苷酸活化蛋白激酶的磷酸化后对缺氧预处理的影响及其机制 被引量：3

3

作者 李娜 贺涓涓 +3 位作者 汪倩 周敏 李超英 李玲 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期168-174,共7页

【目的】探讨Compound C抑制腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化后对缺氧预处理的影响。【方法】筛选合适的Compound C浓度。将细胞分为Compound C组和non-Compound C组,以上两组再各自分为3个亚组:对照组(control);缺氧预处理+缺氧组(Hy... 【目的】探讨Compound C抑制腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化后对缺氧预处理的影响。【方法】筛选合适的Compound C浓度。将细胞分为Compound C组和non-Compound C组,以上两组再各自分为3个亚组:对照组(control);缺氧预处理+缺氧组(Hyp+OGD);单纯缺氧组(OGD);噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞活性。ATP荧光检测试剂盒测定胞内的ATP水平。Western Blot法测定各组细胞内AMPKα,磷酸化的AMPKα(P-AMPKα),过氧化物酶体增生激活受体-γ共刺激因子-1α(PGC-1α)的蛋白表达水平。【结果】OGD后Compound C组(0.418±0.021)和non-Compound C组(0.640±0.028)相比,细胞活性下降更明显(P<0.01),经预处理后细胞活性均增加(P均<0.05),加入Compound C后,control组细胞活性下降3.5%(P=0.473),OGD组细胞活性下降34.6%(P<0.01),而缺氧预处理后细胞活性下降21.1%(P<0.05)。OGD后Compound C组(0.042±0.001)和non-Compound C组(0.051±0.001)相比,ATP下降更明显(P<0.05),经预处理后ATP水平分别增加了21.5%及28.0%(P均<0.05)。Compound C 3组AMPKα蛋白的表达与non-Compound C对应的3组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。OGD后,Compound C组与non-Compound C组细胞P-AMPKα蛋白的表达均明显增加(与各自的对照组比较,P均<0.05)。经预处理后,non-Compound C组P-AMPKα蛋白的表达较单纯OGD组增加(P<0.05),但Compound C组P-AMPKα蛋白的表达与单纯OGD组间的差异无统计学意义(P=0.935)。Compound C组细胞PGC-1α蛋白的表达与non-Compound C组对应的3组比较明显下降(P均<0.05),其中control组下降了68.1%,Hyp+OGD组下降了24.7%,OGD组下降了39.6%,Hyp+OGD及OGD相对于各自control组均上调其表达(P均<0.05),且预处理组的上调更明显(与OGD组比较,P均<0.05)。【结论】Compound C抑制AMPK的激活后,PGC-1α的表达下调,AMPK为缺氧预处理或缺氧处理上调PGC-1α的其中一条途径,抑制其活体P-AMPKα后其他的途径仍然在缺氧预处理中发挥重要的细胞保护作用。 展开更多

关键词 腺苷酸活化蛋白激酶 过氧化物酶体增生激活受体-γ共刺激因子-1α 缺氧预处理 COMPOUND C

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蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1

4

作者 李菁 金玉 +3 位作者 李启阳 许英卓 刘超 肖建英 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期680-684,690,共6页

目的探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。方法使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和... 目的探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。方法使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和组织芯片技术检测WEE1蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达水平。对免疫组织化学结果中染色的比例以及染色程度进行半定量分析,对半定量分析结果与胃癌临床指标进行相关性分析。使用RT-PCR和Western blotting检测WEE1在胃癌和癌旁组织中的mRNA和蛋白表达水平。结果WEE1在100例胃癌患者中的阳性率为86%,高表达86例,低表达14例。通过Oncomine数据库分析,蛋白激酶WEE1在胃腺癌中的表达明显高于胃黏膜组织中的表达(P<0.01)。免疫组化、RT-PCR和Western blotting均显示,WEE1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);免疫组化还显示WEE1的表达量随着胃癌组织分期的增加而增加(P<0.01)。结论蛋白激酶WEE1在胃癌组织中高表达,提示其可作为胃癌治疗靶点之一。 展开更多

