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基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用被引量：1: 1; 作者赵鹏陶定银 +2 位作者梁振张丽华张玉奎《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期249-253,共5页; 通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白... 展开更多; 关键词蛋白质均衡器 m13噬菌体展示单链抗体文库串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱蛋白质肾病患者尿; 在线阅读下载PDF 职称材料

多功能M13KE噬菌体展示系统的建立: 2; 作者方月琴郭娟宁 +1 位作者陆豪杰朱国强《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期143-147,共5页; 以M13KE噬菌体为起始载体,建立一种无需辅助噬菌体的较长片段多肽库展示系统,以解决当前噬菌体展示仅能筛选短肽库现象,并扩大靶向高通量筛选范畴。根据M13KE次要外壳蛋白(Minor coat protein of wild-type M13KE,wt-pⅢ)基因III(wt-ge... 展开更多; 关键词靶向高通量筛选噬菌体展示系统 m13KE 长片段多肽库; 在线阅读下载PDF 职称材料

M13噬菌体衣壳蛋白的研究应用被引量：1: 3; 作者丁芝赵岭马雪梅《安徽农业科学》 CAS 2013年第2期521-523,共3页; M13噬菌体是一种丝状噬菌体,内有一个环状单链DNA分子,它由约2 800个PⅧ蛋白组成的圆柱形衣壳包围环状单链DNA分子,其中5个PⅦ和5个PⅪ蛋白在噬菌体的一端,另一端有5个PⅥ蛋白和5个PⅢ蛋白。这些衣壳蛋白参与着噬菌体的感染、组装等功... 展开更多; 关键词 m13噬菌体衣壳蛋白噬菌体展示技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

M13噬菌体在分析传感中的应用进展: 4; 作者王晓燕王思怡 +1 位作者杨婷王建华《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期797-804,共8页; 为生物传感分析选择合适的目标识别分子是提高检测灵敏度和准确度的关键。为此,人们开发了一系列诸如小分子、抗体、多肽和适配体等亲和配体。基于噬菌体展示技术筛选出数千种特异性配体,可以噬菌体为组合元件构建生物传感探针。该方法... 展开更多; 关键词 m13噬菌体噬菌体展示分析生物传感; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定: 5; 作者张登梅年四季 +3 位作者叶迎春杨燕于红袁青《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期65-68,共4页; 目的:筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL-13单链抗体,并进行可溶性表达和鉴定。方法:前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库,本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集,然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL-1... 展开更多; 关键词 IL-13 全人源单链抗体噬菌体展示; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选被引量：5: 6; 作者王召阳蒋亚君 +6 位作者刘雪婷林伟东鑫婷侯绍华郭晓宇朱鸿飞贾红《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1685-1693,共9页; 为构建特异性犬瘟热病毒(CDV)的纳米抗体库,获得抗CDV的VHH抗体,本试验利用CDV免疫羊驼,四免后采集外周血淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,利用巢式PCR扩增纳米抗体序列。将目的片段连接至pComb3x噬菌体展示载体,并电转至TG1宿主菌,挑... 展开更多; 关键词犬瘟热病毒(CDV) VHH抗体 m13噬菌体展示真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用被引量：1: 1; 作者赵鹏陶定银梁振张丽华张玉奎; 机构中国科学院大连化学物理研究所; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期249-253,共5页; 基金国家重大科学研究计划(2007CB914100) 中国科学院知识创新工程重要方向性项目(KJCX2YW.H09); 文摘通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白在平衡器上反复上样5次后,依次使用2mol/LNaCl、50mmol/LGly-HCl(pH2.5)和凝血酶溶液洗脱与均衡器结合的蛋白质,收集各馏分,并采用串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱进行蛋白质的分离鉴定。