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基于MALDI-TOF MS肽指纹图谱技术的中药鹿血晶掺伪鉴别研究
1
作者 王慎兴 曹玲 +6 位作者 黄青 马聪玉 潘建斌 赵浩东 施海蔚 狄斌 陈洪渊 《质谱学报》 北大核心 2025年第1期115-122,共8页
本研究应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,构建了具有物种特异性的白蛋白和血红蛋白特征肽指纹图谱,用于中药鹿血晶的掺伪鉴别。以鹿血晶真品(梅花鹿、马鹿)和常见掺伪品(猪、牛、羊、驴)共6个物种的血晶制品作... 本研究应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,构建了具有物种特异性的白蛋白和血红蛋白特征肽指纹图谱,用于中药鹿血晶的掺伪鉴别。以鹿血晶真品(梅花鹿、马鹿)和常见掺伪品(猪、牛、羊、驴)共6个物种的血晶制品作为研究对象,通过理论肽段预测并结合高分辨质谱,筛选出1组能够反映物种差异的特征肽段。采集不同物种来源血晶制品以及不同来源市售中药鹿血晶的特征肽指纹图谱,并结合化学计量学分析,实现了不同来源血晶制品的快速准确区分。该方法能够实现复杂基质样品中目标特征肽段的灵敏、特异检测,具有高专属性、快速、便捷的优势,为鹿血晶及血晶类中药制品的掺伪鉴别提供了准确的分析手段,也为其他复杂蛋白类制品的快速鉴别提供了有价值的参考。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(maldi-TOF MS) 中药鹿血晶 肽指纹图谱 掺伪鉴别
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MALDI-TOF MS技术在动物疫病检测中的应用研究进展
2
作者 蔡成杰 孟鸽 +10 位作者 封莹杰 单玉平 王莹 尚佳静 王阳 王宏艳 于晓慧 蒋文明 刘华雷 范春艳 李阳 《中国动物检疫》 2025年第1期58-66,共9页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种基于特征蛋白(如微生物核糖体)指纹的高丰度和稳定表达的快速鉴定技术,作为一种病原微生物检测鉴别的新兴方法,具有简单、快速、低成本、高通量等优势,已被广泛应用于临床医学检... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种基于特征蛋白(如微生物核糖体)指纹的高丰度和稳定表达的快速鉴定技术,作为一种病原微生物检测鉴别的新兴方法,具有简单、快速、低成本、高通量等优势,已被广泛应用于临床医学检测、遗传分型、耐药性检测、食品微生物检测中,但其在动物疫病检测领域仍处于发展阶段。本文主要对MALDI-TOF MS的原理及其在病毒性、细菌性、真菌性和寄生虫性动物疫病检测方面的应用进行综述,旨在为MALDI-TOF MS技术在该领域的深入应用提供参考。 展开更多
关键词 maldi-TOF MS 动物疫病检测 应用研究
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基于MALDI-MS和UHPLC-MS/MS的微量活细胞系蛋白质快速分析 被引量：1
3
作者 闫凌 《质谱学报》 北大核心 2025年第2期133-139,I0001,共8页
本研究结合基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS)和超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)技术,系统地探索了功能化微型酶反应器在微量活细胞系蛋白质组快速分析中的应用,并对其分析效能进行全面评估。通过将功能化酶纳反应器封装于枪头... 本研究结合基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS)和超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)技术,系统地探索了功能化微型酶反应器在微量活细胞系蛋白质组快速分析中的应用,并对其分析效能进行全面评估。通过将功能化酶纳反应器封装于枪头内,结合盐酸胍和双酶系统(胰酶与DNase I),实现了细胞裂解、蛋白质提取和酶解的一体化操作,显著提高了蛋白质提取和酶解效率。结果表明,该方法在处理微量细胞样品(1×10^(4)个细胞)时,蛋白质提取效率显著优于传统的过滤器辅助样品前处理(FASP)流程。活细胞样品在酶纳反应器中的反应时间仅需6 min,整个分析流程不超过1 h,展示了功能化酶纳反应器在高通量在线前处理方面的巨大潜力。本研究不仅为微量活细胞系蛋白质组的快速高通量分析提供了技术平台,还通过MALDI-MS与UHPLC-MS/MS整合策略实现了微量蛋白质组学前处理方法的全面评估与应用。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离质谱(maldi-MS) 超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS) 功能化微型酶反应器 蛋白质组学 微量活细胞 前处理