关键词 蛋白激酶WEE1 胃癌 免疫组织化学 组织芯片 免疫印迹 逆转录-聚合酶链反应

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男性不育患者精浆对氧磷酶-1活性测定的临床价值 被引量：4

5

作者 龚道元 李子萍 +3 位作者 庄锡伟 张晓林 康梅 廖异平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1355-1357,1361,共4页

目的探讨精浆对氧磷酶-1(PON-1)活性在男性不育症患者中的变化及在男性不育症诊断中的临床价值。方法选择有生育力的男性健康对照组50例,男性不育症组270例,采用分光光度法和计算机辅助精液分析系统分别测定精浆PON-1活性和精液常规参... 目的探讨精浆对氧磷酶-1(PON-1)活性在男性不育症患者中的变化及在男性不育症诊断中的临床价值。方法选择有生育力的男性健康对照组50例,男性不育症组270例,采用分光光度法和计算机辅助精液分析系统分别测定精浆PON-1活性和精液常规参数。结果参数正常男性不育组和参数异常男性不育组精浆PON-1活性(U/L)分别为1.22±0.76和0.64±0.54,均明显低于健康对照组精浆PON-1活性为(3.17±0.89),差异有显著统计学意义(P<0.01);男性不育各精子活力组精浆PON-1活性均明显低于健康对照组(P<0.01);在各弱精子症组中,随着精子活力降低,精浆PON-1活性依次降低;在轻度弱精子症组、中度弱精子症组和重度弱精子症组,组间差异有统计学意义(P<0.05);精浆PON-1活性与精子存活率间存在正相关关系(P<0.01),而精浆PON-1活性与精子畸形率存在负相关关系(P<0.01);根据制定的ROC曲线,PON-1活性曲线下面积为0.907,有显著统计学意义(P<0.01)。结论精浆PON-1活性测定为男性不育症实验室诊断提供参考依据。 展开更多

关键词 男性不育 精浆 对氧磷酶-1活性 临床价值

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阻塞性睡眠呼吸暂停患者血清对氧磷酶-1活性变化的研究 被引量：2

6

作者 邬勇坚 陈绍森 +1 位作者 陈飞鹏 曹梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期1744-1746,共3页

目的:检测阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者血清对氧磷酶-1(PON1)活性的变化,探讨OSAS患者并发心血管疾病的可能机制。方法:选取经多导睡眠仪监测诊断的80例OSAS患者,分为轻度组(n=22)、中度组(n=23)、重度组(n=35)。选取20例健康者... 目的:检测阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者血清对氧磷酶-1(PON1)活性的变化,探讨OSAS患者并发心血管疾病的可能机制。方法:选取经多导睡眠仪监测诊断的80例OSAS患者,分为轻度组(n=22)、中度组(n=23)、重度组(n=35)。选取20例健康者为正常对照组。检测各组间血脂水平及PON1活性并进行相关性分析。结果:轻、中及重度OSAS组血清PON1活性均低于正常对照组(P<0.05)。不同程度的OSAS患者组间PON1活性差异有显著性(P<0.05),且PON1活性随OSAS程度加重而降低。20例重度OSAS患者经3个月经鼻持续气道正压通气(nCPAP)治疗后TG下降(P<0.05),HDL升高(P<0.05),血清PON1活性较前升高(P<0.01)。结论:OSAS患者血清PON1活性明显降低,可能是OSAS患者易患心血管疾病的原因之一。nCPAP治疗可能有助于降低OSAS患者并发心血管疾病的危险性。 展开更多

关键词 睡眠呼吸暂停 阻塞性 心血管疾病 对氧磷酶-1

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胰岛素样生长因子-1对β-淀粉样前体蛋白裂解酶1的影响 被引量：1

