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一种多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶体外荧光底物酶活性检测方法
1
作者
陈嘉瑀
戴瑶
+7 位作者
王顺娟
肖杨
闫鑫宗
刘通
袁智浩
史凯丽
李润乐
汤锋
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025年第1期23-31,共9页
目的构建多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)体外荧光酶活性检测方法,并与化学发色底物酶活性检测方法进行对比。方法确立荧光底物体外酶活性检测方法的反应条件,并通过分子对接、抑制率、精密度对比荧光底物L-亮氨...
目的构建多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)体外荧光酶活性检测方法,并与化学发色底物酶活性检测方法进行对比。方法确立荧光底物体外酶活性检测方法的反应条件,并通过分子对接、抑制率、精密度对比荧光底物L-亮氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素盐酸盐(Leu-AMC)与化学发色底物L-亮氨酸-4-硝基苯氨(Leu-pNA)之间的差异。结果分子对接结果显示荧光底物Leu-AMC与蛋白的亲和力大于化学发色底物Leu-pNA。通过观察改变反应条件对荧光强度的影响,确立荧光酶活性检测方法在反应温度为37℃、反应pH为9.0、蛋白浓度为800 nmol/L、反应时长60 min的情况下该检测方法反应效果明显。Leu-AMC在5μmol/L的底物浓度和底物浓度变化的情况下有明显的反应效果和反应差异,通过加入不同抑制剂,荧光底物检测方法相较于化学发色底物检测方法存在组间差异。结论本研究构建了以Leu-AMC为底物的多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶体外荧光酶活性检测方法,与化学发色底物相比该方法灵敏度更高。
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关键词
多房棘球蚴
LAP
leu-amc
酶活性
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题名
一种多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶体外荧光底物酶活性检测方法
1
作者
陈嘉瑀
戴瑶
王顺娟
肖杨
闫鑫宗
刘通
袁智浩
史凯丽
李润乐
汤锋
机构
青海大学高原医学研究中心
青海大学研究生院
青海大学基础医学部
出处
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025年第1期23-31,共9页
基金
国家自然科学基金(No.32360192,No.81860299)
青海省科技厅项目(No.2024-ZJ-909)联合资助。
文摘
目的构建多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)体外荧光酶活性检测方法,并与化学发色底物酶活性检测方法进行对比。方法确立荧光底物体外酶活性检测方法的反应条件,并通过分子对接、抑制率、精密度对比荧光底物L-亮氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素盐酸盐(Leu-AMC)与化学发色底物L-亮氨酸-4-硝基苯氨(Leu-pNA)之间的差异。结果分子对接结果显示荧光底物Leu-AMC与蛋白的亲和力大于化学发色底物Leu-pNA。通过观察改变反应条件对荧光强度的影响,确立荧光酶活性检测方法在反应温度为37℃、反应pH为9.0、蛋白浓度为800 nmol/L、反应时长60 min的情况下该检测方法反应效果明显。Leu-AMC在5μmol/L的底物浓度和底物浓度变化的情况下有明显的反应效果和反应差异,通过加入不同抑制剂,荧光底物检测方法相较于化学发色底物检测方法存在组间差异。结论本研究构建了以Leu-AMC为底物的多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶体外荧光酶活性检测方法,与化学发色底物相比该方法灵敏度更高。
关键词
多房棘球蚴
LAP
leu-amc
酶活性
Keywords
Echinococcus multilocularis
LAP
leu-amc
enzyme activity
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶体外荧光底物酶活性检测方法
陈嘉瑀
戴瑶
王顺娟
肖杨
闫鑫宗
刘通
袁智浩
史凯丽
李润乐
汤锋
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025
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