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利用MALDI-TOF MS分析寡核苷酸钠盐组分分布
4
作者 黄骏齐 陈尚坤 刘巧霞 《分析测试学报》 北大核心 2025年第4期620-627,共8页
建立了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析寡核苷酸钠盐分布的方法。单链寡核苷酸引物样品(长度为20 bp,理论分子量6071.02 Da)经纯水溶解后,分别采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)与MALDI-TOF MS进行检验;样液经乙酸钠... 建立了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析寡核苷酸钠盐分布的方法。单链寡核苷酸引物样品(长度为20 bp,理论分子量6071.02 Da)经纯水溶解后,分别采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)与MALDI-TOF MS进行检验;样液经乙酸钠加钠、醇沉、复溶后再次以HPLC-MS与MALDITOF MS进行检验,检验模式均为正离子。加钠前后,HPLC-MS在解卷积后均仅显示未加盐的单一组分(对应分子量6069.9 Da与6069.8 Da);MALDI-TOF MS对加盐前样品显示单一组分(对应分子量6071.09 Da),而对加盐后样品显示了不同加钠数分子的组分分布:各组分从未加钠分子开始(对应分子量6071 Da左右),含量呈现先上升后下降的趋势,加钠个数范围从0~4到0~19不等,且分布随加盐条件的不同而变化。该结果显示MALDI-TOF MS具有检测寡核苷酸钠盐组分分布的能力,同时其具有检测一系列不同加盐程度寡核苷酸分子的广泛适应性与灵敏性。以反义寡核苷酸药物福米韦森钠为样本,采用MALDI-TOF MS分别检测了福米韦森钠纯品以及含聚乙二醇和吐温等辅料的福米韦森钠动物注射液模型。结果显示,福米韦森钠的主体加钠形态为加0个钠到加3个钠,整体含量呈现递减趋势,在加入基质前后未发生改变;同时福米韦森钠组分的误差也处于±0.5 Da范围内,精确性未受基质影响。另外,基质中的其他若干组分(包括聚乙二醇300与吐温-80)也独立显示在质谱图中,对福米韦森钠组分没有干扰。该法简单快速、灵敏度高,适用于一系列寡核苷酸钠盐分布的定性鉴定,且检验实际药物时不受药物基质影响,对反义寡核苷酸(ASO)药物的研发与检验有重要意义。 展开更多
关键词 maldi-TOF MS 寡核苷酸 寡核苷酸钠盐分布 定性分析
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动物源大肠杆菌MALDI-TOF MS质谱库的建立及在北京地区区域性差异应用分析
5
作者 张启龙 钱云开 +9 位作者 刘利勤 傅彩霞 贾宏丽 刘海莹 栗云鹏 杨逸舟 田辉 董志军 朱家强 周德刚 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期117-123,共7页
为比较不同区域大肠杆菌是否具有差异性,本研究针对自北京市怀柔区收集分离的11株大肠杆菌和延庆区收集分离的22株大肠杆菌进行了鉴定,分别采用常规生化法、16S rRNA测序和基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的鉴定方... 为比较不同区域大肠杆菌是否具有差异性,本研究针对自北京市怀柔区收集分离的11株大肠杆菌和延庆区收集分离的22株大肠杆菌进行了鉴定,分别采用常规生化法、16S rRNA测序和基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的鉴定方法进行鉴定,比较了3种方法鉴定的准确率,并对获得的细菌肽质量指纹谱数据进行分析。结果显示:两地采集的大肠杆菌用3种方法鉴定,其准确性都在95%以上,其中MALDI-TOF MS鉴定采用多点点靶时准确率可达99%以上,多点点靶下MALDI-TOF MS鉴定重复性强、准确高、时间快;不同区域的大肠杆菌虽具有相似的肽质量指纹谱特征,但聚类分析和主成分分析显示所有数据可清晰地按地区聚成两簇,其中怀柔一簇、延庆一簇,两簇之间区分明显。表明自怀柔和延庆采集的大肠杆菌的肽质量指纹谱具有区域性差异,可为基于MALDI-TOF MS的大肠杆菌溯源性分析提供技术依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 maldi-TOF MS 肽质量指纹谱 北京
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基于MALDI-TOF核酸质谱的11种牛源病毒检测方法的建立
6
作者 帅江冰 张泽林 +6 位作者 宋士琦 韩笑 曾若雪 陈吴健 郭悠然 郭惠民 张晓峰 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期39-47,共9页
