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睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量：
1
1
作者
王莉
李青
+3 位作者
郭爱林
张丰
郭斌
樊代明
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期148-149,155,共3页
目的 :克隆及表达人胶质瘤特异性抗原MAGE E1基因片段。方法 :从人胶质瘤细胞系BT 32 5提取总RNA ,用RT PCR从中扩增出MAGE E1基因片段。将MAGE E1基因片段插入载体pGEM Teasy中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆至表达载体 pGEX ...
目的 :克隆及表达人胶质瘤特异性抗原MAGE E1基因片段。方法 :从人胶质瘤细胞系BT 32 5提取总RNA ,用RT PCR从中扩增出MAGE E1基因片段。将MAGE E1基因片段插入载体pGEM Teasy中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆至表达载体 pGEX 4T 2中 ,构建重组表达载体pGEX 4T 2 MAGE E1,并转化大肠杆菌进行表达。结果 :用 1mmol/L异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导 5h ,MAGE E1蛋白的表达即达高峰。SDS PAGE及凝胶密度扫描分析表明 ,表达出Mr 约 4 10 0 0大小的蛋白 ,占菌体总蛋白的 35 %。结论 :该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体 ,以及制备肿瘤疫苗奠定了基础。
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关键词
睾丸肿瘤
抗原
mage-e1基因
基因
克隆
大肠杆菌
基因
表达
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职称材料
胃癌MAGE-1基因启动子B′B区去甲基化状态的研究
被引量：
3
2
作者
许琳
罗兵
+3 位作者
王青
徐翮飞
黄维青
梁华
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2003年第1期39-41,共3页
目的 :探讨胃癌组织中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化状态及其与病理分级及临床分期的关系。方法 :取胃癌组织标本 4 0例 ,另外取同患者相应的癌旁组织 4 0例作为对照。采用分子生物学技术 甲基化敏感性内切酶酶切及PCR扩增技术 ,研究...
目的 :探讨胃癌组织中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化状态及其与病理分级及临床分期的关系。方法 :取胃癌组织标本 4 0例 ,另外取同患者相应的癌旁组织 4 0例作为对照。采用分子生物学技术 甲基化敏感性内切酶酶切及PCR扩增技术 ,研究了胃癌组织中MAGE 1启动子B′B区的去甲基化状态。结果 :在所检测的胃癌组织标本中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化的发生率为 2 5 % (10 /40 )。而在癌旁组织中发生率为 0 ,两者发生率的差别具有显著的统计学意义 (P <0 0 1)。在低分化腺癌中MAGE 1基因的B′B区去甲化发生率为 5 0 % (6 /12 ) ,中分化腺癌中发生率为 18.7% (3/16 ) ,高分化腺癌中发生率为 8.3(1/11)。其发生率的差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。在早期胃癌组织中B′B区的去甲基化的发生率为16 .7% ,在晚期胃癌组织中发生率为 2 8.6 % (P <0 .0 5 ) ,差别有统计学意义。结论 :胃癌组织中MAGE 1基因启动子的B′B区存在去甲基化。
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关键词
胃癌
mage-
1
基因
启动子
去甲基化
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职称材料
题名
睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量：
1
1
作者
王莉
李青
郭爱林
张丰
郭斌
樊代明
机构
第四军医大学西京医院病理科
第四军医大学研究生院
第四军医大学西京医院消化内科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期148-149,155,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No .30 1 0 0 2 1 8)
教育部"高等学校骨干教师资助计划"资助项目 (No.2 0 0 0 65 66)
留学归国人员科研启动基金资助项目 (No .1 999 747)
文摘
目的 :克隆及表达人胶质瘤特异性抗原MAGE E1基因片段。方法 :从人胶质瘤细胞系BT 32 5提取总RNA ,用RT PCR从中扩增出MAGE E1基因片段。将MAGE E1基因片段插入载体pGEM Teasy中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆至表达载体 pGEX 4T 2中 ,构建重组表达载体pGEX 4T 2 MAGE E1,并转化大肠杆菌进行表达。结果 :用 1mmol/L异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导 5h ,MAGE E1蛋白的表达即达高峰。SDS PAGE及凝胶密度扫描分析表明 ,表达出Mr 约 4 10 0 0大小的蛋白 ,占菌体总蛋白的 35 %。结论 :该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体 ,以及制备肿瘤疫苗奠定了基础。
关键词
睾丸肿瘤
抗原
mage-e1基因
基因
克隆
大肠杆菌
基因
表达
Keywords
MAGE E
1
gene cloning
expression
分类号
R737.21 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
胃癌MAGE-1基因启动子B′B区去甲基化状态的研究
被引量：
3
2
作者
许琳
罗兵
王青
徐翮飞
黄维青
梁华
机构
青岛市立医院
青岛大学医学院微生物教研室
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2003年第1期39-41,共3页
文摘
目的 :探讨胃癌组织中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化状态及其与病理分级及临床分期的关系。方法 :取胃癌组织标本 4 0例 ,另外取同患者相应的癌旁组织 4 0例作为对照。采用分子生物学技术 甲基化敏感性内切酶酶切及PCR扩增技术 ,研究了胃癌组织中MAGE 1启动子B′B区的去甲基化状态。结果 :在所检测的胃癌组织标本中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化的发生率为 2 5 % (10 /40 )。而在癌旁组织中发生率为 0 ,两者发生率的差别具有显著的统计学意义 (P <0 0 1)。在低分化腺癌中MAGE 1基因的B′B区去甲化发生率为 5 0 % (6 /12 ) ,中分化腺癌中发生率为 18.7% (3/16 ) ,高分化腺癌中发生率为 8.3(1/11)。其发生率的差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。在早期胃癌组织中B′B区的去甲基化的发生率为16 .7% ,在晚期胃癌组织中发生率为 2 8.6 % (P <0 .0 5 ) ,差别有统计学意义。结论 :胃癌组织中MAGE 1基因启动子的B′B区存在去甲基化。
关键词
胃癌
mage-
1
基因
启动子
去甲基化
Keywords
gastric carcinoma
MAGE
1
gene promoter
demethylation
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达
王莉
李青
郭爱林
张丰
郭斌
樊代明
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
胃癌MAGE-1基因启动子B′B区去甲基化状态的研究
许琳
罗兵
王青
徐翮飞
黄维青
梁华
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2003
3
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