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克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库的建立及应用 被引量:14
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作者 赵贵明 刘洋 +3 位作者 陈颖 杨海荣 赵勇胜 王娉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期105-110,共6页
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立了克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库,用于该菌属内种和亚种的高通量鉴定及菌株分型。在优化... 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立了克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库,用于该菌属内种和亚种的高通量鉴定及菌株分型。在优化培养条件、样品处理方法及确定MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱采集参数的基础上,将采集的8种参考菌株蛋白质质谱数据通过Biotyper软件构建克罗诺杆菌的MALDI-TOF-MS数据库,再用相近肠杆菌及该属分离株验证数据库的准确性。结果表明:应用建立的克罗诺杆菌的MALDI-TOF-MS数据库对135株克罗诺杆菌分离株进行分析,鉴定分值均不小于2.0,达到了种水平鉴定要求,通过聚类分析,可进一步分型。构建的MALDI-TOF-MS数据库为克罗诺杆菌高通量鉴定与分型提供了一种新的手段。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌 maldi-tof-ms 数据库 鉴定 分型
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沙门氏菌MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱分析方法的研究 被引量:22
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作者 陈秀金 尹红红 +1 位作者 匡华 胥传来 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1189-1197,共9页
以沙门氏菌标准菌株(Salmonella enterica DSM 17058 T)为研究对象,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行蛋白质指纹图谱分析,进而得到正确的鉴定结果。为了获得重现性良好的质谱图,对沙门氏菌的最佳培养基、最适... 以沙门氏菌标准菌株(Salmonella enterica DSM 17058 T)为研究对象,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行蛋白质指纹图谱分析,进而得到正确的鉴定结果。为了获得重现性良好的质谱图,对沙门氏菌的最佳培养基、最适培养时间以及样品前处理方法进行了优化,从而确立沙门氏菌MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱标准分析方法。结果表明:乙醇/甲酸处理法所得图谱中的特征峰多,包含更多的蛋白标志物,所得图谱基线平滑,噪音少,信噪比高,是最佳的样品处理方法。以营养丰富的哥伦比亚琼脂为培养基,在24 h时即可达到强峰值信号,质谱图重现性良好,鉴定结果准确,并且相比于其它3种培养基所需培养时间短。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 沙门氏菌 鉴定 影响因素
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单增李斯特氏菌MALDI-TOF-MS鉴定与分型研究 被引量:20
3
作者 王耀 曹际娟 +5 位作者 赵昕 郑秋月 王刚 田卓 史媛媛 曹远银 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期194-198,共5页
为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。... 为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。采用单增李斯特氏菌标准菌株进行验证,表明鉴定结果的可信度很高。在数据库信息的基础上,对37株单增李斯特氏菌分离株进行聚类分型。分型结果表明,在蛋白质水平上,MALDI-TOF-MS可把37株单增李斯特氏菌分成9个型别。 展开更多