7

作者 谭家泽 宦小芳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期979-983,共5页

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对人类神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme1,BACE1)的影响以及可能的细胞信号机制。方法:用不... 目的:探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对人类神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme1,BACE1)的影响以及可能的细胞信号机制。方法:用不同剂量IGF-1(20、40 ng/ml和80 ng/ml)作用于人类神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 24 h,荧光定量PCR及Western blot检测BACE-1mRNA及蛋白水平;Western blot检测淀粉样前体蛋白、C99、C83及磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(phosphoinositide3-kinase/serine threonine kinase,PI3-K/Akt)通路相关蛋白的水平;ELISA检测细胞培养液中β-淀粉样蛋白42(β-amyloid peptide,Aβ42)的水平,然后选择最佳剂量的IGF-1(80 ng/ml)作用于人类神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,在此之前30 min加入PI3-K抑制剂LY294002(25μmol/L及50μmol/L),重复上述检测。结果:IGF-1降低BACE-1、C99及Aβ42的水平(P=0.000),提高C83的表达(P=0.000),增加Akt的磷酸化(P=0.000),而LY294002具有抑制IGF-1的上述作用。结论:IGF-1降低BACE-1mRNA及蛋白的水平,其机制可能涉及PI3-K/Akt信号通路。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 β-淀粉样前体蛋白裂解酶1 磷脂酰肌醇-3激酶 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶

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运动对大鼠骨骼肌CaMKⅡ磷酸化水平及核内PGC-1、HDAC5蛋白含量的影响

8

作者 张红学 郭海峰 马延超 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2012年第3期270-274,共5页

目的:研究运动后不同时间大鼠骨骼肌CaMKⅡ磷酸化水平及核内PGC-1、HDAC5蛋白含量的变化,以探讨运动后PGC-1α基因表达时相性变化的调节机制。方法:9周龄的雄性Wistar大鼠(167±4)g 48只,随机分成安静对照组(C)和跑台运动后0 h、3 h... 目的:研究运动后不同时间大鼠骨骼肌CaMKⅡ磷酸化水平及核内PGC-1、HDAC5蛋白含量的变化,以探讨运动后PGC-1α基因表达时相性变化的调节机制。方法:9周龄的雄性Wistar大鼠(167±4)g 48只,随机分成安静对照组(C)和跑台运动后0 h、3 h、6 h、12 h、24 h取材组,共6组,每组8只。大鼠进行0坡度的1 h跑台运动,跑台速度34 m/min。Western blot法测定蛋白含量及磷酸化水平,RT-PCR法测定基因表达。结果:PGC-1αmRNA含量,运动后即刻变化不显著,运动后3 h、6 h显著增加,12 h虽仍高于对照组,但与6 h相比显著降低,24 h恢复至安静水平。核内PGC-1α蛋白含量运动后各取材点均无显著变化。核内HDAC5蛋白含量则在运动后3 h、6 h下降显著,12 h虽仍低于对照组,但与6h相比显著增加,24 h恢复到安静组水平。CaMKⅡ磷酸化水平,运动后0 h,3 h显著升高,6 h虽仍高于对照组,但与3 h相比显著降低,12 h恢复至安静水平。结论:运动后PGC-1α基因表达的时相性变化可能是由对应时相变化规律的CaMKⅡ通过调节核内HDAC5含量,解除了转录因子对PGC-1α基因转录的抑制而实现。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增生物受体γ共激活因子-1α 钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ 组蛋白脱乙酰基酶5

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对氧磷酶-1在糖尿病眼部并发症中的作用研究进展

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作者 禹倩倩 姚勇 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第9期897-900,共4页

