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人的可溶性L-selectin(sL-selectin)在杆状病毒载体系统中的表达与纯化
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作者 胡萍 石必枝 吴兴中 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期647-650,661,共5页
目的利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombi-nant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径。方法将已经重组好的杆状病毒... 目的利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombi-nant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径。方法将已经重组好的杆状病毒感染昆虫细胞,表达sL-选凝素于细胞培养上清,利用末端连接的ZZ-结构域(蛋白A来源的首尾相连的二聚化Z结构域)与IgG-琼脂糖-6的结合而分离纯化,通过SDS-PAGE鉴定分子量的大小,并用特异性抗体验证,另外通过重组的sL-选凝素与SMMC7721的黏附观察其活性。结果sL-选凝素可在昆虫细胞中表达,产物的分子量约为46 000,与人肝癌细胞SMMC7721的结合率可达70%。结论sL-选凝素可通过杆状病毒载体在昆虫细胞中有效表达,分离纯化后依然保持生理活性。 展开更多
关键词 l-型选择蛋白配体凝集素 杆状病毒 ZZ-结构域
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EV71受体SCARB2和PSGL-1在重症手足口病患者肺组织中的表达 被引量:3
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作者 姚莎 潘红波 +4 位作者 侯碧海 党裔武 李坤雄 陈罡 罗殿中 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期780-783,共4页
目的探讨人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)清道夫受体B2(scavenger receptor class B member 2,SCARB2)和人P选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)在重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者... 目的探讨人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)清道夫受体B2(scavenger receptor class B member 2,SCARB2)和人P选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)在重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者、正常儿童及成人肺组织中的定位和分布。方法运用免疫组化Super Vision两步法检测15例重症HFMD患者、3例正常儿童及8例成人肺组织中SCARB2和PSGL-1的表达及分布。结果 SCARB2分布于重症HFMD患者、正常儿童及成人肺组织支气管上皮、细支气管上皮、肺泡上皮细胞及炎症细胞,其在三组中的阳性率差异无显著性(P>0.05)。PSGL-1分布于成人肺组织支气管、细支气管上皮,但在重症HFMD患者及正常儿童中不表达,阳性率分别为100%、0、0,三组比较差异均有统计学意义(P<0.05),三组肺组织的炎症细胞PSGL-1均为阳性,阳性率分别为100%、66.7%、100%(P>0.05);PSGL-1在三组的肺泡上皮细胞中均不表达。结论 EV71受体SCARB2分布于重症HFMD患者肺组织支气管上皮、细支气管上皮、炎症细胞及肺泡上皮细胞,PSGL-1仅分布于重症HFMD患者肺组织炎症细胞,提示SCARB2可能在重症HFMD的感染过程中具有一定作用。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒71 清道夫受体B2 P选择蛋白配体-1 免疫组织化学
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