猕猴桃果实L-半乳糖内酯脱氢酶和脱氢抗坏血酸还原酶cDNA片段的克隆与序列分析 被引量：11

1

作者 牛歆雨 雷玉山 +2 位作者 梁东 马锋旺 王西锐 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第12期57-62,共6页

克隆猕猴桃果实L-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)基因,可为揭示猕猴桃高抗坏血酸(AsA)含量的分子机制奠定基础。研究以猕猴桃果实为材料提取总RNA,采用RT-PCR法,克隆出L-GalLDH基因的cDNA片段857 bp和DHAR基因的c... 克隆猕猴桃果实L-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)基因,可为揭示猕猴桃高抗坏血酸(AsA)含量的分子机制奠定基础。研究以猕猴桃果实为材料提取总RNA,采用RT-PCR法,克隆出L-GalLDH基因的cDNA片段857 bp和DHAR基因的cDNA片段594 bp并测序,根据测序结果推测其氨基酸序列,并与刺梨、拟南芥、花椰菜、甘薯和草莓等植物的GalLDH基因和DHAR基因氨基酸序列进行亲缘分析。结果表明,猕猴桃GalLDH基因氨基酸序列和核苷酸序列与刺梨的相似性高达88%,其在同源基因进化关系树中单独聚为一类;DHAR基因氨基酸序列和核苷酸序列与苹果的相似性高达98%和99%,两者在进化关系上聚为一类。可知克隆到的2个核苷酸片段确为猕猴桃L-GalLDH和DHAR基因cDNA片段,同源基因植物亲缘关系聚类与传统的形态分类有一定的差异。 展开更多

关键词 猕猴桃 l-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH) 脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR) 维生素C 基因克隆

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水稻L-半乳糖内酯脱氢酶基因的克隆和原核表达及抗体的制备 被引量：4

2

作者 俞乐 刘拥海 彭新湘 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期381-384,429,共5页

应用RT-PCR技术从水稻叶片中克隆了水稻L-半乳糖内酯脱氢酶(GLDH)的全长基因.序列分析表明,水稻GLDH基因全长1752bp,亚克隆其部分成熟蛋白编码基因(789bp),利用基因重组技术构建了E.coli/pET30a-GLDHe,经酶切鉴定,DNA测序,证实重组质粒... 应用RT-PCR技术从水稻叶片中克隆了水稻L-半乳糖内酯脱氢酶(GLDH)的全长基因.序列分析表明,水稻GLDH基因全长1752bp,亚克隆其部分成熟蛋白编码基因(789bp),利用基因重组技术构建了E.coli/pET30a-GLDHe,经酶切鉴定,DNA测序,证实重组质粒构建正确;将重组质粒转化大肠杆菌Rosseta,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析证实表达出相对分子质量约为36000的蛋白.用原核表达蛋白作为抗原免疫家兔制备抗体,用Westernblot检测抗体的特异性及效价,结果表明,抗体血清效价为1∶1000,在加IPTG诱导后的菌液中可以检测到相应的蛋白条带((相对分子质量为36000)),在水稻叶片样品中能检测到1条相对分子质量为36000的蛋白条带. 展开更多

关键词 水稻 l-半乳糖内酯脱氢酶 原核表达 抗体

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毛花猕猴桃果实L-半乳糖内酯脱氢酶基因cDNA片段的克隆与序列分析 被引量：3

3

作者 燕标 吴延军 +1 位作者 谢鸣 叶爱华 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期523-527,共5页

毛花猕猴桃果实中Vc含量极高,为了揭示毛花猕猴桃Vc形成规律,根据已知植物的L-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)基因,设计简并引物,以毛花猕猴桃新品种‘华特’果实为材料提取总RNA,采用RT-PCR法,克隆出一条长661 bp的cDNA片段,根据测序结果推... 毛花猕猴桃果实中Vc含量极高,为了揭示毛花猕猴桃Vc形成规律,根据已知植物的L-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)基因,设计简并引物,以毛花猕猴桃新品种‘华特’果实为材料提取总RNA,采用RT-PCR法,克隆出一条长661 bp的cDNA片段,根据测序结果推测其氨基酸序列,并与刺梨、拟南芥、甘薯和草莓等植物的GalLDH基因编码的氨基酸序列进行亲缘分析。结果表明,所克隆片段编码氨基酸序列与美味猕猴桃GalLDH相似度高达99%,其在同源基因进化关系上聚为一类,与葡萄的GalLDH相似性高达91%,与草莓、刺梨、甘薯、温州蜜柑、拟南芥、甜瓜等植物的GalLDH同源性均在80%以上,可知克隆到的核苷酸片段确为毛花猕猴桃GalLDH基因的cDNA片段。 展开更多