关键词 单增李斯特氏菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 鉴定 分型
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MALDI-TOF-MS鉴定布鲁氏菌方法建立和评价 被引量:15
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作者 汤旭 肖迪 +5 位作者 张慧芳 陈经雕 毛玲玲 崔步云 张建中 姜海 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期772-778,共7页
目的为了快速、准确、便捷的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究拟建立鉴定布鲁氏菌属的MALDI-TOF-MS方法,利用现场分离菌株对该方法进行特异性和敏感性评价。方法收集布鲁氏菌标准菌株和地方流行株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质... 目的为了快速、准确、便捷的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究拟建立鉴定布鲁氏菌属的MALDI-TOF-MS方法,利用现场分离菌株对该方法进行特异性和敏感性评价。方法收集布鲁氏菌标准菌株和地方流行株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立布鲁氏菌鉴定数据库。并用39株布鲁氏菌菌株,对建立的数据库进行验证。结果经数据库鉴定,39株布鲁氏菌菌株与数据库中布鲁氏菌的匹配分数全部大于2.300,均报告为布鲁氏菌,表明鉴定结果的可信度很高。聚类分型结果表明,在蛋白质水平,MALDI-TOF-MS将测试的布鲁氏菌分成3大类。结论MALDI-TOF-MS对布鲁氏菌进行鉴定,具有快速、准确、灵敏等优点,可以实现对布鲁氏菌属的准确鉴定,对布鲁氏菌病的临床诊断具有较高的使用价值。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 maldi-tof-ms 鉴定
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兔肝金属硫蛋白亚型异构体的高效液相色谱分离与ESI-MS,MALDI-TOF-MS鉴定 被引量:8
5
作者 赵锐 纪建国 +2 位作者 袁洪生 管华诗 茹炳根 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期1086-1090,共5页
由于金属硫蛋白 (MT)基因的多态性 ,决定不同亚型的 MT异构体的存在 ,MT亚型异构体的结构是MT功能研究的基础 .通过离子交换柱可将 MT分成 MT-1和 MT-2两个异构体 ,用不同条件的反相高效液相色谱 (RP-HPLC)可将 MT-1和 MT-2分成不同的... 由于金属硫蛋白 (MT)基因的多态性 ,决定不同亚型的 MT异构体的存在 ,MT亚型异构体的结构是MT功能研究的基础 .通过离子交换柱可将 MT分成 MT-1和 MT-2两个异构体 ,用不同条件的反相高效液相色谱 (RP-HPLC)可将 MT-1和 MT-2分成不同的亚型异构体 ,并利用 MALDI-TOF MS和 LC-ESI-MS对比确定了它们的分子量 .结果表明 ,兔肝 MT在不同的 p H条件下分离得到不同分子量的亚型异构体 .在酸性条件下 ,MT-1可分为 2个主要亚型异构体 ,分子量分别为 61 49.0和 62 44.5 ,而 MT-2主要分为 3个亚型异构体 ,分子量分别为 61 49.0 ,62 44.0和 61 2 7.0 . MT-1和 MT-2有 2个亚型异构体分子量相同的异构体存在 .在酸性条件下 ,MT-1的 2个异构体及 MT-2分子量为 61 2 7的亚型异构体可稳定存在 . 展开更多
关键词 高效液相色谱 分离 鉴定 金属硫蛋白 亚型异构体 电喷雾离子化质谱 基质辅助激光解析飞行时间质谱
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基于MALDI-TOF-MS的脂质组学研究——鲫鱼受镉暴露的潜在生物标志物 被引量:7
6
作者 李国琛 王颜红 +1 位作者 吴仁安 王世成 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期269-273,共5页