对氧磷酶(paraoxonase,PON)是第一个定义为对抗有机磷中毒、从而避免有机磷对中枢神经系统损伤的酶,也因此而得名。但该酶最重要的生物学特性是抗氧化性,与许多疾病的发生发展有关,包括糖尿病、心血管疾病等。近年来关于PON生物学特性与... 对氧磷酶(paraoxonase,PON)是第一个定义为对抗有机磷中毒、从而避免有机磷对中枢神经系统损伤的酶,也因此而得名。但该酶最重要的生物学特性是抗氧化性,与许多疾病的发生发展有关,包括糖尿病、心血管疾病等。近年来关于PON生物学特性与PON在糖尿病发病机制中的作用倍受关注。本文对PON-1的生物学特性及其在糖尿病眼部并发症(糖尿病视网膜病变和糖尿病性白内障)中的活性以及作用作一综述。未来有关PON-1分子机制的深入研究有望成为防治糖尿病视网膜病变和糖尿病性白内障的新靶标。 展开更多

关键词 对氧磷酶-1 糖尿病 糖尿病视网膜病变 糖尿病性白内障

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纯化兔血清对氧磷酶1与传统方法对敌敌畏所致大鼠肝脏损伤的疗效比较 被引量：3

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作者 王聪 陶维晨 +3 位作者 李琦 吴泽扬 郭镇豪 赵敏 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期582-586,共5页

目的探讨纯化兔血清对氧磷酶1(PON1)对敌敌畏中毒大鼠肝损伤的疗效是否优于传统方法。方法将30只雄性SD大鼠随机分为5组:空白对照组(A组)、敌敌畏染毒组(B组)、传统治疗组(C组)、PON1治疗组(D组)、联合治疗组(E组),每组6只。B、C、D、E... 目的探讨纯化兔血清对氧磷酶1(PON1)对敌敌畏中毒大鼠肝损伤的疗效是否优于传统方法。方法将30只雄性SD大鼠随机分为5组:空白对照组(A组)、敌敌畏染毒组(B组)、传统治疗组(C组)、PON1治疗组(D组)、联合治疗组(E组),每组6只。B、C、D、E组均给予敌敌畏(9 mg/kg)腹腔注射染毒,C组在染毒后立即(<2 min)给予阿托品(10 mg/kg)+碘解磷定(45mg/kg)腹腔注射,D组在染毒前30 min给予PON1 9 600 U/kg尾静脉注射,E组染毒前30 min给予PON1 9 600 U/kg尾静脉注射,染毒后立即(<2 min)给予阿托品(10 mg/kg)+碘解磷定(45 mg/kg)腹腔注射,A组给予等量的生理盐水对照。各组于造模前(0min)、造模后10 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h分别颈内动脉取血,运用ELISA方法检测血清乙酰胆碱酯酶活性。各组分别于造模后12 h取肝脏组织,HE染色观察不同组肝脏的病理改变,运用免疫组化及Western blotting检测不同组肝脏4-羟基壬烯醛(4-HNE)的定性及定量表达。结果 B组胆碱酯酶明显下降,光镜下出现肝细胞严重脂肪变、核固缩等病理改变,可见4-HNE高度表达;C、D、E组上述各指标改变均较B组轻,且各组与B组之间均存在统计学差异(P<0.05);D、E组病理改变较C组轻,上述指标与C组之间均有统计学差异(P<0.05);E组较D组病理改变稍轻,上述指标无统计学差异(P>0.05)。结论 PON1对急性敌敌畏中毒大鼠肝损伤发挥保护作用,且效果优于传统治疗。 展开更多

关键词 对氧磷酶1 敌敌畏中毒 肝损伤 氧化应激 4-羟基壬烯醛

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AMPK、p38 MAPK信号通路参与调控电刺激诱导骨骼肌细胞PGC-1α基因表达 被引量：5

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作者 张媛 张念云 丁树哲 《西安体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2018年第1期88-95,共8页

