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高效液相色谱法同时测定微生物酶法产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺反应体系中5种物质及其样品处理方法对色谱峰的影响分析 被引量：3
1
作者 魏照辉 张震宇 孙付保 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1317-1322,共6页
建立了同时测定微生物酶法产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺反应体系中5种物质(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、L-谷氨酰胺、L-丙氨酸甲酯、L-谷氨酸、L-丙氨酰-L-丙氨酸)的高效液相色谱分析方法。考察了样品处理中存在的发酵液、磷酸、三氯乙酸对色谱峰的... 建立了同时测定微生物酶法产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺反应体系中5种物质(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、L-谷氨酰胺、L-丙氨酸甲酯、L-谷氨酸、L-丙氨酰-L-丙氨酸)的高效液相色谱分析方法。考察了样品处理中存在的发酵液、磷酸、三氯乙酸对色谱峰的影响,建立了一种对色谱峰无干扰的样品处理方法。选用邻苯二甲醛(OPA)为衍生剂,以在线衍生的方式实现了标准品或样品的柱前自动衍生。选用C18色谱柱进行分离,柱温40℃,以12.5 mmol/L磷酸盐缓冲液(88%,pH 7.4)与12%乙腈为流动相进行等度洗脱,流速为1 m L/min,在λex=338 nm,λ_(em)=450 nm下进行荧光检测,外标法定量。结果显示,该色谱条件下5种物质的测定线性范围广,相关系数均大于0.999 4。低、中、高3组加标水平下的回收率为93.5%~104.9%,相对标准偏差(RSD)小于7%。1日内间隔2 h进行6次进样,5种物质保留时间的RSD均小于0.12%,峰面积RSD均小于1.2%。该方法操作简单,分离度与灵敏度高,定量精确,重复性好。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 柱前自动化衍生 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺反应体系 样品处理方法
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽对杂交施氏鲟幼鱼生长和能量收支的影响
2
作者 王晗雅 刘烊廷 +5 位作者 杜飞 王帅 陆绍霞 韩世成 王常安 刘红柏 《动物营养学报》 北大核心 2025年第4期2587-2598,共12页
本试验旨在探究饲料中添加L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对杂交施氏鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baerii)幼鱼生长和能量收支的影响。选取450尾初始体重为(21.23±0.17)g的杂交施氏鲟,随机分成5组,每组3个重复,每... 本试验旨在探究饲料中添加L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对杂交施氏鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baerii)幼鱼生长和能量收支的影响。选取450尾初始体重为(21.23±0.17)g的杂交施氏鲟,随机分成5组,每组3个重复,每个重复30尾。对照组(G1组)饲喂基础饲料,试验组分别饲喂在基础饲料中添加0.25%(G2组)、0.50%(G3组)、0.75%(G4组)和1.00%Ala-Gln(G5组)的饲料。试验期56 d。结果表明:1)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,试验鱼终末体重、增重率和肥满度逐渐提高,饲料系数逐渐降低,其中与G1组相比,G5组终末体重显著提高(P<0.05),G4组和G5组肥满度显著提高(P<0.05)。2)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,全鱼粗蛋白质含量呈现先降低后升高的变化趋势,其中G4组全鱼粗蛋白质含量最高;G5组全鱼粗脂肪含量最低,显著低于G2组(P<0.05)。3)饲料中添加Ala-Gln未改变全鱼氨基酸组成模式。G5组全鱼总氨基酸含量最高,显著高于G4组(P<0.05)。4)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,血清谷氨酰胺和丙氨酸含量均逐渐升高,与G1组相比,G3组、G4组和G5组血清谷氨酰胺和丙氨酸含量显著提高(P<0.05)。5)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,粪能和排泄能逐渐降低,其中与G1组相比,G3组、G4组和G5组粪能和排泄能显著降低(P<0.05);G5组生长能最高,显著高于G1组和G2组(P<0.05);同时,G5组代谢能显著低于G1组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加适量Ala-Gln可提高杂交施氏鲟幼鱼终末体重和肥满度,促进机体蛋白质合成,并提高能量利用效率。在本试验条件下,杂交施氏鲟幼鱼饲料中以添加0.75%~1.00%Ala-Gln效果较佳。 展开更多
