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利用重组PCR技术构建大肠杆菌肠毒素LT_B0ST_I融合基因
被引量：
1
1
作者
王莹
周智爱
+1 位作者
李震
曹祥荣
《上海农业学报》
CSCD
2001年第1期39-44,共6页
利用重组PCR技术将从原始菌种中扩增得到的LTB、STI 基因片段连接起来 ,构建了LTB STI 融合基因。并将其克隆到 pUCm T载体上 ,转化到大肠杆菌DH5α中 ,得到克隆T LS ,序列分析表明该克隆具有正确的基因序列和阅读框 ,具有起始密码子AT...
利用重组PCR技术将从原始菌种中扩增得到的LTB、STI 基因片段连接起来 ,构建了LTB STI 融合基因。并将其克隆到 pUCm T载体上 ,转化到大肠杆菌DH5α中 ,得到克隆T LS ,序列分析表明该克隆具有正确的基因序列和阅读框 ,具有起始密码子ATG和终止密码子TAA 。
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关键词
产肠毒素性大肠杆菌
耐热性肠毒素
重组PCR
lt
b
-
st
i
融合基因
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职称材料
大肠杆菌毒素stx2eB-LTB-ST融合基因的构建与表达
被引量：
2
2
作者
齐翀
刘军
+2 位作者
祝令伟
郭学军
冯书章
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期341-345,共5页
利用PCR技术,从病原性大肠杆菌中扩增Stx2e及LT毒素B亚基的基因并扩增ST基因,用复式PCR技术获得了这三段基因的两种融合结构,一种是三段基因直接相连,另一种是在这三段基因之间加入适当的Linker序列。在这两种融合基因两端加入适当的酶...
利用PCR技术,从病原性大肠杆菌中扩增Stx2e及LT毒素B亚基的基因并扩增ST基因,用复式PCR技术获得了这三段基因的两种融合结构,一种是三段基因直接相连,另一种是在这三段基因之间加入适当的Linker序列。在这两种融合基因两端加入适当的酶切位点并分别与pMD18-T载体相连,酶切后以正确的阅读框插入pET28a载体的多克隆位点中,转入受体菌BL21(DE3)进行表达,得到两种约28 Ku的蛋白,表达的融合蛋白均以包涵体的方式存在,约占全菌蛋白表达量的30%,将包涵体初步提纯,为下游工作奠定了基础。
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关键词
st
x2e
热不稳定肠毒素
热稳定肠毒素
融合基因
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职称材料
题名
利用重组PCR技术构建大肠杆菌肠毒素LT_B0ST_I融合基因
被引量：
1
1
作者
王莹
周智爱
李震
曹祥荣
机构
南京师范大学生命科学学院
上海市农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《上海农业学报》
CSCD
2001年第1期39-44,共6页
基金
上海市农委科技兴农项目!(农科攻字 94 2 0 3号 )
文摘
利用重组PCR技术将从原始菌种中扩增得到的LTB、STI 基因片段连接起来 ,构建了LTB STI 融合基因。并将其克隆到 pUCm T载体上 ,转化到大肠杆菌DH5α中 ,得到克隆T LS ,序列分析表明该克隆具有正确的基因序列和阅读框 ,具有起始密码子ATG和终止密码子TAA 。
关键词
产肠毒素性大肠杆菌
耐热性肠毒素
重组PCR
lt
b
-
st
i
融合基因
Keywords
Enterotox
i
gen
i
c Escher
i
ch
i
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i
(ETEC)
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i
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b
i
nant PCR
lt b st i fusion gene
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
大肠杆菌毒素stx2eB-LTB-ST融合基因的构建与表达
被引量：
2
2
作者
齐翀
刘军
祝令伟
郭学军
冯书章
机构
军事医学科学院军事兽医研究所
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期341-345,共5页
基金
国家自然科学基金(30170705)
文摘
利用PCR技术,从病原性大肠杆菌中扩增Stx2e及LT毒素B亚基的基因并扩增ST基因,用复式PCR技术获得了这三段基因的两种融合结构,一种是三段基因直接相连,另一种是在这三段基因之间加入适当的Linker序列。在这两种融合基因两端加入适当的酶切位点并分别与pMD18-T载体相连,酶切后以正确的阅读框插入pET28a载体的多克隆位点中,转入受体菌BL21(DE3)进行表达,得到两种约28 Ku的蛋白,表达的融合蛋白均以包涵体的方式存在,约占全菌蛋白表达量的30%,将包涵体初步提纯,为下游工作奠定了基础。
关键词
st
x2e
热不稳定肠毒素
热稳定肠毒素
融合基因
Keywords
st
x2e
lt
st
fusion
gene
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用重组PCR技术构建大肠杆菌肠毒素LT_B0ST_I融合基因
王莹
周智爱
李震
曹祥荣
《上海农业学报》
CSCD
2001
1
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职称材料
2
大肠杆菌毒素stx2eB-LTB-ST融合基因的构建与表达
齐翀
刘军
祝令伟
郭学军
冯书章
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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