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多浪羊LIN28A基因启动子区克隆、序列分析及蛋白表达研究
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作者 李伟 黄巧艳 +4 位作者 王鑫昆 谷若怀 孙慧萍 朱乐萧 邢凤 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期2992-3003,共12页
【目的】探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律,为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号:NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对,获取多浪羊LIN... 【目的】探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律,为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号:NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对,获取多浪羊LIN28A基因启动子区序列,并利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。采集幼年期、初情期前、初情期及初情期后多浪羊的下丘脑、垂体和卵巢组织,利用Western blotting检测LIN28A蛋白在下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴中的表达情况。【结果】多浪羊LIN28A基因启动子区序列长2089 bp,GC含量为56.28%。LIN28A基因启动子序列包含MEIS1、STAT3、COMP1等65个转录因子结合位点,3个TATA-box,1个CpG岛,以及9个潜在转录起始位点。LIN28A蛋白在多浪羊3个组织中均有表达,以卵巢中表达水平最高,下丘脑次之,垂体中表达量最低。在初情期前多浪羊下丘脑中LIN28A蛋白表达量显著高于幼年期(P<0.05),在幼年期和初情期前多浪羊垂体中LIN28A蛋白表达量显著高于初情期及初情期后(P<0.05),卵巢中LIN28A蛋白表达量在初情期启动前后呈现稳定趋势(P>0.05);在同一时期,LIN28A蛋白在多浪羊下丘脑、垂体和卵巢组织中的表达量均无显著差异(P>0.05)。【结论】多浪羊LIN28A基因启动子区有多个与初情期相关的转录因子结合位点,为后续转录因子验证和启动子活性检测提供了试验材料。LIN28A蛋白在多浪羊HPO轴表达差异显著,为进一步研究LIN28A基因功能及调控机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 多浪羊 lin28a基因 启动子 初情期 下丘脑-垂体-卵巢轴
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