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L-2-氨基丁酸大肠杆菌生产菌株的构建被引量：1: 1; 作者王婷韩超 +5 位作者毛倩张德志蔡柠匀刘宏亮李燕军陈宁《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期56-63,共8页; L-2-氨基丁酸作为新型药物的关键手性前体,在化工和制药行业应用广泛。该文以1株生产L-苏氨酸的大肠杆菌(Escherichia coli) THRD为出发菌株,逐步延伸代谢途径,构建了L-2-氨基丁酸高产菌株。首先,分别把苏氨酸脱水酶编码基因ilv A2和ilv... 展开更多; 关键词大肠杆菌 l-苏氨酸 l-2-酮基丁酸 l-2-氨基丁酸转运途径; 在线阅读下载PDF 职称材料

L-2-氨基丁酸生物合成研究进展被引量：1: 2; 作者潘苟生郑仁朝郑裕国《发酵科技通讯》 CAS 2016年第3期182-187,共6页; 生物法因为具有立体选择性高、环境污染少、反应条件温和等特点,已成为合成L-2-氨基丁酸的重要方法。对近年来生物法(包括发酵法、氨基酰化酶法、氨基酸氧化酶法、酰胺酶法、腈水解酶法、转氨酶法和氨基酸脱氢酶法)合成L-2-氨基丁酸的... 展开更多; 关键词左乙拉西坦 l-2-氨基丁酸微生物发酵生物催化; 在线阅读下载PDF 职称材料

亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用被引量：3: 3; 作者徐建妙陈策 +1 位作者张博柳志强《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期29-35,共7页; 亮氨酸脱氢酶催化2-酮丁酸生成L-2-氨基丁酸需要辅酶NADH参与,构建 Escherichia coli (LeuDH/FDH),通过共表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶实现了辅酶NADH胞内循环再生。通过产酶条件优化,提高该菌株催化制备L-2-氨基丁酸的效率。结果表明,... 展开更多; 关键词 l-2-氨基丁酸亮氨酸脱氢酶甲酸脱氢酶共表达优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲酸脱氢酶外源表达发酵条件优化及在L-2-氨基丁酸合成中的应用被引量：1: 4; 作者徐建妙赵哲 +1 位作者陈策柳志强《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期63-68,共6页; 采用摇瓶对重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/p ET28b-FDH外源表达甲酸脱氢酶发酵条件进行优化。结果表明,当诱导温度22℃,诱导剂IPTG浓度0.1 mmol/L,诱导时间16 h条件下,可溶性目的蛋白表达量为52.12 mg/g,相对于优化前的40.12 ... 展开更多; 关键词甲酸脱氢酶发酵条件优化 l-2-氨基丁酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

亮氨酸脱氢酶催化底物偶联法合成α-酮异己酸: 5; 作者丰险穆晓清 +1 位作者聂尧徐岩《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期698-704,共7页; 构建了亮氨酸脱氢酶(LeuDH)催化的底物偶联反应体系,打破氧化脱氨反应平衡,同时制得高附加值的α-酮异己酸(α-KIC)和L-2-氨基丁酸,并实现辅酶NAD^+的高效循环再生.基于LeuDH的底物专一性和催化动力学参数,考察了不同酮酸底物对于底物... 展开更多; 关键词亮氨酸脱氢酶底物偶联辅酶再生 α-酮异己酸 l-2-氨基丁酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名L-2-氨基丁酸大肠杆菌生产菌株的构建被引量：1: 1; 作者王婷韩超毛倩张德志蔡柠匀刘宏亮李燕军陈宁; 机构天津科技大学生物工程学院代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室(天津科技大学) 教育部工业发酵微生物重点实验室(天津科技大学); 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期56-63,共8页; 文摘 L-2-氨基丁酸作为新型药物的关键手性前体,在化工和制药行业应用广泛。