目的采用急性电刺激(acute electrical stimulation)C2C12成熟肌管细胞模型,结合使用相关信号激酶通路特异性抑制剂,探究急性电刺激所诱发的细胞内信号激酶对PGC-1α基因表达的调控作用。旨在从细胞水平揭示肌肉收缩刺激调控PGC-1α基... 目的采用急性电刺激(acute electrical stimulation)C2C12成熟肌管细胞模型,结合使用相关信号激酶通路特异性抑制剂,探究急性电刺激所诱发的细胞内信号激酶对PGC-1α基因表达的调控作用。旨在从细胞水平揭示肌肉收缩刺激调控PGC-1α基因表达的分子机制。方法体外培养小鼠成肌细胞系C2C12细胞,采用脂质体法分别转染含小鼠PGC-1α启动子DNA全序列的质粒(p2533)及装载有能够与PGC-1α全长基因序列相结合GAL4DNA结合区域的p Bind载体,细胞在转染后分化5-6 d形成成熟肌管,5 Hz,10 V强度急性电刺激2 h后即刻收集各组细胞,进行总蛋白或双荧光素酶检测。抑制剂处理组分别采用40μM Compound C(CC,AMPK抑制剂)与10μM BIRB796(BIRB,p38抑制剂)处理细胞。结果与对照组(CON)相比,电刺激组(STIM)细胞PGC-1α启动子活性显著增高52%(P<0.05),PGC-1α辅激活转录活性显著增高35%(P<0.05),同时伴随PGC-1α蛋白由细胞质向细胞核迁移的现象。此外,与CON组相比,STIM组细胞AMPK、p38信号激酶通路磷酸化水平显著上调(P<0.05),在分别采用AMPK、p38抑制剂处理后,其磷酸化水平显著受到抑制(P<0.01)。结论急性电刺激可诱导骨骼肌细胞PGC-1α转录水平以及翻译后蛋白水平活性上调,这一作用部分是通过AMPK或p38信号通路实现的。 展开更多

关键词 C2C12细胞 电刺激 过氧化物酶体增殖活化受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α) 腺苷酸活化蛋白激酶 (AMPK) p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mapK)

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血浆对氧磷酶1在奶牛酮病中的变化及其预测作用 被引量：2

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作者 曹宇 张江 +4 位作者 杨威 夏成 张洪友 王艳辉 徐闯 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期38-39,42,共3页

为了早期预测奶牛酮病的发生,随机选取黑龙江某集约化牛场,产后14～21 d奶牛为试验动物。通过对氧磷酶1（PON1）、葡萄糖（GLU）、游离脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHBA）和谷草转氨酶（AST）的检测,阐明奶牛围产期PON1在奶牛酮病发生... 为了早期预测奶牛酮病的发生,随机选取黑龙江某集约化牛场,产后14～21 d奶牛为试验动物。通过对氧磷酶1（PON1）、葡萄糖（GLU）、游离脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHBA）和谷草转氨酶（AST）的检测,阐明奶牛围产期PON1在奶牛酮病发生风险的预警作用。结果表明,酮病组较对照组奶牛血浆中PON1活性和含量显著下降。PON1含量、活性与GLU、BHBA、NEFA和AST均有显著相关性。根据受试者工作特征曲线（ROC）分析确定酮病预测值为血浆PON1含量〉46.79 nmol/L、GLU〉3.04 mmol/L、AST〈100 U/L、NEFA〉0.82 mmol/L。试验表明,PON1、GLU、AST和NEFA均可用作预测奶牛酮病发生风险的评估指标。 展开更多

关键词 奶牛 酮病 对氧磷酶-1 相关分析 ROC分析

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1-MCP结合MAP处理对豇豆保鲜效果的影响 被引量：5

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作者 史君彦 高丽朴 +4 位作者 王清 范林林 吕佳煜 夏春丽 左进华 《湖北农业科学》 2016年第20期5332-5335,共4页