关键词 毛花猕猴桃 l-半乳糖内酯脱氢酶 抗坏血酸 基因克隆

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软枣猕猴桃L-半乳糖内酯脱氢酶基因的克隆及原核表达分析 被引量：2

4

作者 张庆田 范书田 +1 位作者 艾军 秦红艳 《山东农业科学》 2019年第11期1-7,共7页

为更好了解L-半乳糖内酯脱氢酶及编码基因在软枣猕猴桃中的生理功能及作用,以‘魁绿’软枣猕猴桃果实cDNA为模板,用RT-PCR及RACE技术,获得L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因AaGalLDH(GenBank:KP145007.1)。序列分析表明该基因全长为2394 bp... 为更好了解L-半乳糖内酯脱氢酶及编码基因在软枣猕猴桃中的生理功能及作用,以‘魁绿’软枣猕猴桃果实cDNA为模板,用RT-PCR及RACE技术,获得L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因AaGalLDH(GenBank:KP145007.1)。序列分析表明该基因全长为2394 bp,开放阅读框为1833 bp,编码610个氨基酸,与其它植物GalLDH氨基酸序列具有78%~95%的同源性。编码的蛋白序列具有GalLDH蛋白家族典型的保守结构域。进一步将该基因连接到原核表达载体并转化大肠杆菌进行诱导表达,经Western Blotting验证,目的基因在pET-28a表达系统中有表达,但基本为不溶性表达。这为进一步研究该酶蛋白的体外表达和功能以及选育高品质软枣猕猴桃品种奠定了基础。 展开更多

关键词 软枣猕猴桃 l-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH) 维生素C 克隆 基因表达

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枸杞L-半乳糖酸内酯脱氢酶基因的克隆及表达分析 被引量：2

5

作者 乔枫 耿贵工 陈志 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2141-2147,共7页

以青海枸杞（Lycium barbarum L.）为模板,采用RT-PCR和RACE技术,克隆枸杞L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶（GLDH）基因序列,命名为LbGLDH。LbGLDH基因全长为2 114bp,包含一个开放读码框1 767bp（编码588个氨基酸）、5′末端序列57bp、3′末... 以青海枸杞（Lycium barbarum L.）为模板,采用RT-PCR和RACE技术,克隆枸杞L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶（GLDH）基因序列,命名为LbGLDH。LbGLDH基因全长为2 114bp,包含一个开放读码框1 767bp（编码588个氨基酸）、5′末端序列57bp、3′末端序列290bp。LbGLDH基因核苷酸序列与番茄、马铃薯、烟草GLDH基因具有88%～90%的一致性。LbGLDH编码氨基酸序列包含GLDH蛋白酶具备的FAD-binding-4和ALO结构域。qRT-PCR分析结果显示,在枸杞不同组织中LbGLDH基因的表达、抗坏血酸含量和GLDH活性变化趋势相同,表现为在枸杞的花和果实中表达量最高,成熟叶中表达量最少。推测LbGLDH基因表达促进枸杞果实中抗环血酸含量的积累。 展开更多

关键词 枸杞 l-半乳糖酸-1 4-内酯脱氢酶(GLDH) 基因克隆 抗坏血酸

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不结球白菜L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因的克隆及光诱导表达 被引量：1

6

作者 任锡亮 李英 +1 位作者 侯喜林 王枫 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期33-37,共5页