以含镉(Cd)500μg/L水体中养殖0,10,20 d的3组鲫鱼为研究对象,测定鱼肉中Cd含量,借助HPLC与MALDI-TOF-MS离线联用技术得到鱼肉磷脂图谱,并采用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)针对图谱数据开展模式识别分析.结果表明,在20 d暴露期内,鱼肉... 以含镉(Cd)500μg/L水体中养殖0,10,20 d的3组鲫鱼为研究对象,测定鱼肉中Cd含量,借助HPLC与MALDI-TOF-MS离线联用技术得到鱼肉磷脂图谱,并采用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)针对图谱数据开展模式识别分析.结果表明,在20 d暴露期内,鱼肉中Cd含量呈持续上升趋势,而磷脂酰胆碱(PC)含量在暴露10 d后显著低于正常水平(未受镉暴露)(p<0.05),暴露20 d后基本恢复到正常水平.PLS-DA分析实现了3组样本的组间判别,说明磷脂指纹图谱能更好的反映外源Cd对鲫鱼的代谢影响.PC可以作为指示水体Cd对鲫鱼毒害作用的生物标志物.HPLC与MALDI-TOF-MS离线联用技术不仅能定量分析鱼肉中PC总量,也分离纯化了PC组分,从而使MALDI-TOF-MS成功用于复杂鱼肉样品的磷脂分析,适用于脂质组学研究. 展开更多
关键词 磷脂 生物标志物 脂质组学 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱
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MALDI-TOF-MS在病原微生物鉴定中的研究进展 被引量:29
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作者 陈信忠 龚艳清 郭书林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期43-48,共6页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是鉴定多种致病性细菌的快速、可靠的方法,具有较好的稳定性和可重复性,在快速和准确性方面的总体表现明显好于传统的细菌生化鉴定方法。适合于一些致病菌的快速、高通量的检测和鉴定。... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是鉴定多种致病性细菌的快速、可靠的方法,具有较好的稳定性和可重复性,在快速和准确性方面的总体表现明显好于传统的细菌生化鉴定方法。适合于一些致病菌的快速、高通量的检测和鉴定。综述MALDI-TOF-MS技术在普通病原菌、多血清型病原菌、非发酵性细菌,以及植物病原菌等病原微生物鉴定方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 微生物 鉴定 进展
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MALDI-TOF-MS鉴定生物脱氮细菌的方法研究 被引量:4
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作者 徐昕荣 朱斌 +2 位作者 马瑜璐 向弘 陈丽凤 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期148-150,161,共4页
采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对生物脱氮废水处理系统中分离得到的两株细菌进行蛋白质质量指纹图谱分析。对供试细菌,比较样品处理方法和基质选择对细菌蛋白质质量指纹图谱的影响,获得优化的实验条件,并对方法... 采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对生物脱氮废水处理系统中分离得到的两株细菌进行蛋白质质量指纹图谱分析。对供试细菌,比较样品处理方法和基质选择对细菌蛋白质质量指纹图谱的影响,获得优化的实验条件,并对方法的重现性进行了研究。建立了一种快速的细菌蛋白质质量指纹图谱鉴定方法。结果显示:该方法灵敏度高,且分析过程简单快速,具有广泛的开发和应用意义。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离质谱 蛋白质质量指纹图谱 细菌 鉴定
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基于2D-DIGE/MALDI-TOF-MS技术筛选奶牛低血钙症生物标志物 被引量:3
9
作者 舒适 夏成 +5 位作者 张洪友 许楚楚 李昌盛 肖鑫焕 王刚 白云龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1238-1245,共8页
奶牛乳热(MF)是一种严重的营养代谢性疾病,通常被分为临床型及亚临床型低血钙症(SH)。奶牛乳热的诊断通常是应用奶牛血浆中的钙浓度进行判定的,但是在奶牛乳热整个发生发展的过程中,发病的具体机制仍是研究的盲点。在本试验中通过筛选... 奶牛乳热(MF)是一种严重的营养代谢性疾病,通常被分为临床型及亚临床型低血钙症(SH)。奶牛乳热的诊断通常是应用奶牛血浆中的钙浓度进行判定的,但是在奶牛乳热整个发生发展的过程中,发病的具体机制仍是研究的盲点。在本试验中通过筛选奶牛乳热、亚临床低血钙症及健康奶牛间生物标志物进而解释可能的发生机制。选取27头奶牛作为实验动物,并根据其血浆钙浓度及有无临床症状分为乳热组(MF组)、亚临床低血钙组(SH组)和正常组(C组)。在组内每3个样品混合成为1个混合样本应用于2D-DIGE试验。结果得到110个差异蛋白质点,选取其中80个点进行MALDI-TOF-MS质谱分析,得到66个阳性结果并整合成为16种蛋白质。根据试验结果,选取A2M、HP和PON1进行Western blotting验证试验。本试验首次证实A2M、HP和PON1是奶牛乳热症3种新的生物标志物,并分析了其在乳热症发生过程中的可能作用机制。 展开更多