为建立能高效同步鉴定牛腺病毒3型(BAV-3)、牛细小病毒1、2和3型(BPV-1、BPV-2、BPV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、狂犬病毒(RV)、呼肠孤病毒3型(REO-3)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、蓝舌病毒(BTV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)以及牛多瘤... 为建立能高效同步鉴定牛腺病毒3型(BAV-3)、牛细小病毒1、2和3型(BPV-1、BPV-2、BPV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、狂犬病毒(RV)、呼肠孤病毒3型(REO-3)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、蓝舌病毒(BTV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)以及牛多瘤病毒(BPyV)等牛源病毒的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)高通量多目标检测技术,本研究根据上述11种病原基因组的高保守区,分别设计多重PCR引物及对应的单碱基延伸探针,采用方阵法优化反应体系后初步建立牛源病毒的MALDI-TOF核酸质谱检测体系。利用该方法以靶标病毒质粒标准品混合物及非靶标病毒核酸为模板进行特异性试验,利用50拷贝/µL、25拷贝/µL、12.5拷贝/µL、6.3拷贝/µL、3.1拷贝/µL、1.6拷贝/µL靶标病毒核酸质粒标准品进行敏感性试验,利用106拷贝/µL、104拷贝/µL、102拷贝/µL靶标病毒核酸重组质粒标准品于同一时间和不同时间进行了稳定性试验。特异性试验结果显示,该方法仅对11种靶标病毒产生阳性信号峰,而与其他病原体无交叉反应,表明该方法特异性较强。敏感性试验结果通过probit模型进行概率回归检测,结果显示每种病毒最低检测限在8.69拷贝/µL~38.04拷贝/µL(99%概率),表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示,体系中每种靶标在高、中、低质粒浓度时的批内及批间重复性试验结果的符合率均达100%,表明该方法的稳定性较高。利用该MALDI-TOF核酸质谱检测体系对血液类生物制品及临床样品进行检测,同时采用各病毒的荧光定量PCR(qPCR)检测,结果显示130份样品中总计检出58份阳性,其中包括43份BPV-3、33份BPV-2、16份BPyV、6份BVDV阳性,总阳性率分别为44.0%、33.1%、25.4%、12.3%和4.6%,与各病毒qPCR结果的符合率均达100%。本研究基于MALDI-TOF核酸质谱技术首次建立了11种牛病毒的多重检测方法,为牛源病毒的快速检测及相关生物制品安全控制提供了一种新的检测技术。 展开更多
关键词 maldi-TOF核酸质谱 牛血液制品 病毒
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基于改进鲸鱼优化算法的MALDI-TOF MS参数优化研究
7
作者 张宇鹏 党玉功 +2 位作者 杨慧远 周志刚 姜杲航 《质谱学报》 北大核心 2025年第3期325-333,共9页
为了对基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行优化设计,提高仪器的分辨率,用Matlab建立双场加速延时引出的直线式TOF MS数学理论模型,列举了离子在空间和速度上可能出现的4种分布。针对鲸鱼优化算法收敛速度慢、精度... 为了对基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行优化设计,提高仪器的分辨率,用Matlab建立双场加速延时引出的直线式TOF MS数学理论模型,列举了离子在空间和速度上可能出现的4种分布。针对鲸鱼优化算法收敛速度慢、精度低和易陷入局部最优等缺点,改进收敛因子、惯性权重和位置更新策略,并以分辨率为目标,对仪器参数进行优化计算。经优化分析,分别得到萃取区长度与无场飞行管长度和萃取电压与延时时间对分辨率的影响规律,合理的萃取区长度、加速区长度和无场飞行管长度分别为3 mm、12 mm和0.95 m。对于相对分子质量在2 000~20 000 u范围内的任意离子,选择分布4下相应的萃取电压和延时时间的优化参数组合,可以获得较高的分辨率。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(maldi-TOF MS) 分辨率 鲸鱼优化算法 参数优化
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大鼠脊髓损伤模型中脂质分布和变化MALDI成像分析
8