采用RT-PCR、巢式PCR、3′RACE和5′RACE技术,获得了不结球白菜L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GLDH)基因cDNA2 034 bp全长序列。以苏州青为材料,进行光及黑暗对照处理,观察GLDH活性和L-抗坏血酸含量的日变化规律。结果表明:随着光照时数的... 采用RT-PCR、巢式PCR、3′RACE和5′RACE技术,获得了不结球白菜L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GLDH)基因cDNA2 034 bp全长序列。以苏州青为材料,进行光及黑暗对照处理,观察GLDH活性和L-抗坏血酸含量的日变化规律。结果表明:随着光照时数的增加,不结球白菜L-抗坏血酸水平和GLDH活性升高,而在持续黑暗条件下植株的L-抗坏血酸含量和GLDH活性没有发现这种日变化,表明GLDH活性可能受光诱导调控。 展开更多

关键词 不结球白菜 l-半乳糖酸-1 4-内酯脱氢酶(GLDH) 光诱导 l-抗坏血酸

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黄瓜L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶cDNA全长的克隆和遗传转化 被引量：3

7

作者 苑志明 劳杉杉 +1 位作者 秦智伟 周秀艳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期100-103,共4页

以黄瓜D08108果实为材料,根据GenBank中登录的甜瓜L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(GalLDH)的序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增出黄瓜GalLDH的cDNA全长,GenBank登录号为HQ446099。黄瓜GalLDH的cDNA序列全长1 880 bp,包含一个长为1 773 bp的完... 以黄瓜D08108果实为材料,根据GenBank中登录的甜瓜L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(GalLDH)的序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增出黄瓜GalLDH的cDNA全长,GenBank登录号为HQ446099。黄瓜GalLDH的cDNA序列全长1 880 bp,包含一个长为1 773 bp的完整开放阅读框,编码590个氨基酸。其核苷酸序列与已知其他植物核苷酸序列间的同源性达70%以上。共检测得到5棵转基因植株。 展开更多

关键词 黄瓜 l-半乳糖-1 4-内酯脱氢酶 抗坏血酸 克隆

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柑橘L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因的克隆 被引量：4

8

作者 冯超 雷莹 刘永忠 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期731-735,共5页

利用同源序列法结合电子克隆技术,从温州蜜柑幼果中克隆到长度为2 111 bp的L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因(citGalLDH),GenBank登录号为FJ849840。生物信息分析表明该基因包含一个1 818 bp的开放阅读框,编码605个氨基酸,分子质量为68 628.... 利用同源序列法结合电子克隆技术,从温州蜜柑幼果中克隆到长度为2 111 bp的L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因(citGalLDH),GenBank登录号为FJ849840。生物信息分析表明该基因包含一个1 818 bp的开放阅读框,编码605个氨基酸,分子质量为68 628.63 u,等电点为8.727;柑橘GalLDH蛋白具备FAD_binding_4和ALO结构域,与杨树和拟南芥GalLDH蛋白的关系较近。所克隆的citGalLDH可为深入研究柑橘Vc合成分子机制奠定基础。 展开更多

关键词 维生素C 温州蜜柑 l-半乳糖-1 4-内酯脱氢酶 电子克隆

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刺梨半乳糖内酯脱氢酶的序列特征和部分反应特性 被引量：2

9

作者 安华明 黄伟 +2 位作者 樊卫国 刘庆林 陈力耕 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期97-101,共5页

分析和研究了从刺梨中克隆的维生素C合成关键酶半乳糖内酯脱氢酶的氨基酸序列特征及其基本生化反应特性.结果表明,该基因含有一段线粒体靶信号肽序列、2个跨膜区、一个典型的FAD结合域以及1个天冬酰胺糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位... 分析和研究了从刺梨中克隆的维生素C合成关键酶半乳糖内酯脱氢酶的氨基酸序列特征及其基本生化反应特性.结果表明,该基因含有一段线粒体靶信号肽序列、2个跨膜区、一个典型的FAD结合域以及1个天冬酰胺糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位点、11个酪蛋白激酶2磷酸化位点、2个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个N端十四(烷)酰化位点等潜在功能性或翻译后修饰位点.丫啶黄素显著抑制GalLDH活性,二价金属盐CuSO4和ZnSO4有部分抑制作用,而石蒜碱几乎没有作用. 展开更多

关键词 刺梨 半乳糖内酯脱氢酶 维生素C 序列特征 生化特性

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苹果果实L-半乳糖脱氢酶cDNA的克隆及其RNAi载体的构建 被引量：2