该文以1株生产L-苏氨酸的大肠杆菌(Escherichia coli) THRD为出发菌株,逐步延伸代谢途径,构建了L-2-氨基丁酸高产菌株。首先,分别把苏氨酸脱水酶编码基因ilv A2和ilv A4在THRD中过表达,菌株THRD/p Trc99a-ilv A2在5 L发酵罐中分批补料发酵,2-酮基丁酸积累量达到18 g/L。然后,分别与ilv A2串联表达酪氨酸转氨酶、谷氨酸脱氢酶和亮氨酸脱氢酶编码基因tyr B、gdh和bcdBS,将L-2-酮基丁酸转化为L-2-氨基丁酸,菌株THRD/p Trc99a-bcdBS-ilv A2的L-2-氨基丁酸产量达到19 g/L。最后,研究了阻断L-苏氨酸输出途径对发酵的影响,菌株THRDΔrht C/p Trc99a-bcdBS-ilv A2的L-2-氨基丁酸产量提升至22 g/L。因此,通过代谢途径延伸可以有效地将L-苏氨酸生产菌株转变为L-2-氨基丁酸生产菌株。该研究为L-2-氨基丁酸高产菌株的构建奠定了基础,且对其他延伸代谢途径获得新产品的代谢工程研究提供了参考。; 关键词大肠杆菌 l-苏氨酸 l-2-酮基丁酸 l-2-氨基丁酸转运途径; Keywords Escherichia coli l-threonine l-2-ketobutyrate l-2-aminobutyrate transport system; 分类号 TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名L-2-氨基丁酸生物合成研究进展被引量：1: 2; 作者潘苟生郑仁朝郑裕国; 机构浙江工业大学生物工程研究所; 出处《发酵科技通讯》 CAS 2016年第3期182-187,共6页; 文摘生物法因为具有立体选择性高、环境污染少、反应条件温和等特点,已成为合成L-2-氨基丁酸的重要方法。对近年来生物法(包括发酵法、氨基酰化酶法、氨基酸氧化酶法、酰胺酶法、腈水解酶法、转氨酶法和氨基酸脱氢酶法)合成L-2-氨基丁酸的路线和研究进展进行了综述,分析上述工艺中存在的问题并提出建议和对策,为实现L-2-氨基丁酸工业化生产和降低生产成本提供参考。; 关键词左乙拉西坦 l-2-氨基丁酸微生物发酵生物催化; Keywords levetiracetam l-2-aminobutyrate microbial fermentation biocatalysis; 分类号 TQ463 [化学工程—制药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用被引量：3: 3; 作者徐建妙陈策张博柳志强; 机构浙江工业大学生物工程学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期29-35,共7页; 基金浙江省科技计划公益技术应用研究项目(2017C33157); 文摘亮氨酸脱氢酶催化2-酮丁酸生成L-2-氨基丁酸需要辅酶NADH参与,构建 Escherichia coli (LeuDH/FDH),通过共表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶实现了辅酶NADH胞内循环再生。通过产酶条件优化,提高该菌株催化制备L-2-氨基丁酸的效率。结果表明,在5L发酵罐上,在诱导温度为22 ℃、诱导剂乳糖质量浓度为 8.0 g/L 和诱导时间为17 h的条件下,亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的酶活分别达到79.2 U/g和216.1 U/g,催化效果最佳。利用该菌株全细胞为催化剂,耦合苏氨酸脱氨酶,在1L反应体系中进行了催化反应, L -苏氨酸质量浓度为180 g/L时,无需额外添加辅酶,8 h反应后底物转化率达到99%,L-2-氨基丁酸 e.e.值99.5%以上,时空产率19.3 g/(L·h)。该研究为建立高效、低成本的L-2-氨基丁酸工业化生产方法提供了基础。; 关键词 l-2-氨基丁酸亮氨酸脱氢酶甲酸脱氢酶共表达优化; Keywords l-2-aminobutyric acid leucine dehydrogenase formate dehydrogenase co-expression optimization; 分类号 TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲酸脱氢酶外源表达发酵条件优化及在L-2-氨基丁酸合成中的应用被引量：1: 4; 作者徐建妙赵哲陈策柳志强; 机构浙江工业大学生物工程学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期63-68,共6页; 基金浙江省科技计划公益技术应用研究项目(2017C33157); 文摘采用摇瓶对重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/p ET28b-FDH外源表达甲酸脱氢酶发酵条件进行优化。