作者 李梦娟 陈凌杉 +3 位作者 刘仪轩 许官通 王浩 国新华 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期755-762,I0002,共9页
基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS)具有软电离性质,可以得到单电荷离子的简洁谱图,是分析生物分子的有力工具。基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)技术为生物分析提供了一种同时成像多种化合物的原位可视化工具。本团队前期发... 基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS)具有软电离性质,可以得到单电荷离子的简洁谱图,是分析生物分子的有力工具。基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)技术为生物分析提供了一种同时成像多种化合物的原位可视化工具。本团队前期发展了一种新型基质(E)-丙基-α-氰-4-羟基肉桂酸盐(CHCA-C3),其适用于分析疏水性蛋白和多肽。本工作将CHCA-C3用于大鼠脊髓损伤(SCI)模型中脂质的检测,对原发性脊髓损伤和继发性脊髓损伤后脊髓中脂质的分布和发生的变化进行原位成像分析。使用CHCA-C3基质,在m/z500~900范围内成功检测出251个质谱峰。通过比对数据库获得25种脂质,发现其中4种脂质在损伤12 h(急性期)、3天(亚急性期)、7天(亚急性期)呈现明显的差异性。利用分区模型(SM)和主成分分析(PCA)对检测出的251个谱峰进行全面分析,发现在SCI的不同阶段,代谢物分布存在明显变化。本研究结果不仅拓展了CHCA-C3基质在MALDI-MSI中的应用,也为了解脊髓损伤发展过程中脂质分子的变化提供了有意义信息。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离质谱成像(maldi-MSI) (E)-丙基-α-氰-4-羟基肉桂酸盐(CHCA-C3) 脊髓损伤(SCI) 脂质检测
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MALDI-TOF MS法快速鉴定散装即食食品中3种食源性致病菌 被引量：9
9
作者 崔洁 林吉恒 +3 位作者 孙瑛 严卓彦 夏瑛瑛 黄朱梁 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第5期253-270,共18页
本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性... 本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性致病菌。通过对点样方式、前处理方式、不同培养基及培养时间等各项实验条件的优化筛选确定最佳方法,并考察其检测限和稳定性,同时用所建立的方法与多重PCR法、VITEK 2等生化鉴定法进行结果比对,比较三者鉴定结果的一致性,最后进行批量食品样本检测来探寻MALDI-TOF MS鉴定法在散装即食食品中的适用性。结果表明,三种目标菌同一批次及不同传代次数的鉴定得分均大于95%,变异系数均小于2%,所建立的方法重复性和稳定性良好,且检测限为10^(5)CFU/mL,MALDI-TOF MS菌株鉴定结果与多重PCR法、生化鉴定法结果高度一致,且比二者检测用时更短,更加特异高效;在点样方式上,相较于夹心法与混合干滴法,三种覆盖法点样平均鉴定得分更高,均为99.9%,其中1μL+1μL覆盖法点样可获得的平均峰数目更多,特征峰更复杂且强度更高;而在前处理方式上,甲酸乙腈法与其他两种菌体处理方法相比可获得更多的出峰量和更高的峰强度,平均鉴定得分均在98%以上,且与数据库中图谱匹配度更高。综上所述,MALDI-TOF MS法在致病菌鉴定方面不仅灵敏特异、准确快速,且操作简便、结果直观,作为国标法的有力补充,为食源性致病菌的分析鉴定与分型溯源提供了新思路。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-TOF MS) 散装即食食品 沙门氏菌 金 黄色葡萄球菌 蜡样芽孢杆菌
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MALDI-TOF MS在鲍曼不动杆菌同源性分析中的临床应用评估 被引量：2
10
作者 郑恬 周柯 +4 位作者 周磊 杨玉琪 陈潇 白露 刘家云 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期104-111,共8页