关键词 奶牛 乳热 亚临床低血钙症 2D-DIGE/maldi-tof-ms WESTERN blottin
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基于MALDI-TOF-MS质谱技术对蜂蜜中芽孢杆菌的鉴定与分型 被引量:9
10
作者 宗凯 周莉质 +4 位作者 李云飞 陈雪娇 孙娟娟 郑海松 余晓峰 《安徽农业科学》 CAS 2016年第8期107-109,共3页
[目的]对分离自不同产地和品种的蜂蜜中的芽孢杆菌属进行鉴定分型,探索利用蜂蜜中芽孢杆菌特征指纹图谱对蜂蜜产地和品种进行溯源的可行性。[方法]从44种不同产地和品种蜂蜜中分离出44株芽孢杆菌,3株铜绿假单胞菌。采用基质辅助激光解析... [目的]对分离自不同产地和品种的蜂蜜中的芽孢杆菌属进行鉴定分型,探索利用蜂蜜中芽孢杆菌特征指纹图谱对蜂蜜产地和品种进行溯源的可行性。[方法]从44种不同产地和品种蜂蜜中分离出44株芽孢杆菌,3株铜绿假单胞菌。采用基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)条件对分离的芽孢杆菌进行鉴定分型和聚类分析。[结果]44株芽孢杆菌中鉴定出蜡样芽孢杆菌(B.cereus)31株,短小芽孢杆菌(B.pumilus)5株,枯草芽孢杆菌(B.subtilis)3株,地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)2株,炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)1株,土壤短芽孢杆菌(Brevibacillus agri.)2株。通过多次重复试验,表明从同一份样品或同一品牌蜂蜜样品中能稳定分离到芽孢杆菌,获得的蛋白指纹图谱具有极好的稳定性。[结论]MALDI-TOF-MS可根据获得的芽孢杆菌蛋白指纹图谱将芽孢杆菌划分为不同类型,可作为一种新的根据蜂蜜中芽孢杆菌的特征指纹图谱进行溯源的方法。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析-电脑飞行时间质谱 芽孢杆菌 鉴定分析
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MALDI-TOF-MS检测宫颈浸润癌血清中蛋白质谱的变化 被引量:3
11
作者 刘红彦 乔玉环 +3 位作者 荆建红 赵晓丽 王琳 范晓玲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期694-696,706,共4页
目的:建立宫颈癌的蛋白质组指纹诊断模型,筛选宫颈癌相关蛋白,为建立宫颈癌肿瘤标志物提供理论基础。方法:采用弱阳离子交换磁珠、基质辅助激光解析附电离飞行时间质谱(MB-WCX、MALDI-TOF-MS)技术对37例宫颈浸润癌(宫颈癌组)及50例健康... 目的:建立宫颈癌的蛋白质组指纹诊断模型,筛选宫颈癌相关蛋白,为建立宫颈癌肿瘤标志物提供理论基础。方法:采用弱阳离子交换磁珠、基质辅助激光解析附电离飞行时间质谱(MB-WCX、MALDI-TOF-MS)技术对37例宫颈浸润癌(宫颈癌组)及50例健康人(对照组)的血清进行蛋白质组的对比研究。结果:宫颈癌组和对照组中共有21种蛋白质质峰谱强度差异有统计学意义(P<0.05),以M1450.35Da,M1778.7Da,M1896.65Da,M5520.42Da的4种蛋白质作为分类变量建立分类预测模型并对宫颈癌和对照组进行分类诊断,其识别率和预测能力分别为90.45%和81.75%;宫颈癌不同病理分化程度蛋白质组对比发现共有2种蛋白质质峰强度差异有统计学意义(P<0.05),以M5904.14Da,M5264.26Da的2种蛋白质作为分类变量建立分类模型并对不同分化程度进行分类诊断,其识别率和预测能力分别为81.48%和78.89%。结论:利用MALDI-TOF-MS技术筛选出来的具有分类意义的蛋白质,有可能成为宫颈癌诊断及预后判断的一组生物学指标,为宫颈癌肿瘤标志物提供重要线索。 展开更多
关键词 宫颈癌 蛋白质组学 基质辅助激光解析附电离飞行时间质谱 肿瘤标志物
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大豆巯基肽的共价色谱法制备及其MALDI-TOF-MS分析 被引量:2
12
作者 丁秀臻 孔祥珍 +2 位作者 陈业明 张彩猛 华欲飞 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期31-36,共6页