10

作者 高静 尚增振 +2 位作者 王小华 马锋旺 梁东 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第1期181-187,共7页

【目的】从"皇家嘎拉"苹果幼果外果皮中克隆L-半乳糖脱氢酶(L-galactose dehydrogenase,GalDH)cDNA,进行生物信息学分析并构建其RNAi植物表达载体,为该基因功能鉴定奠定基础。【方法】应用同源序列克隆法克隆"皇家嘎拉&q... 【目的】从"皇家嘎拉"苹果幼果外果皮中克隆L-半乳糖脱氢酶(L-galactose dehydrogenase,GalDH)cDNA,进行生物信息学分析并构建其RNAi植物表达载体,为该基因功能鉴定奠定基础。【方法】应用同源序列克隆法克隆"皇家嘎拉"苹果GalDH基因,并进行生物信息学分析;利用噬菌体同源重组原理构建其RNAi植物表达载体pMDR-GalDH,并导入农杆菌EHA105。【结果】通过RT-PCR扩增得到1条约1.1 kb的条带,序列分析表明,该片段长为1 111 bp,包含一个975 bp的开放阅读框,可编码324个氨基酸残基,包含有醛酮还原酶的保守结构域和3个跨膜螺旋结构,其理论上的等电点pI为5.44,蛋白分子质量为34.99 ku;聚类分析显示,苹果GalDH核苷酸与已知其他植物GalDH核苷酸的相似性均在95%以上,判断其为苹果GalDH基因cDNA全长,命名为MdGal DH(GenBank登录号为:GQ131419)。另外,通过RT-PCR获得GalDH基因保守区段,成功构建了其RNAi植物表达载体pMDR-GalDH。【结论】从"皇家嘎拉"苹果中克隆了GalDHcDNA的编码区全长,并构建了该基因的RNAi植物表达载体。 展开更多

关键词 苹果 l-半乳糖脱氢酶 基因克隆 RNAi植物表达载体

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刺梨半乳糖内酯脱氢酶的酶促反应条件优化

11

作者 刘卫 黄伟 +2 位作者 安华明 杨曼 张雪 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第8期213-215,共3页

为进一步探明刺梨半乳糖内酯脱氢酶（GalLDH）的作用机理及其对维生素C（AsA）合成效率的影响,以高AsA果实刺梨为材料,研究了AsA合成关键酶——GalLDH酶促反应的动力学参数。结果表明,刺梨GalLDH反应的最适温度在30℃左右,最适pH值为8.3... 为进一步探明刺梨半乳糖内酯脱氢酶（GalLDH）的作用机理及其对维生素C（AsA）合成效率的影响,以高AsA果实刺梨为材料,研究了AsA合成关键酶——GalLDH酶促反应的动力学参数。结果表明,刺梨GalLDH反应的最适温度在30℃左右,最适pH值为8.3-9.4,以半乳糖内酯作为反应底物的Km为0.031 mM,最大反应速率Vmax=0.026 U/s。当以古洛糖内酯作为反应底物时,GalLDH也能表现约70%的活性。 展开更多

关键词 刺梨 半乳糖内酯脱氢酶 动力学特征 酶促反应

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水稻L-半乳糖脱氢酶基因的克隆与序列分析

12

作者 邹礼平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第7期2886-2887,2919,共3页

[目的]对水稻L-半乳糖脱氢酶(L-GalDH)基因进行克隆与序列分析。[方法]通过RT-PCR从水稻中克隆了L-GalDH基因,采用GenBank的BLAST程序进行序列分析。[结果]水稻L-GalDH基因的cDNA全长1 340 bp,包含一个长为951 bp的完整开放读码框,推导... [目的]对水稻L-半乳糖脱氢酶(L-GalDH)基因进行克隆与序列分析。[方法]通过RT-PCR从水稻中克隆了L-GalDH基因,采用GenBank的BLAST程序进行序列分析。[结果]水稻L-GalDH基因的cDNA全长1 340 bp,包含一个长为951 bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与其他植物的L-半乳糖脱氢酶基因的同源性较高,其中与大麦的同源性最高,序列一致率为92%,与菠菜的序列同源性稍低,一致率为71%。系统进化分析结果表明不同来源的L-GalDH基因聚为3类。[结论]该研究为L-GalDH基因的功能研究打下了基础。 展开更多