以豇豆(Vigna unguiculata)为试材,探究1-甲基环丙烯(1-MCP)结合自发气调包装(MAP,CO2高渗透膜)处理的保鲜效果。结果表明,在15℃下贮藏,1-MCP结合CO2高渗透膜MAP处理和CO2高渗透膜MAP处理,对豇豆失重率变化无显著影响,但均可有效抑制... 以豇豆(Vigna unguiculata)为试材,探究1-甲基环丙烯(1-MCP)结合自发气调包装(MAP,CO2高渗透膜)处理的保鲜效果。结果表明,在15℃下贮藏,1-MCP结合CO2高渗透膜MAP处理和CO2高渗透膜MAP处理,对豇豆失重率变化无显著影响,但均可有效抑制可溶性固形物(TSS)含量的增加,延缓维生素C和可溶性蛋白质含量的降低,抑制丙二醛(MDA)含量的升高,维持细胞膜的完整性,同时抑制过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的升高,延缓了活性氧自由基的损伤和酶促褐变反应对豇豆品质的影响。其中,1-MCP结合MAP处理对豇豆保鲜效果较佳。 展开更多

关键词 豇豆(Vigna unguiculata) 1-甲基环丙烯(1-MCP) 自发气调包装(map) CO2高渗透膜 过氧化物酶(POD)

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对氧磷酶1 192Q/R基因多态性及酶活性与脑梗死的相关性研究 被引量：4

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作者 陈蕾 周玉颖 王辉 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期594-597,共4页

目的探讨对氧磷酶1(paraoxonase1,PON1)192Q/R基因多态性及酶活性在脑梗死发生中的作用。方法将104例脑梗死患者为脑梗死组,并按年龄分为老年脑梗死组(41例)和中青年脑梗死组(63例)2个亚组,同期选择门诊体检的非脑血管疾病患者104例为... 目的探讨对氧磷酶1(paraoxonase1,PON1)192Q/R基因多态性及酶活性在脑梗死发生中的作用。方法将104例脑梗死患者为脑梗死组,并按年龄分为老年脑梗死组(41例)和中青年脑梗死组(63例)2个亚组,同期选择门诊体检的非脑血管疾病患者104例为对照组,并按年龄分为老年对照组(41例)和中青年对照组(63例)2个亚组。入选者按年龄?性别相匹配对分为老年组和中青年组。测定2组PON1 192Q/R基因多态性及酶活性。结果脑梗死组患者PON1酶活性均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。老年脑梗死组患者PON1 192 Q/R基因型的分布与老年对照组比较差异无统计学意义(P=0.353)。中青年脑梗死组RR基因型(34例)高于中青年对照组(16例),QQ基因型(3例)低于中青年对照组(9例,P=0.003)。老年组(r=-0.290,P=0.008)和中青年组(r=-0.354,P<0.001)PON1 R基因型与酶活性均呈负相关。老年组(OR=0.823,P<0.001)和中青年组(OR=0.835,P<0.001)PON1酶活性升高,脑梗死发生风险降低。结论PON1 192Q/R基因型可影响PON1酶活性。高PON1酶活性可降低脑梗死的风险,而PON1 192Q/R基因型对脑梗死的发生无影响。 展开更多

关键词 脑梗塞 基因表达 动脉硬化 对氧磷酶-1

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心脏X综合征患者血清对氧磷酶1活性变化及阿托伐他汀的干预作用 被引量：1

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作者 阳跃忠 孟照娜 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第22期4076-4078,共3页

目的:探讨血清对氧磷酶-1(PON-1)活性水平的变化在心脏X综合征(CSX)发病机制中的作用及阿托伐他汀对其的影响。方法:选取健康体检者30例为对照组,CSX患者64例,非心脏X综合征(NCSX)组患者32例:(1)观察各组血清PON-1活性;(2)64例CSX患者... 目的:探讨血清对氧磷酶-1(PON-1)活性水平的变化在心脏X综合征(CSX)发病机制中的作用及阿托伐他汀对其的影响。方法:选取健康体检者30例为对照组,CSX患者64例,非心脏X综合征(NCSX)组患者32例:(1)观察各组血清PON-1活性;(2)64例CSX患者随机分为对照组(n=32,常规治疗)和治疗组(n=32,在常规治疗基础上加用阿托伐他汀20 mg睡前),观察两组治疗前后血清PON-1活性。结果:CSX患者血清PON-1活性明显低于健康对照组和NCSX组(均P<0.01)。CSX组中治疗组治疗后血清PON-1活性明显高于CSX组中对照组治疗后(p<0.01)。结论:PON-1活性降低与CSX的发生有一定关系,阿托伐他汀可升高CSX患者血清PON-1活性。 展开更多