目的评估基质辅助激光解析电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)分析鲍曼不动杆菌(AB)同源性的临床应用价值。方法剔除同一患者或环境多次送检标本中的重复菌株,收集某三甲综合医院2020年5月—2021年2月神经内科重症监护病房(ICU)住院患者痰标本... 目的评估基质辅助激光解析电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)分析鲍曼不动杆菌(AB)同源性的临床应用价值。方法剔除同一患者或环境多次送检标本中的重复菌株,收集某三甲综合医院2020年5月—2021年2月神经内科重症监护病房(ICU)住院患者痰标本及环境标本分离的46株AB,使用VITEK-MS质谱仪检测菌株,应用SARAMIS Premium软件进行聚类分析,并采用多位点序列分型(MLST)的方法进行验证。结果通过MALDI-TOF MS和MLST聚类分析和比较,46株AB中,39株为MALDI-TOF MS的MS-a型,其中,22株为MLST的MT-A簇,包括ST208型3株,ST540型3株,ST195型8株,ST369型5株,以及ST136、ST436、ST1893型各1株;16株为MT-B簇,包括ST381型4株、ST469型11株和ST938型1株;1株为MT-C簇(ST1821);MS-b型1株为ST381;MS-c型2株为ST369;MS-d型1株为ST195;MS-e型2株分别为ST540、ST369;MS-f型1株为STN1。结论作为AB同源性分析工具,MALDI-TOF MS具有一定的局限性,其菌株同源性分析结果与MLST结果一致性低,分辨特异性低,不可取代MLST技术。 展开更多
关键词 maldi-TOF MS 鲍曼不动杆菌 MLST 同源性
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MALDI-TOF MS负离子模式下快速鉴别肠杆菌目细菌多黏菌素耐药机制的研究 被引量：1
11
作者 主淑 赵树龙 +4 位作者 宋爽 叶琳 梁昕怡 孙静芳 康海全 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1217-1223,共7页
目的探究徐州地区多黏菌素耐药的肠杆菌目细菌主要耐药机制及其快速检测技术,为临床合理规范使用多黏菌素提供全面的实验室依据。方法收集徐州医科大学附属医院2022年11月—2023年11月分离的多黏菌素耐药肠杆菌目菌株,采用PCR扩增法检... 目的探究徐州地区多黏菌素耐药的肠杆菌目细菌主要耐药机制及其快速检测技术,为临床合理规范使用多黏菌素提供全面的实验室依据。方法收集徐州医科大学附属医院2022年11月—2023年11月分离的多黏菌素耐药肠杆菌目菌株,采用PCR扩增法检测双组分系统调控基因pmrA、pmrB、phoP、phoQ、mgrB和mcr-1,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)在负离子模式下检测脂质A基础峰发生的位移变化。结果共收集24株非重复多黏菌素耐药的肠杆菌目细菌,其中肺炎克雷伯菌19株,大肠埃希菌5株。基因检测显示大肠埃希菌均为mcr-1基因阳性菌株,肺炎克雷伯菌中有4株携带mcr-1基因,3株mgrB基因发生过早终止,6株pmrB基因发生G256R突变,另外2株pmrB基因同时发生G256R和A246T突变,2株phoQ基因分别发生L26Q和A351D突变,1株phoP基因发生D191G突变,还有1株不仅携带mcr-1基因还发生了mgrB的碱基137C→G突变。负离子模式下的MALDI-TOF MS检测显示mcr-1阳性菌株在天然脂质A基础峰上发生+123 m/z位移,而染色体上基因突变菌株在天然脂质A基础峰上发生+131 m/z位移。结论徐州地区的肠杆菌目细菌对多黏菌素主要存在两种耐药机制,即携带mcr-1基因和双组分系统调控基因的突变,负离子模式下的MALDI-TOF MS可以实现主要肠杆菌目细菌因脂多糖修饰导致的多黏菌素耐药表型检测及耐药机制的鉴别。 展开更多
关键词 maldi-TOF MS 肠杆菌目细菌 多黏菌素 耐药机制 快速检测
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MALDI-TOF质谱表征聚芳醚酮环状低聚物及其组分分布 被引量：9
12
作者 姜洪焱 陈天禄 +1 位作者 齐颖华 徐纪平 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期652-655,共4页
应用介质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦＭＳ），以二羟基苯甲酸为介质、Ｎ２（３３７ｎｍ）为激光源，对两种聚芳醚酮环状低聚物的结构进行了确认，研究了环状低聚物不同聚合度组分的分布规律，并且与ＧＰＣ质量... 应用介质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦＭＳ），以二羟基苯甲酸为介质、Ｎ２（３３７ｎｍ）为激光源，对两种聚芳醚酮环状低聚物的结构进行了确认，研究了环状低聚物不同聚合度组分的分布规律，并且与ＧＰＣ质量分析法作了比较，实验结果表明，ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ质谱是分析环状低聚物的准确、快速的工具之一． 展开更多
关键词 聚芳醚酮 环状低聚物 maldi TOF 质谱 组分分布