关键词 水稻 l-半乳糖脱氢酶 抗坏血酸 生物合成 基因克隆

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酶解和碱处理对半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体结构的影响 被引量：1

13

作者 孙雪 谢益民 +3 位作者 杨海涛 姚兰 王鹏 范建云 《中国造纸学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期52-55,共4页

以果胶结构单元D-半乳糖醛酸和木素前驱物松柏醇-β-D-葡萄糖苷为原料,在多种生物酶的协同作用下合成了半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体(GDHPC),并分别用酶解(果胶酶)和碱法(1 mol/L的NaOH)对GDHPC进行处理。FT-IR和13C-NMR分析表明,D... 以果胶结构单元D-半乳糖醛酸和木素前驱物松柏醇-β-D-葡萄糖苷为原料,在多种生物酶的协同作用下合成了半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体(GDHPC),并分别用酶解(果胶酶)和碱法(1 mol/L的NaOH)对GDHPC进行处理。FT-IR和13C-NMR分析表明,D-半乳糖醛酸和木素脱氢聚合物之间形成了以苯甲醚键和酯键2种形式连接的木素-碳水化合物连接键;酶解和碱法处理都能在一定程度上削弱D-半乳糖醛酸的特征峰;碱法处理能降解酯键,但对苯甲醚键的降解作用并不明显;酶解对酯键和苯甲醚键的降解效果均较差。 展开更多

关键词 半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体 果胶酶 漆酶 13C-NMR

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脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激 被引量：15

14

作者 朱涛 管弦 +1 位作者 张维 王导新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1238-1241,共4页

目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和模型组(LPS组)。使用ELISA对肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和T... 目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和模型组(LPS组)。使用ELISA对肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和TNF-α水平进行测定。测量BALF中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。对肺组织进行湿/干比(wetto dry ratio,W/D)测定。HE染色用于肺组织病理变化观察和肺组织损伤评分测量。RT-PCR被用于iNOS mRNA的测定。使用Western blot测定iNOS和β-肌动蛋白(β-actin)蛋白的表达。结果 LPS干预后小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平明显上升而SOD水平显著下降,W/D比值和肺组织损伤评分明显升高,iNOS mRNA和蛋白的表达明显增加。LPS+DAS组小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平、W/D比值、肺组织损伤评分、iNOS mRNA和蛋白的表达较LPS组小鼠明显下降;同时BALF中SOD水平较LPS组小鼠明显增加。结论 DAS可能是通过抑制iNOS表达减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。 展开更多

关键词 脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯 急性肺损伤 氧化应激 诱导性一氧化氮合酶

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重组酿酒酵母甘油-3-磷酸脱氢酶的诱导与纯化

15

作者 苏明杰 赵红梅 《饲料研究》 CAS 2016年第2期42-44,共3页

为了解重组酿酒酵母GCY1基因表达甘油-3-磷酸脱氢酶的情况,以SD-URA 2%葡萄糖、3×YP+6%半乳糖、SC-URA 2%半乳糖和SC-URA2%半乳糖加5%1 M Na Cl等4种培养基诱导培养,粉碎破壁酵母,采用Profinia蛋白质全自动高速纯化,并用SDS-PAGE... 为了解重组酿酒酵母GCY1基因表达甘油-3-磷酸脱氢酶的情况,以SD-URA 2%葡萄糖、3×YP+6%半乳糖、SC-URA 2%半乳糖和SC-URA2%半乳糖加5%1 M Na Cl等4种培养基诱导培养,粉碎破壁酵母,采用Profinia蛋白质全自动高速纯化,并用SDS-PAGE凝胶电泳测定分子质量。结果显示:含有GCY1基因的酿酒酵母在25℃下振动培养48 h,其OD600 nm吸光值:3×YP+6%半乳糖培养物OD值为8.75,而3×YP+2%半乳糖+5%1 M Na Cl培养物OD值为7.35。采用Profinia低压液相色谱纯化,只有3×YP+2%半乳糖+5%1 M Na Cl培养基中酿酒酵母表达甘油-3-磷酸脱氢酶,且经SDS-PAGE凝胶电泳测得分子质量为65 ku。 展开更多