关键词 心绞痛 心脏X综合征 对氧磷酶-1

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外源性硫化氢对嗜铬细胞瘤细胞β位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达的影响

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作者 代政伟 张华 +3 位作者 孟涛 晏宁 李洁颖 晏勇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期626-630,共5页

目的观察外源性硫化氢(H2S)对嗜铬细胞瘤细胞(PC12)β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)表达的影响,并探讨可能涉及的细胞信号机制。方法用不同浓度的硫氢化钠(NaHS)处理体外培养的PC12细胞,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1mRN... 目的观察外源性硫化氢(H2S)对嗜铬细胞瘤细胞(PC12)β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)表达的影响,并探讨可能涉及的细胞信号机制。方法用不同浓度的硫氢化钠(NaHS)处理体外培养的PC12细胞,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1mRNA及蛋白表达;继以LY294002和PD98059分别阻断磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3-K/Ak)t及丝裂酶原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶1/2(MAPK/ERK1/2)通路,Western blot法检测其对NaHS诱导的通路下游蛋白Akt1和ERK1/2磷酸化的影响及其对BACE1蛋白表达变化的调节;ELISA法检测细胞培养液中Aβ42水平的变化。结果 NaHS在实验浓度范围内呈剂量依赖性下调BACE1mRNA及蛋白表达,200μmol/L时最明显,各NaHS组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);LY294002抑制NaHS诱导的Akt1蛋白磷酸化,削弱NaHS对BACE1蛋白的下调作用,其表达在LY294002预处理组与NaHS200μmol/L组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);而PD98059虽能抑制NaHS导致的ERK1/2蛋白磷酸化,但对其调节BACE1蛋白表达无影响,PD98059预处理组与NaHS200μmol/L组相比,差异无统计学意义(P>0.05);不同处理条件下的Aβ42表达与BACE1变化趋势基本一致。结论外源性H2S下调PC12细胞BACE1表达,其机制可能与PI3-K/Akt信号通路的激活有关,而与MAPK/ERK1/2通路无关。 展开更多

关键词 外源性硫化氢 β位淀粉样前体蛋白裂解酶1 磷脂酰肌醇3-激酶 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 细胞外信号调节激酶1/2

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高密度脂蛋白-内皮型一氧化氮合酶信号通路在心血管系统中的作用及其影响因素的研究进展 被引量：12

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作者 张鑫利 王敏 +1 位作者 罗光华 张晓膺 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2293-2298,共6页

大量的流行病学研究表明,高密度脂蛋白（highdensity lipoprotein,HDL）水平与心血管疾病的患病风险呈负相关,但是HDL在机体内行使保护功能的详细机制尚不清楚^（[1]）。除了HDL介导的胆固醇逆向转运外,HDL还具有其它多重功能,如抗炎、... 大量的流行病学研究表明,高密度脂蛋白（highdensity lipoprotein,HDL）水平与心血管疾病的患病风险呈负相关,但是HDL在机体内行使保护功能的详细机制尚不清楚^（[1]）。除了HDL介导的胆固醇逆向转运外,HDL还具有其它多重功能,如抗炎、促进一氧化氮（nitric oxide,NO）合成和促进内皮修复的作用。 展开更多

关键词 高密度脂蛋白 载脂蛋白 1-磷酸鞘氨醇 内皮型一氧化氮合酶 对氧磷酶1

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PI3K-Akt-eNOS信号通路在三磷酸腺苷后处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用 被引量：22

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作者 高妮妮 王芳 廉哲勋 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2014年第1期59-63,共5页