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MALDI-TOFMS测定高聚合度葡聚糖及不同基体在测定中的作用比较 被引量：10
13
作者 邓慧敏 张珍英 +2 位作者 查庆民 邓芹英 赵善楷 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期996-999,共4页
应用基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOFMS)直接对未经分级的高聚合度 (n>1 0 0 )葡聚糖样品进行了测定 ,检测到的葡聚糖最大分子量达 1 80 0 0以上 .对 2 ,5 -二羟基苯甲酸 (DHB)、 1 -羟基异喹啉 (1 -HIQ)及 3,4 -二羟... 应用基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOFMS)直接对未经分级的高聚合度 (n>1 0 0 )葡聚糖样品进行了测定 ,检测到的葡聚糖最大分子量达 1 80 0 0以上 .对 2 ,5 -二羟基苯甲酸 (DHB)、 1 -羟基异喹啉 (1 -HIQ)及 3,4 -二羟基肉桂酸 (咖啡酸 ,CA) 3种一元基体以及 DHB与 1 -HIQ,DHB与 CA两种二元基体在测定中的作用进行了比较 .结果表明 ,DHB基体测定的质量范围较大 ;DHB+ 1 -HIQ和 DHB+ CA二元混合基体对样品的解吸电离效果及谱图重现性好 ;DHB+ 1 -HIQ基体获得的谱图分辨率高 . 展开更多
关键词 maldi-TOFMS 测定 葡聚糖 基体 基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 多糖
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MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术直接鉴定阳性血培养病原菌的应用评估 被引量：11
14
作者 秦娟秀 黄芊 +3 位作者 高倩倩 谢乙慧 李敏 张灏旻 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期546-551,共6页
目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病... 目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病原菌的有效性。方法收集上海交通大学医学院附属仁济医院2016年4-6月血培养仪报警的非重复血培养瓶138个,以传统培养鉴定的方法为金标准,同时采用以上两种前处理方法处理阳性标本,再进行MALDI-TOF MS鉴定。结果本次共收集非重复的血培养阳性标本138份,排除6个假阳性血瓶,鉴定出的病原菌包括革兰阴性菌70株(53.03%)、革兰阳性菌57株(43.18%)、真菌3株和2例复数菌。MALDI Sepsityper^(TM)Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法的血培养快速鉴定病原菌准确率分别为91.67%和84.09%,种鉴定准确率分别为83.33%和61.36%。两种前处理方法处理后,革兰阴性菌的准确率分别为98.57%和95.71%,革兰阳性菌的准确率分别为87.72%和78.59%,两者鉴定所需时间为40 min/样本和25 min/样本。结论虽然MALDI Sepsityper^(TM)Kit比血清分离胶促凝管法鉴定准确率稍高但两者差异无统计学意义(91.67%对84.09%,P>0.05),与MALDI Sepsityper^(TM) Kit相比,血清分离胶促凝管法是一种快速、易获得、低廉的MALDI-TOF MS直接鉴定血培养病原菌的前处理方法。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 maldi Sepsityper^TM KIT 血清分离胶促凝管法 血培养 病原菌
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克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库的建立及应用 被引量：14
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作者 赵贵明 刘洋 +3 位作者 陈颖 杨海荣 赵勇胜 王娉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期105-110,共6页