结果表明,当诱导温度22℃,诱导剂IPTG浓度0.1 mmol/L,诱导时间16 h条件下,可溶性目的蛋白表达量为52.12 mg/g,相对于优化前的40.12 mg/g,提高了29.91%。在此基础上,在5 L发酵罐上对外源表达甲酸脱氢酶发酵条件进行优化。结果表明,当诱导温度22℃,诱导剂乳糖质量浓度8 g/L,诱导时间16 h条件下可溶性目的蛋白表达量为41.26 mg/g,相对于优化前的34.15 mg/g提高了20.82%。利用该条件下培养的菌体经破碎后获得甲酸脱氢酶粗酶液与适当比例的苏氨酸脱氨酶及亮氨酸脱氢酶粗酶液进行匹配,在底物L-苏氨酸质量浓度为180 g/L,辅底物甲酸铵120 g/L,NAD^+0.1 g/L,在1 L反应体系中,恒温水浴35℃,搅拌转速500 r/mim条件下,反应9 h后,底物转化率达99%以上,时空产率17.2 g/(L·h),e.e.值99.5%以上。; 关键词甲酸脱氢酶发酵条件优化 l-2-氨基丁酸; Keywords formate dehydrogenase termentation conditions optimization l-2-aminobutyric acid; 分类号 TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亮氨酸脱氢酶催化底物偶联法合成α-酮异己酸: 5; 作者丰险穆晓清聂尧徐岩; 机构江南大学工业生物技术教育部重点实验室宿迁市江南大学产业技术研究院; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期698-704,共7页; 基金国家自然科学基金(批准号:21336009 21176103) +1 种基金高等学校学科创新引智计划(111计划)项目(批准号:111-2-06)资助~~; 文摘构建了亮氨酸脱氢酶(LeuDH)催化的底物偶联反应体系,打破氧化脱氨反应平衡,同时制得高附加值的α-酮异己酸(α-KIC)和L-2-氨基丁酸,并实现辅酶NAD^+的高效循环再生.基于LeuDH的底物专一性和催化动力学参数,考察了不同酮酸底物对于底物偶联反应效率的影响,选择转化率最高的2-丁酮酸作为偶联底物,使α-KIC产率由单步氧化反应的2. 75%提高至66. 82%.通过考察底物浓度、pH值、NH_4^+浓度和辅酶NAD^+浓度等反应条件对偶联反应效率的影响,使α-KIC产率进一步提高至83. 25%,同时辅酶NAD^+的总转化数(TTN)达到5. 88×105.通过改变底物L-亮氨酸和2-丁酮酸的摩尔比,能够将α-KIC的产率进一步提高至92. 74%.; 关键词亮氨酸脱氢酶底物偶联辅酶再生 α-酮异己酸 l-2-氨基丁酸; Keywords Leucine dehydrogenase Substrate coupling Coenzyme regeneration α-Ketoisocaprate l-2-Aminobutyrate; 分类号 TQ225.2 [化学工程—有机化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	L-2-氨基丁酸大肠杆菌生产菌株的构建	王婷韩超毛倩张德志蔡柠匀刘宏亮李燕军陈宁	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	L-2-氨基丁酸生物合成研究进展	潘苟生郑仁朝郑裕国	《发酵科技通讯》 CAS	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用	徐建妙陈策张博柳志强	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2019	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	甲酸脱氢酶外源表达发酵条件优化及在L-2-氨基丁酸合成中的应用	徐建妙赵哲陈策柳志强	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	亮氨酸脱氢酶催化底物偶联法合成α-酮异己酸	丰险穆晓清聂尧徐岩	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料