关键词 酿酒酵母 甘油-3-磷酸脱氢酶 半乳糖 Profinia SDS-PAGE凝胶电泳

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DL0608对D-半乳糖诱导大鼠晶状体损伤的保护作用

16

作者 杨欢 程笑 +3 位作者 张惠芳 林溢煌 王月华 杜冠华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期205-205,共1页

目的探讨活性化合物DL0608对D-半乳糖诱导大鼠晶状体损伤的作用及机制.方法连续4周腹腔注射D-半乳糖5g·kg-1建立糖尿病性白内障大鼠模型,同时灌胃给予DL060830、100mg·kg^-1.测定晶状体组织中GSH、MDA、SOD、AR、SDH及CRYα-... 目的探讨活性化合物DL0608对D-半乳糖诱导大鼠晶状体损伤的作用及机制.方法连续4周腹腔注射D-半乳糖5g·kg-1建立糖尿病性白内障大鼠模型,同时灌胃给予DL060830、100mg·kg^-1.测定晶状体组织中GSH、MDA、SOD、AR、SDH及CRYα-B水平.结果与模型组对比,DL0608能够提高大鼠晶状体内GSH活性,减少氧化产物MDA的产生,从而减轻晶状体的氧化损伤,但对SOD活性无明显影响;此外,DL0608能够抑制D-半乳糖诱导的大鼠晶状体AR活性增高及CRYα-B水平增高,但对晶状体SDH无明显影响.结论DL0608对D-半乳糖诱导的糖尿病性白内障晶状体损伤具有一定的改善作用,机制可能与改善晶状体抗氧化活性及抑制AR活性增高及CRYα-B水平增高相关. 展开更多

关键词 糖尿病并发症 D-半乳糖 丙二醛(MDA) 超氧化物歧化酶(SOD) 醛糖还原酶(AR) 山梨醇脱氢酶(SDH) 晶体蛋白α-B(CRYα-B)

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不结球白菜维生素C积累与相关酶活性研究 被引量：11

17

作者 宋玉萍 李英 +2 位作者 高红亮 王建军 侯喜林 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2240-2244,共5页

对不结球白菜‘常州乌塌菜’、‘矮脚黄’和‘二青’生长过程中维生素C(AsA)含量和L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GalLDH)、抗坏血酸氧化酶(AAO)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的活性... 对不结球白菜‘常州乌塌菜’、‘矮脚黄’和‘二青’生长过程中维生素C(AsA)含量和L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GalLDH)、抗坏血酸氧化酶(AAO)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的活性进行测定分析,结果显示,AsA含量的积累呈先升高后下降的模式,且‘常州乌塌菜’中的AsA含量显著高于‘矮脚黄’和‘二青’;GalLDH活性与AsA含量变化趋势基本一致,且3个品种中GalL-DH活性与AsA积累之间均呈极显著的正相关关系;AAO和APX活性的变化趋势则与AsA含量变化趋势相反,而‘常州乌塌菜’中AAO活性显著低于其它2个品种,但APX活性无显著差异;MDAR和DHAR的活性则主要表现在生长后期。结果表明,不结球白菜中AsA含量主要受GalLDH酶活性调节,同时AsA代谢酶AAO也对AsA积累起到了重要作用,而MDAR和DHAR酶活性对AsA积累的作用主要在生长后期。 展开更多

关键词 不结球白菜 抗坏血酸 l-半乳糖酸-1 4-内酯脱氢酶 抗坏血酸氧化酶 抗坏血酸过氧化物酶

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不同蔬菜产品器官抗坏血酸含量与其相关酶活性的关系 被引量：3

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作者 李坤 韩道杰 +2 位作者 许贞杭 王英华 于贤昌 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期257-262,共6页