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立了克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库,用于该菌属内种和亚种的高通量鉴定及菌株分型。在优化... 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立了克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库,用于该菌属内种和亚种的高通量鉴定及菌株分型。在优化培养条件、样品处理方法及确定MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱采集参数的基础上,将采集的8种参考菌株蛋白质质谱数据通过Biotyper软件构建克罗诺杆菌的MALDI-TOF-MS数据库,再用相近肠杆菌及该属分离株验证数据库的准确性。结果表明:应用建立的克罗诺杆菌的MALDI-TOF-MS数据库对135株克罗诺杆菌分离株进行分析,鉴定分值均不小于2.0,达到了种水平鉴定要求,通过聚类分析,可进一步分型。构建的MALDI-TOF-MS数据库为克罗诺杆菌高通量鉴定与分型提供了一种新的手段。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌 maldi-TOF-MS 数据库 鉴定 分型
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MALDI-TOF-MS鉴定布鲁氏菌方法建立和评价 被引量：15
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作者 汤旭 肖迪 +5 位作者 张慧芳 陈经雕 毛玲玲 崔步云 张建中 姜海 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期772-778,共7页
目的为了快速、准确、便捷的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究拟建立鉴定布鲁氏菌属的MALDI-TOF-MS方法,利用现场分离菌株对该方法进行特异性和敏感性评价。方法收集布鲁氏菌标准菌株和地方流行株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质... 目的为了快速、准确、便捷的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究拟建立鉴定布鲁氏菌属的MALDI-TOF-MS方法,利用现场分离菌株对该方法进行特异性和敏感性评价。方法收集布鲁氏菌标准菌株和地方流行株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立布鲁氏菌鉴定数据库。并用39株布鲁氏菌菌株,对建立的数据库进行验证。结果经数据库鉴定,39株布鲁氏菌菌株与数据库中布鲁氏菌的匹配分数全部大于2.300,均报告为布鲁氏菌,表明鉴定结果的可信度很高。聚类分型结果表明,在蛋白质水平,MALDI-TOF-MS将测试的布鲁氏菌分成3大类。结论MALDI-TOF-MS对布鲁氏菌进行鉴定,具有快速、准确、灵敏等优点,可以实现对布鲁氏菌属的准确鉴定,对布鲁氏菌病的临床诊断具有较高的使用价值。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 maldi-TOF-MS 鉴定
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金黄色葡萄球菌及其甲氧苯青霉素耐药性的MALDI-TOF MS鉴定 被引量：11
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作者 杜宗敏 杨瑞馥 +2 位作者 郭兆彪 宋亚军 王津 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期62-67,共6页
用MALDI_TOFMS细菌指纹图谱鉴定细菌 ,建立区分金黄色葡萄球菌甲氧苯青霉素耐药株和敏感株的MALDI_TOFMS分析方法,检测了76株从临床标本中分离得到的金黄色葡萄球菌 ,用软件进行聚类分析,以nuc(耐热核酸酶)基因和mecA(耐药)基因聚合酶... 用MALDI_TOFMS细菌指纹图谱鉴定细菌 ,建立区分金黄色葡萄球菌甲氧苯青霉素耐药株和敏感株的MALDI_TOFMS分析方法,检测了76株从临床标本中分离得到的金黄色葡萄球菌 ,用软件进行聚类分析,以nuc(耐热核酸酶)基因和mecA(耐药)基因聚合酶链反应(PCR)检测结果为参照 ,74 %的菌株经MALDI_TOFMS给出了正确的鉴定结果;金黄色葡萄球菌甲氧苯青霉素耐药株和敏感株的质谱图有很大差别 ,各自有其特征峰;经过软件聚类分析 ,76株实验菌株划分为敏感群和耐药群;与PCR检测结果对照 ,有7株菌PCR检测mecA基因为阴性 ,而经MALDI_TOFMS鉴定为耐药株 ,表型鉴定表明其中有5株为敏感株;利用细菌指纹图谱和数据库检索对大多数菌株实现了正确鉴定;MALDI_TOFMS分辨率高 ,甚至可以区分株间的差异 ,实现了区分金黄色葡萄球菌甲氧苯青霉素耐药株和敏感株; 展开更多
关键词 maldi-TOFMS 鉴定 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 金黄色葡萄球菌 甲氧苯青霉素 耐药性