与未经均衡器处理的样品相比,鉴定的蛋白质数目由142个提高到396个。此外,凝胶电泳的分析结果显示,在上样流出液中蛋白质的浓度差异明显变小,大量的高丰度蛋白质存在于NaCl洗脱液中。上述结果表明,基于M13噬菌体展示scFv文库的新型蛋白质均衡器能够有效减小样品中蛋白质的浓度差异,有利于发现更多的低丰度蛋白质。; 关键词蛋白质均衡器 m13噬菌体展示单链抗体文库串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱蛋白质肾病患者尿; Keywords protein equalizer single chain variable fragment （scFv） display m13 phage library liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry （LC-ESI-mS/mS） with a serially coupled long microcolumn protein nephropathy patient urine; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多功能M13KE噬菌体展示系统的建立: 2; 作者方月琴郭娟宁陆豪杰朱国强; 机构江苏健雄职业技术学院扬州大学兽医学院新乡医学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期143-147,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31270171) 江苏高校优势学科建设工程资助项目; 文摘以M13KE噬菌体为起始载体,建立一种无需辅助噬菌体的较长片段多肽库展示系统,以解决当前噬菌体展示仅能筛选短肽库现象,并扩大靶向高通量筛选范畴。根据M13KE次要外壳蛋白(Minor coat protein of wild-type M13KE,wt-pⅢ)基因III(wt-gene Ⅲ)结构与功能关系,设计并扩增出能发挥其基因功能的截短基因Ⅲ(Truncated gene Ⅲ,tgⅢ);通过拼接-重叠-延伸PCR(Splice-overlapping-extension polymerase chain reaction,SOEing-PCR)获得含启动子、信号肽和结构基因的融合基因片段,将其插入至M13KE载体的合适部位,进行蛋白质诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析。同时在wt-gⅢ和tgⅢ部位分别插入HA和c-Myc多肽标签,再次进行表达和检测。结果显示,tgⅢ被插入到M13KE的非必需部位,利用抗蛋白III(anti-M13 pⅢ)抗体进行Western blot检测发现,wt-gⅢ和tgIII均能表达pIII(protein Ⅲ,pⅢ);anti-HA和c-Myc抗体都能检测到2个标签蛋白和pⅢ蛋白质的表达。获得一种多功能M13KE载体,具有既能表达短片段多肽库,也能表达较长片段多肽库的潜能,而且无需辅助噬菌体,可用于更大范围的高通量靶向筛选。; 关键词靶向高通量筛选噬菌体展示系统 m13KE 长片段多肽库; Keywords High-throughput screening Phage display m13KE Longer peptide library; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名M13噬菌体衣壳蛋白的研究应用被引量：1: 3; 作者丁芝赵岭马雪梅; 机构北京工业大学; 出处《安徽农业科学》 CAS 2013年第2期521-523,共3页; 文摘 M13噬菌体是一种丝状噬菌体,内有一个环状单链DNA分子,它由约2 800个PⅧ蛋白组成的圆柱形衣壳包围环状单链DNA分子,其中5个PⅦ和5个PⅪ蛋白在噬菌体的一端,另一端有5个PⅥ蛋白和5个PⅢ蛋白。这些衣壳蛋白参与着噬菌体的感染、组装等功能。文中对这5种衣壳蛋白在噬菌体展示技术的研究应用进行了综述。; 关键词 m13噬菌体衣壳蛋白噬菌体展示技术; Keywords m13 phage Coat protein Phage display technique; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名M13噬菌体在分析传感中的应用进展: 4; 作者王晓燕王思怡杨婷王建华; 机构东北大学理学院化学系; 出处《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期797-804,共8页; 基金国家自然科学基金资助项目(21874014,21727811)。; 文摘为生物传感分析选择合适的目标识别分子是提高检测灵敏度和准确度的关键。为此,人们开发了一系列诸如小分子、抗体、多肽和适配体等亲和配体。基于噬菌体展示技术筛选出数千种特异性配体,可以噬菌体为组合元件构建生物传感探针。该方法具有优异的靶向能力,并具有较强的环境耐受性。常见的M13噬菌体表面由多达2700个拷贝的主要衣壳蛋白pVIII通过螺旋形式包裹内部的单链环状DNA而成,两端分别还有3~5个拷贝的次要衣壳蛋白pVII、pIX和pIII、pVI。