建立了一种从复杂的大豆球蛋白酶解物中提取巯基肽的高选择性方法。首先,对大豆球蛋白酶解物中的二硫键用1,4-二硫苏糖醇进行还原,对还原剂的用量进行了考察和优化,提高了酶解物中的巯基肽含量。然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共价色谱... 建立了一种从复杂的大豆球蛋白酶解物中提取巯基肽的高选择性方法。首先,对大豆球蛋白酶解物中的二硫键用1,4-二硫苏糖醇进行还原,对还原剂的用量进行了考察和优化,提高了酶解物中的巯基肽含量。然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共价色谱制备还原酶解物中的巯基肽,对共价色谱的吸附、解吸条件进行了考察和优化。研究表明:二硫键还原最佳1,4-二硫苏糖醇用量为20 mmol/L,还原之后酶解物中的巯基含量从1.8μmol/g提高到了113.8μmol/g。共价色谱的最佳条件为还原酶解物的上样量为酶解物中巯基含量占凝胶活性位点的80%,键合时间30 min;解吸时1,4-二硫苏糖醇浓度20 mmol/L,解吸时间20 min。此外,C18柱可以有效地将巯基肽中的1,4-二硫苏糖醇和2-巯基吡啶去除。MALDI-TOF-MS分析表明制备的巯基肽中可检测到45个肽段,其中36个肽段含有巯基,表明Thiolpropyl-Sepharose 6B共价色谱对巯基肽有很高的选择性。 展开更多
关键词 大豆球蛋白酶解物 巯基肽 还原 Thiolpropyl—Sepharose 6B maldi—TOF—MS
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MALDI-TOF-MS用于微生物鉴定的影响因素分析 被引量:6
13
作者 徐淑菲 孔繁德 +1 位作者 林双庆 蔡绍鑫 《中国动物检疫》 CAS 2019年第2期88-96,共9页
影响MALDI-TOF-MS微生物鉴定的因素有很多。本研究主要从微生物培养基、培养状态、菌体前处理、上样量等方面进行MALDI-TOF-MS操作技术和方法的探讨。研究结果显示:进行MALDI-TOF-MS细菌鉴定,培养时间在4~24 h之间为佳;尽量选择无色、... 影响MALDI-TOF-MS微生物鉴定的因素有很多。本研究主要从微生物培养基、培养状态、菌体前处理、上样量等方面进行MALDI-TOF-MS操作技术和方法的探讨。研究结果显示:进行MALDI-TOF-MS细菌鉴定,培养时间在4~24 h之间为佳;尽量选择无色、不含盐的液体培养基;0.1μL菌液是最低鉴定菌量;上样量对结果无影响;对于菌体前处理,除按照标准化前处理程序操作外,也可将菌体加dd H2O制成混悬液进行点靶鉴定,这样更加简便。本研究有助于减少MALDI-TOF-MS操作盲目性,提高鉴定质量,利于操作的规范化和简便化。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 微生物鉴定 影响因素
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HPLC和MALDI-TOF-MS法分析重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度和肽图谱 被引量:3
14
作者 高锦 王艳丽 魏群 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期114-119,共6页
用反相高效液相色谱 (RP HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基 (rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定 ,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性 ,对其进行质量控制 .并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)法进行验证 .结... 用反相高效液相色谱 (RP HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基 (rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定 ,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性 ,对其进行质量控制 .并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)法进行验证 .结果表明 ,运用梯度洗脱RP HPLC法能对样品进行纯度检查和肽图谱分析 ,测得 3批样品纯度均达到 98%以上 ,肽图谱能达到批间一致 .同时用MALDI TOF MS法测定 ,纯度结果二者相符 ,质谱肽图经计算机辅助分析 ,确证rhCNB一级结构与天然CNB一致 .证明该方法灵敏、准确、可靠 . 展开更多