以抗坏血酸(AsA)含量差异较大的甜椒、番茄、马铃薯、萝卜和黄瓜的产品器官为试材,研究不同发育期产品器官AsA含量与其相关酶活性的关系。结果表明,5种蔬菜不同发育期产品器官AsA含量与DHAR和GalLDH活性变化趋势基本一致。以5种蔬菜产... 以抗坏血酸(AsA)含量差异较大的甜椒、番茄、马铃薯、萝卜和黄瓜的产品器官为试材,研究不同发育期产品器官AsA含量与其相关酶活性的关系。结果表明,5种蔬菜不同发育期产品器官AsA含量与DHAR和GalLDH活性变化趋势基本一致。以5种蔬菜产品器官形成末期AsA含量与其相关酶活性的相关性分析得知,AsA含量与DHAR活性呈显著正相关(r=0.9423,P<0.05),与GalLDH活性的相关性也较显著(r=0.8597,P<0.10);AsA+DHA含量与GalLDH活性相关性明显(r=0.7904,P<0.15)。AsA含量与MDHAR、AAO和APX活性无显著相关性。这说明不同物种蔬菜产品器官AsA含量存在较大差异的原因与其GalLDH和DHAR活性存在较大差异密切相关,MDHAR、AAO和APX活性不是影响AsA含量的主要因素。 展开更多

关键词 蔬菜 产品器官 抗坏血酸含量 半乳糖内酯脱氢酶 脱氢抗坏血酸还原酶

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保加利亚乳杆菌产酸关键酶的研究 被引量：4

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作者 孙懿琳 方伟 +1 位作者 田辉 霍贵成 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期187-191,共5页

以四株德氏乳杆菌保加利亚亚种为出发菌株,详细比较了四株菌产酸关键酶酶活的差异,从而找出菌株KLDS1.1006和KLDS1.1011后酸化较弱的主要原因及控制其产酸的关键酶。结果表明,H^+-ATPase可以控制菌株的能量代谢,是产酸关键酶;β-半乳糖... 以四株德氏乳杆菌保加利亚亚种为出发菌株,详细比较了四株菌产酸关键酶酶活的差异,从而找出菌株KLDS1.1006和KLDS1.1011后酸化较弱的主要原因及控制其产酸的关键酶。结果表明,H^+-ATPase可以控制菌株的能量代谢,是产酸关键酶;β-半乳糖苷酶对于分解乳糖产酸的贡献非常大,是乳糖代谢关键酶;乳酸脱氢酶和蛋白酶与后发酵产酸过程并没有必然联系;H^+-ATPase和β-半乳糖苷酶酶活性较弱是引起菌株KLDS1.1006和KLDS1.1011后酸化程度弱的根本原因。 展开更多

关键词 德氏乳杆菌保加利亚亚种 H^+-ATPASE Β-半乳糖苷酶 乳酸脱氢酶 蛋白酶

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小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶1介导糖尿病性血管内皮细胞损伤修复的研究 被引量：3

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作者 李萍 李丽丽 +6 位作者 李艳霞 马晓芳 边希云 肖晓琳 张春艳 刘凤婷 刘晓智 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期414-418,共5页

目的利用小泛素相关修饰体(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(SUMO1)修饰。方法人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、... 目的利用小泛素相关修饰体(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(SUMO1)修饰。方法人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、SUMO1、PGC-1α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平;实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(TFAM)、核呼吸因子2α(NRF-2α)和雌激素受体相关受体α(ERRα)的mRNA表达;ELISA测定乳酸脱氢酶(LDH);细胞划痕愈合方法、Transwell方法和体外血管模拟形成实验分别检测细胞自愈、迁移和形成血管拟态的能力。结果与对照组比较,高糖组共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显升高,SENP1蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显降低,细胞划痕修复能力及模拟血管形成能力下降(P<0.05,P<0.01)。与高糖组比较,SENP1组SENP1蛋白表达明显升高,共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显升高,细胞划痕修复和迁移能力及模拟血管形成能力明显改善(P<0.05,P<0.01)。对照组、高糖组和SENP1组细胞上清液中LDH水平比较,差异有统计学意义[(24.66±6.39)ng/ml vs(302.45±30.54)ng/ml vs(174.08±21.03)ng/ml,P<0.01]。结论SENP1能够诱导PGC-1α发生去SUMO修饰,解除其对PGC-1α下游转录因子的抑制作用,改善线粒体功能,抑制高糖诱导的血管内皮细胞功能损伤作用。 展开更多

关键词 SUMO1蛋白 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 核呼吸因子类 l-乳酸脱氢酶

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