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单增李斯特氏菌MALDI-TOF-MS鉴定与分型研究 被引量：20
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作者 王耀 曹际娟 +5 位作者 赵昕 郑秋月 王刚 田卓 史媛媛 曹远银 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期194-198,共5页
为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。... 为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。采用单增李斯特氏菌标准菌株进行验证,表明鉴定结果的可信度很高。在数据库信息的基础上,对37株单增李斯特氏菌分离株进行聚类分型。分型结果表明,在蛋白质水平上,MALDI-TOF-MS可把37株单增李斯特氏菌分成9个型别。 展开更多
关键词 单增李斯特氏菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-TOF-MS) 鉴定 分型
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MALDI质谱分析PEG5000和BSA的实验教学设计 被引量：5
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作者 刘雅琴 邹建凯 裘雅渔 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2015年第10期183-186,共4页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是质谱分析中新型的大型仪器之一,通过开设新型大型仪器MALDI-TOF质谱的实验课程,有效地开拓学生的专业视野。针对不同的样品选择不同的基质和采取不同的检测模式,本实验以不同分子量范... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是质谱分析中新型的大型仪器之一,通过开设新型大型仪器MALDI-TOF质谱的实验课程,有效地开拓学生的专业视野。针对不同的样品选择不同的基质和采取不同的检测模式,本实验以不同分子量范围的两种代表性样品聚乙二醇5000和牛血清白蛋白(66KD)为例,聚乙二醇5000选择2,5-二羟基苯甲酸作为基质;牛血清白蛋白选择芥子酸为基质,进行质谱检测。有效地让学生了解MALDI仪器的性能和应用范围,为他们今后从事科学研究工作奠定良好的基础,也让大型仪器全面支撑研究生教学,进一步提高了分析仪器的利用率。 展开更多
关键词 maldi质谱 BSA蛋白 实验教学 大型仪器
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大豆巯基肽的共价色谱法制备及其MALDI-TOF-MS分析 被引量：2
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作者 丁秀臻 孔祥珍 +2 位作者 陈业明 张彩猛 华欲飞 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期31-36,共6页
建立了一种从复杂的大豆球蛋白酶解物中提取巯基肽的高选择性方法。首先,对大豆球蛋白酶解物中的二硫键用1,4-二硫苏糖醇进行还原,对还原剂的用量进行了考察和优化,提高了酶解物中的巯基肽含量。然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共价色谱... 建立了一种从复杂的大豆球蛋白酶解物中提取巯基肽的高选择性方法。首先,对大豆球蛋白酶解物中的二硫键用1,4-二硫苏糖醇进行还原,对还原剂的用量进行了考察和优化,提高了酶解物中的巯基肽含量。然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共价色谱制备还原酶解物中的巯基肽,对共价色谱的吸附、解吸条件进行了考察和优化。研究表明:二硫键还原最佳1,4-二硫苏糖醇用量为20 mmol/L,还原之后酶解物中的巯基含量从1.8μmol/g提高到了113.8μmol/g。共价色谱的最佳条件为还原酶解物的上样量为酶解物中巯基含量占凝胶活性位点的80%,键合时间30 min;解吸时1,4-二硫苏糖醇浓度20 mmol/L,解吸时间20 min。此外,C18柱可以有效地将巯基肽中的1,4-二硫苏糖醇和2-巯基吡啶去除。MALDI-TOF-MS分析表明制备的巯基肽中可检测到45个肽段,其中36个肽段含有巯基,表明Thiolpropyl-Sepharose 6B共价色谱对巯基肽有很高的选择性。 展开更多
关键词 大豆球蛋白酶解物 巯基肽 还原 Thiolpropyl—Sepharose 6B maldi—TOF—MS
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