关键词 重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB) 高效液相色谱法 基质辅肋激光解吸电离飞行时间质谱法 纯度 肽图谱
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HPLC结合MALDI-TOF-MS分析木聚糖水解产物 被引量:2
15
作者 黎海龙 李成国 +4 位作者 秦光辉 刘健 甘礼惠 谢茹胜 龙敏南 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期10-14,共5页
利用HPLC结合MALDI-TOF-MS对1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后山毛榉木聚糖水解产物进行分析,检测到了难以获得标准品对照的木聚糖水解产物。结果表明,稀硫酸水解山毛榉木聚糖的主要水解产物有木糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木糖(B2)... 利用HPLC结合MALDI-TOF-MS对1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后山毛榉木聚糖水解产物进行分析,检测到了难以获得标准品对照的木聚糖水解产物。结果表明,稀硫酸水解山毛榉木聚糖的主要水解产物有木糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木糖(B2),以及少量4-O-甲基葡萄糖醛酸(B1)。内切重组木聚糖酶An Xyn10C水解山毛榉木聚糖产生木糖、木二糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木三糖(B3),而内切重组木聚糖酶Ho Xyn11A水解山毛榉木聚糖主要产生木糖、木二糖、木三糖、4-O-甲基葡萄糖醛酸-木四糖(B4)和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木五糖(B5)。基于PMP柱前衍生化的HPLC结合MALDI-TOF-MS方法能高效地分析复杂的木聚糖水解产物。 展开更多
关键词 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮 低聚木糖 4-O-甲基葡萄糖醛酸 maldi-tof-ms HPLC
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MALDI-TOF-MS在爱德华氏菌检测中的应用 被引量:4
16
作者 龚艳清 郭书林 +2 位作者 陈信忠 杨俊萍 叶妍妍 《中国动物检疫》 CAS 2014年第6期89-93,共5页
为建立快速检测和鉴定鱼类常见的爱德华氏菌的方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对来自淡水鱼的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)进行检测和鉴定。为测试该方法的重复性和稳... 为建立快速检测和鉴定鱼类常见的爱德华氏菌的方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对来自淡水鱼的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)进行检测和鉴定。为测试该方法的重复性和稳定性,采用营养肉汤、BHI琼脂、DHL和TSA等4种不同培养基,以及用肉汤分别培养24 h、36 h、48 h和72 h的菌株进行检测,结果表明对该菌的蛋白质谱图影响很小;冷冻保存2年的菌株,用MALDI-TOF-MS进行检测,鉴定分值变化很小。对分离自不同水生动物的迟缓爱德华氏菌菌株进行检测,均可得到准确的结果。表明MALDI-TOF-MS技术可以快速、准确地检测和鉴定这两种爱德华氏菌。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 迟缓爱德华氏菌 鮰爱德华氏菌 检测 鉴定
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吸附于膜上的蛋白质的MALDI-TOF-MS直接分析 被引量:1
17
作者 魏开华 杨松成 +3 位作者 钱小红 蔡耘 王杰 王京兰 《质谱学报》 EI CAS CSCD 1999年第2期37-42,共6页
直接将细胞色素C吸附在硝酸纤维素(NC)膜上,进行了基质辅助激光解吸电离- 飞行时间- 质谱(MALDI-TOF-MS)分析。质量准确度和重现性没有明显的降低,检测极限可达lpm ol。扫描电镜结果表明,本文所用NC膜... 直接将细胞色素C吸附在硝酸纤维素(NC)膜上,进行了基质辅助激光解吸电离- 飞行时间- 质谱(MALDI-TOF-MS)分析。质量准确度和重现性没有明显的降低,检测极限可达lpm ol。扫描电镜结果表明,本文所用NC膜具有孔径均匀、孔深适宜的特点,允许蛋白质和基质在膜上形成良好的“包裹型”或“包围型” 展开更多
