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人Lipocalin型前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备
被引量：
2
1
作者
苏兵
赵旭东
+2 位作者
关明
吕元
陈常庆
《复旦学报（医学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期303-306,共4页
目的 研究人Lipocalin型前列腺素D合酶 (L PGDS)的编码蛋白质在大肠杆菌中的表达 ,进一步制备抗L PGDS编码蛋白质的多克隆抗体。方法 用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法克隆L PGDS基因蛋白编码序列。构建该基因的表达质粒 ,在大肠...
目的 研究人Lipocalin型前列腺素D合酶 (L PGDS)的编码蛋白质在大肠杆菌中的表达 ,进一步制备抗L PGDS编码蛋白质的多克隆抗体。方法 用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法克隆L PGDS基因蛋白编码序列。构建该基因的表达质粒 ,在大肠杆菌中诱导表达 ,SDS PAGE分析表达的蛋白质。用RediPackGST亲和层析柱纯化的蛋白质免疫BALB/c小鼠制备多抗。结果 RT PCR所分离的L PGDS基因蛋白编码序列 ,经测序证明与基因库所报道的L PGDS的基因序列完全一致。SDS PAGE分析证实该基因编码的蛋白质在大肠杆菌中表达 ,并获得效价为 1∶6 40 0的多克隆抗体。结论 L PGDS基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达 ,并能获得抗L PGDS基因编码蛋白质的多克隆抗体 。
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关键词
前列腺
素
d
合
酶
基因克隆
多克隆抗体
融
合
蛋白
l-pgds
PG
d
2
大肠杆菌
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职称材料
载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E_2(PGE_2)和前列腺素D_2(PGD_2)
被引量：
2
2
作者
王维娜
朱海燕
+2 位作者
黄海
叶丽
冯美卿
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期10-14,共5页
目的探讨人单核细胞THP-1源性巨噬细胞产生的Lipocalin型前列腺素D合酶(lipocalin typeprostaglandin D synthase,L-PGDS)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和前列腺素D2(PGD2)与载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)抗动脉粥...
目的探讨人单核细胞THP-1源性巨噬细胞产生的Lipocalin型前列腺素D合酶(lipocalin typeprostaglandin D synthase,L-PGDS)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和前列腺素D2(PGD2)与载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用之间的关系。方法采用MTT法确定合适的给药浓度。用不同浓度(0、12.5、25、50、100和200μg/mL)apoA-Ⅰ处理体外培养的THP-1细胞源性巨噬细胞24 h后,逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测L-PGDS mRNA表达的变化,酶联免疫测定法(ELISA)检测PGE2和PGD2蛋白表达的变化。结果 apoA-Ⅰ处理24 h的巨噬细胞中L-PGDS mRNA、PGE2和PGD2蛋白的表达均显著高于未用apoA-Ⅰ处理的巨噬细胞(P均<0.001);apoA-Ⅰ浓度为50μg/mL时,作用效果最明显。结论 apoA-Ⅰ的抗AS作用可能与上调THP-1细胞源性巨噬细胞中L-PGDS mRNA以及PGE2和PGD2蛋白的表达有关。
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关键词
载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)
巨噬细胞
前列腺
素
E2(PGE2)
前列腺
素
d
2(PG
d
2)
lipocalin
型
前列腺
素
d
合
酶
(
l-pgds
)
动脉粥样硬化(AS)
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职称材料
题名
人Lipocalin型前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备
被引量：
2
1
作者
苏兵
赵旭东
关明
吕元
陈常庆
机构
复旦大学附属华山医院检验科
中国科学院上海生物工程研究中心
出处
《复旦学报（医学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期303-306,共4页
基金
上海市卫生局百人计划资助课题
文摘
目的 研究人Lipocalin型前列腺素D合酶 (L PGDS)的编码蛋白质在大肠杆菌中的表达 ,进一步制备抗L PGDS编码蛋白质的多克隆抗体。方法 用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法克隆L PGDS基因蛋白编码序列。构建该基因的表达质粒 ,在大肠杆菌中诱导表达 ,SDS PAGE分析表达的蛋白质。用RediPackGST亲和层析柱纯化的蛋白质免疫BALB/c小鼠制备多抗。结果 RT PCR所分离的L PGDS基因蛋白编码序列 ,经测序证明与基因库所报道的L PGDS的基因序列完全一致。SDS PAGE分析证实该基因编码的蛋白质在大肠杆菌中表达 ,并获得效价为 1∶6 40 0的多克隆抗体。结论 L PGDS基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达 ,并能获得抗L PGDS基因编码蛋白质的多克隆抗体 。
关键词
前列腺
素
d
合
酶
基因克隆
多克隆抗体
融
合
蛋白
l-pgds
PG
d
2
大肠杆菌
Keywords
prostaglan
d
in
d
synthase
gene clone
polyclonal antibo
d
y
fusion protein
分类号
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E_2(PGE_2)和前列腺素D_2(PGD_2)
被引量：
2
2
作者
王维娜
朱海燕
黄海
叶丽
冯美卿
机构
复旦大学药学院生物合成教研室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期10-14,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30973684)
上海市科委资助项目(0952nm03500)~~
文摘
目的探讨人单核细胞THP-1源性巨噬细胞产生的Lipocalin型前列腺素D合酶(lipocalin typeprostaglandin D synthase,L-PGDS)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和前列腺素D2(PGD2)与载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用之间的关系。方法采用MTT法确定合适的给药浓度。用不同浓度(0、12.5、25、50、100和200μg/mL)apoA-Ⅰ处理体外培养的THP-1细胞源性巨噬细胞24 h后,逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测L-PGDS mRNA表达的变化,酶联免疫测定法(ELISA)检测PGE2和PGD2蛋白表达的变化。结果 apoA-Ⅰ处理24 h的巨噬细胞中L-PGDS mRNA、PGE2和PGD2蛋白的表达均显著高于未用apoA-Ⅰ处理的巨噬细胞(P均<0.001);apoA-Ⅰ浓度为50μg/mL时,作用效果最明显。结论 apoA-Ⅰ的抗AS作用可能与上调THP-1细胞源性巨噬细胞中L-PGDS mRNA以及PGE2和PGD2蛋白的表达有关。
关键词
载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)
巨噬细胞
前列腺
素
E2(PGE2)
前列腺
素
d
2(PG
d
2)
lipocalin
型
前列腺
素
d
合
酶
(
l-pgds
)
动脉粥样硬化(AS)
Keywords
apolipoprotein A-I （apoA-I）
macrophage
prostaglan
d
in （ PGE2 ）
prostaglan
d
in
d
2 （PGI）,）
lipocalin
type prostaglan
d
in I） synthase （
l-pgds
）
atherosclerosis （AS）
分类号
R966 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人Lipocalin型前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备
苏兵
赵旭东
关明
吕元
陈常庆
《复旦学报（医学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001
2
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职称材料
2
载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E_2(PGE_2)和前列腺素D_2(PGD_2)
王维娜
朱海燕
黄海
叶丽
冯美卿
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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