通过噬菌体展示技术和化学修饰可对噬菌体进行功能化改造,M13噬菌体目前已成功应用于生物、化学、医学、材料和能源等领域。该文探讨了M13噬菌体在传感分析领域的应用,并展望了基于M13噬菌体传感探针的发展趋势。; 关键词 m13噬菌体噬菌体展示分析生物传感; Keywords m13 phage phage display analysis biosensing; 分类号 OO657.1 [理学] G353.11 [文化科学—情报学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定: 5; 作者张登梅年四季叶迎春杨燕于红袁青; 机构四川医科大学基础医学院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期65-68,共4页; 基金四川省科技厅项目(2015JY0218 013SZZ005) 四川省教育厅项目(13ZB0262); 文摘目的:筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL-13单链抗体,并进行可溶性表达和鉴定。方法:前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库,本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集,然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL-13阳性单链抗体;将特异性好、亲和力相对较高的阳性单链抗体转入表达载体中进行表达并鉴定。结果:经3轮噬菌体展示富集,有30%左右的克隆子为阳性;经过约500株克隆子筛选,筛选到2株特异性和亲和力相对较高,有体外中和特性的单链抗体;将筛选的单链抗体基因转入表达载体LZ16中进行了表达,并采用生物大分子相互作用技术、Western blot等进行了鉴定。结论:成功筛选到特异性好、亲和力相对较高并具有体外中和活性的抗IL-13单链抗体。; 关键词 IL-13 全人源单链抗体噬菌体展示; Keywords IL-13 Human scFv Phage display; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选被引量：5: 6; 作者王召阳蒋亚君刘雪婷林伟东鑫婷侯绍华郭晓宇朱鸿飞贾红; 机构中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1685-1693,共9页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0501003)。; 文摘为构建特异性犬瘟热病毒(CDV)的纳米抗体库,获得抗CDV的VHH抗体,本试验利用CDV免疫羊驼,四免后采集外周血淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,利用巢式PCR扩增纳米抗体序列。将目的片段连接至pComb3x噬菌体展示载体,并电转至TG1宿主菌,挑取40个克隆进行菌液PCR验证,随机挑选13个阳性单克隆进行测序,计算抗体库库容量,加入辅助噬菌粒拯救获得的噬菌体展示抗体库。经过3轮淘选,富集对CDV结合力高的噬菌体。利用毕赤酵母系统表达两株结合力高的噬菌体,经Ni柱纯化后,利用ELISA进行噬菌体结合力的鉴定。结果表明,四免后羊驼血清效价达1∶25000,达到建库要求,构建的噬菌体展示文库库容量达3.41×109 PFU。经过3轮淘选,特异性抗体库经稀释100倍后,ELISA检测仍为阳性,表明特异性结合CDV的噬菌体得到明显的富集。ELISA结果表明,两株纯化的纳米抗体与CDV的反应性显著高于对照组。以上结果提示,本研究成功筛选出2株特异性结合CDV的VHH抗体,为VHH抗体在犬瘟热的诊断和治疗方面的应用奠定了基础。; 关键词犬瘟热病毒(CDV) VHH抗体 m13噬菌体展示真核表达; Keywords canine distemper virus(CDV) VHH antibody m13 phage display eukaryotic expression; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用	赵鹏陶定银梁振张丽华张玉奎	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	多功能M13KE噬菌体展示系统的建立	方月琴郭娟宁陆豪杰朱国强	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	M13噬菌体衣壳蛋白的研究应用	丁芝赵岭马雪梅	《安徽农业科学》 CAS	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	M13噬菌体在分析传感中的应用进展	王晓燕王思怡杨婷王建华	《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定	张登梅年四季叶迎春杨燕于红袁青	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选	王召阳蒋亚君刘雪婷林伟东鑫婷侯绍华郭晓宇朱鸿飞贾红	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2020	5	在线阅读下载PDF 职称材料