目的:探讨磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号通路在三磷酸腺苷(ATP)后处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:建立兔心肌缺血再灌注模型,随机将动物分为4组:即缺血再灌注组(对照组)、ATP后处理... 目的:探讨磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号通路在三磷酸腺苷(ATP)后处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:建立兔心肌缺血再灌注模型,随机将动物分为4组:即缺血再灌注组(对照组)、ATP后处理组、磷酯酰肌醇-3激酶抑制剂(Wortmannin)+ATP后处理组(Wortmannin+ATP组)、线粒体ATP依赖性钾通道抑制剂5-羟葵酸(5-HD)+ATP后处理组(5-HD+ATP组)。再灌注结束后,苏木素伊红染色法观察心肌病理组织变化、TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化方法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达、Bcl-2/Bax比值及磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达。结果 :ATP后处理组心肌细胞核变小及细胞间质水肿程度较对照组明显减轻,Wortmannin+ATP组和5-HD+ATP组心肌细胞核大小及细胞间质水肿程度与对照组相似;ATP后处理组与对照组比较,心肌细胞凋亡指数明显减低,抗凋亡因子Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义(P<0.01);Wortmannin+ATP组和5-HD+ATP组心肌细胞凋亡指数、Bcl-2/Bax比值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);p-eNOS蛋白阳性表达ATP后处理组较对照组和Wortmannin+ATP组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),与5-HD+ATP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 :ATP后处理可能通过激活PI3K-Akt-eNOS信号通路最终作用于线粒体ATP依赖性钾通道,减少细胞凋亡,减轻兔缺血再灌注损伤。 展开更多

关键词 三磷酸腺苷 心肌缺血再灌注损伤 磷酯酰肌醇-3激酶 蛋白激酶B 内皮型一氧化氮合酶

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人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用 被引量：11

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作者 吴胜斌 王应灯 《世界中医药》 CAS 2018年第8期2010-2014,共5页

目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂... 目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂诱导的细胞活力降低,再使用FBG提取物和人参皂苷20(S)-Rg3依赖剂量后明显恢复。用FBG提取物或人参皂苷20(S)-Rg3处理后会降低顺铂诱导升高与磷酸化c-Jun N-末端激酶(JNK),p53和裂解的半胱天冬酶-3升高的蛋白。通过用FBG和人参皂苷20(S)-Rg3的共同处理,由于顺铂的诱导导致凋亡LLC-PK1细胞升高的百分比显著降低。结论:人参皂苷20(s)-Rg3可改善LLC-PK1的细胞毒性,人参皂苷20(S)-RG3可能是通过阻断JNK-P53-caspase-3信号级联反应来介导这种作用的重要组成部分。 展开更多

关键词 顺铂 人参皂苷20(S)-Rg3 llc-pk1细胞 c-Jun N-末端激酶 肾毒性 发酵黑参 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶 磷酸脱氢酶 甘油醛-3-磷酸脱氢酶

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p38MAPK对大鼠肾小球系膜细胞表达PPAR-γ的影响 被引量：5

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作者 魏倩萍 邓华聪 赵劼 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期1659-1662,共4页

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activatedproteinkinase,p38MAPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptors-γ,PPAR-γ)的关系,从而研究p38MAPK和PPAR-γ在糖尿病肾病中的作用机制。方... 目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activatedproteinkinase,p38MAPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptors-γ,PPAR-γ)的关系,从而研究p38MAPK和PPAR-γ在糖尿病肾病中的作用机制。方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物孵育大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1;先分别以p38MAPK特异抑制剂SB203580预处理细胞系HBZY-1,再给予上述4种因素孵育细胞系HBZY-1,观察细胞系HBZY-1p38MAPK和PPAR-γ的表达。结果高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物均可独立激活p38MAPK,使其磷酸化表达量增加,PPAR-γ表达明显减少;SB203580预处理后,PPAR-γ表达显著增加。结论在大鼠肾小球系膜细胞,p38MAPK对PPAR-γ具有拮抗作用,表明PPAR-γ的激活可能具有直接的肾脏保护作用。 展开更多

关键词 P38丝裂原活化蛋白激酶 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1

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