关键词 maldi TOF 质谱 蛋白质 测定 分子量
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应用MALDI-TOF-MS法筛选儿童急性淋巴细胞白血病潜在标记物 被引量:1
18
作者 王叨 吕艳琦 +2 位作者 刘玉峰 苏淑芳 李白 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1365-1369,共5页
本研究旨在分析儿童急性淋巴细胞白血病(c-ALL)的肿瘤特异性蛋白,寻找新的肿瘤蛋白分子标志物。应用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)及联网检索数据库,鉴定表达上调的差异蛋白,并应用细胞免疫... 本研究旨在分析儿童急性淋巴细胞白血病(c-ALL)的肿瘤特异性蛋白,寻找新的肿瘤蛋白分子标志物。应用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)及联网检索数据库,鉴定表达上调的差异蛋白,并应用细胞免疫组织化学法验证相关蛋白。结果表明,获得了4个表达上调的蛋白点,经质谱分析初步鉴定出其中2个表达上调的差异蛋白为谷胱甘肽S转移酶P和阻殖蛋白;细胞免疫组织化学法检测发现,二者在儿童ALL细胞内的表达阳性率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:谷胱甘肽S转移酶P和阻殖蛋白有望成为儿童ALL新的诊断标志物和药物靶点。 展开更多
关键词 儿童急性淋巴细胞白血病 蛋白质组学 双向凝胶电泳 maldi-tof-ms质谱仪
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MALDI-TOF-MS研究糖蛋白核糖核酸酶B的一级结构 被引量:1
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作者 蔡耘 王京兰 +1 位作者 邱丰和 钱小红 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2000年第1期24-28,共5页
本文应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱 ( MALDI- TOF- MS)测定了糖蛋白核糖核酸酶 B的平均分子量及其糖基化程度。结合蛋白酶及内切糖苷酶酶切的方法 ,确证了核糖核酸酶 B的糖基化位点及糖苷键类型 ,测定值与理论值相符。为糖蛋... 本文应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱 ( MALDI- TOF- MS)测定了糖蛋白核糖核酸酶 B的平均分子量及其糖基化程度。结合蛋白酶及内切糖苷酶酶切的方法 ,确证了核糖核酸酶 B的糖基化位点及糖苷键类型 ,测定值与理论值相符。为糖蛋白一级结构的直接质谱分析建立子快速、准确的方法。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 核糖核酸酶B 糖蛋白 一级结构
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MALDI-TOF-MS法测定芍药苷-人血清白蛋白复合物的半抗原数 被引量:10
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作者 徐金森 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期54-56,共3页
为建立中药活性成分的抗体测定技术平台,将中药活性成分芍药苷与人血清白蛋白偶联成完全抗原(半抗原-蛋白质复合物),并利用基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱(MALD I-TOF-MS)技术测定了上述人工抗原的基本质谱特征,求得了芍药苷-人血... 为建立中药活性成分的抗体测定技术平台,将中药活性成分芍药苷与人血清白蛋白偶联成完全抗原(半抗原-蛋白质复合物),并利用基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱(MALD I-TOF-MS)技术测定了上述人工抗原的基本质谱特征,求得了芍药苷-人血清白蛋白复合物的半抗原数(hapten number)为12.试验结果表明,利用MALD I-TOF-MS方法测定人工合成的半抗原-蛋白质复合物的质谱特征等,具有所需样品量少、结果准确和迅速可靠等优点,为药用植物活性成分的抗体技术研究提供了科学方法和试验依据,对于判断人工抗原的质量具有科学意义. 展开更多
关键词 芍药苷 半抗原-蛋白质复合物 maldi-tof-ms 半抗原数
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