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三种去除原代星形胶质细胞中小胶质细胞方法的比较
1
作者
陈红艳
雷震
+4 位作者
王春婷
文欣茹
蔺雪梅
纪玉强
吴松笛
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期565-571,共7页
目的:本研究拟对3种去除原代星形胶质细胞培养物中小胶质细胞的方法进行比较分析,以探讨不同纯化方法的特点,为研究者选择合适的原代星形胶质细胞培养方法提供依据。方法:将SD乳鼠大脑皮质细胞解离并铺板,根据纯化方法的不同分组为:未...
目的:本研究拟对3种去除原代星形胶质细胞培养物中小胶质细胞的方法进行比较分析,以探讨不同纯化方法的特点,为研究者选择合适的原代星形胶质细胞培养方法提供依据。方法:将SD乳鼠大脑皮质细胞解离并铺板,根据纯化方法的不同分组为:未纯化组(Control组)、传统振荡纯化组(TO组)、阿糖胞苷(AraC)+TO组和AraC+L-亮氨酸甲酯(LME)组。光学显微镜下观察各组细胞传代后细胞形态,并通过免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞比例。AlamarBlue HS检测各组细胞传代后细胞活力。细胞计数统计不同纯化处理后获得的细胞产量。结果:相较于Control组,TO组细胞传代后的细胞纯度(P<0.0001)和细胞活力(P<0.0001)显著增加,纯化后获得的细胞总量显著下降(P<0.001),这些趋势在AraC+TO和AraC+LME组更加明显,AraC+TO和AraC+LME组细胞传代后的细胞纯度(P<0.0001或P<0.0001)和细胞活力(P<0.01或P<0.001)均显著高于TO组,而获得的细胞总量相较于TO组均有显著下降(P<0.01或P<0.01),AraC+TO和AraC+LME组之间无显著差异。结论:TO方法获得富含星形胶质细胞的培养物(纯度>90%),并且细胞产量高,可以应用于常规细胞研究,而AraC+TO和AraC+LME方法获得高度富集的星形胶质细胞培养物(纯度>99%),可以应用于神经炎症背景下星形胶质细胞精确作用研究。
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关键词
原代培养
星形胶质细胞
小胶质细胞
阿糖胞苷
l-亮氨酸甲酯
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职称材料
题名
三种去除原代星形胶质细胞中小胶质细胞方法的比较
1
作者
陈红艳
雷震
王春婷
文欣茹
蔺雪梅
纪玉强
吴松笛
机构
西安市神经免疫疾病创新转化重点实验室
西北大学生命科学学院
陕西省眼科研究所
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期565-571,共7页
基金
陕西省科技计划项目(2024SF-YBXM-045)
陕西省中医药管理局项目(2022-SLRH-LJ-013)
+1 种基金
西安市科技计划项目(24YXYJ0055)
西安市卫生健康委员会中医药科研项目(SZJ202403)。
文摘
目的:本研究拟对3种去除原代星形胶质细胞培养物中小胶质细胞的方法进行比较分析,以探讨不同纯化方法的特点,为研究者选择合适的原代星形胶质细胞培养方法提供依据。方法:将SD乳鼠大脑皮质细胞解离并铺板,根据纯化方法的不同分组为:未纯化组(Control组)、传统振荡纯化组(TO组)、阿糖胞苷(AraC)+TO组和AraC+L-亮氨酸甲酯(LME)组。光学显微镜下观察各组细胞传代后细胞形态,并通过免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞比例。AlamarBlue HS检测各组细胞传代后细胞活力。细胞计数统计不同纯化处理后获得的细胞产量。结果:相较于Control组,TO组细胞传代后的细胞纯度(P<0.0001)和细胞活力(P<0.0001)显著增加,纯化后获得的细胞总量显著下降(P<0.001),这些趋势在AraC+TO和AraC+LME组更加明显,AraC+TO和AraC+LME组细胞传代后的细胞纯度(P<0.0001或P<0.0001)和细胞活力(P<0.01或P<0.001)均显著高于TO组,而获得的细胞总量相较于TO组均有显著下降(P<0.01或P<0.01),AraC+TO和AraC+LME组之间无显著差异。结论:TO方法获得富含星形胶质细胞的培养物(纯度>90%),并且细胞产量高,可以应用于常规细胞研究,而AraC+TO和AraC+LME方法获得高度富集的星形胶质细胞培养物(纯度>99%),可以应用于神经炎症背景下星形胶质细胞精确作用研究。
关键词
原代培养
星形胶质细胞
小胶质细胞
阿糖胞苷
l-亮氨酸甲酯
Keywords
primary culture
astrocyte
microglial cell
cytosineβ-D-arabinofuranoside
l-
leucine methyl ester
分类号
R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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题名
作者
出处
发文年
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1
三种去除原代星形胶质细胞中小胶质细胞方法的比较
陈红艳
雷震
王春婷
文欣茹
蔺雪梅
纪玉强
吴松笛
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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