关键词 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽 施氏鲟 生长性能 能量收支
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成反应研究 被引量：1
3
作者 唐蓉萍 周艳青 +2 位作者 韩庆荣 吕维华 伍家卫 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期521-524,共4页
以L-乳酸乙酯和L-谷氨酰胺为原料,通过L-乳酸乙酯氯化、水解、酰化得到D-2-氯-丙酰基氯,再将D-2-氯-丙酰基氯与4-谷氨酰胺缩合后氨解,得到目标化合物,总收率43%,纯度(HPLC)大于98%。缩合反应的溶剂甲苯不需要脱水处理。重点讨论了中间体... 以L-乳酸乙酯和L-谷氨酰胺为原料,通过L-乳酸乙酯氯化、水解、酰化得到D-2-氯-丙酰基氯,再将D-2-氯-丙酰基氯与4-谷氨酰胺缩合后氨解,得到目标化合物,总收率43%,纯度(HPLC)大于98%。缩合反应的溶剂甲苯不需要脱水处理。重点讨论了中间体D-2-氯-丙酸的合成。 展开更多
关键词 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺 合成 二肽
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10 t/a中试规模制备二肽L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 被引量：8
4
作者 陈然 钱绍松 +2 位作者 吴晓燕 贾晓娟 焦庆才 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期958-960,共3页
以邻苯二甲酰基为保护基,采用混合酸酐法接肽,中试规模制备了L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(力肽)。结果表明,制备L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的最佳条件为:N-Pht-L-丙氨酸接肽的最佳溶剂是乙酸乙酯,温度为0℃,n(N-Pht-L-丙氨酸)∶n(L-谷氨酰胺)=1∶1。... 以邻苯二甲酰基为保护基,采用混合酸酐法接肽,中试规模制备了L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(力肽)。结果表明,制备L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的最佳条件为:N-Pht-L-丙氨酸接肽的最佳溶剂是乙酸乙酯,温度为0℃,n(N-Pht-L-丙氨酸)∶n(L-谷氨酰胺)=1∶1。以L-丙氨酸计,总摩尔收率为34.4%。目标产物质量分数达98.6%。 展开更多
关键词 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺 混合酸酐法 邻苯二甲酰基
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成及初步鉴定 被引量：4
5
作者 李永新 覃军 赵树铭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期571-572,共2页
目的　探讨L 丙氨酰 L 谷氨酰胺双肽的化学合成方法。方法　以L 谷氨酰胺和 2 D 氯丙酰氯为原料 ,通过缩合、胺化等反应 ,合成L 丙氨酰 L 谷氨酰胺双肽 ;采用熔点、氨基酸组分分析、元素分析、质谱等方法对其结构进行鉴别 ,用高效液... 目的　探讨L 丙氨酰 L 谷氨酰胺双肽的化学合成方法。方法　以L 谷氨酰胺和 2 D 氯丙酰氯为原料 ,通过缩合、胺化等反应 ,合成L 丙氨酰 L 谷氨酰胺双肽 ;采用熔点、氨基酸组分分析、元素分析、质谱等方法对其结构进行鉴别 ,用高效液相色谱法确定其纯度。结果　合成的双肽经理化检测 ,质量高。结论　采用本法合成谷氨酰胺双肽具有简便、快速、质量高等优点。 展开更多
关键词 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺 合成 缩合 胺化
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺对杂交鲟体成分、肠道形态的影响 被引量：1
6
作者 王常安 李晋南 +2 位作者 王连生 赵志刚 徐奇友 《水产学杂志》 CAS 2017年第2期12-16,共5页
将初始体质量(0.42±0.05)g的杂交鲟(Acipenser schrenckii♀×A.baerii♂)仔鱼饲养在室内循环水养殖系统中,投喂添加0(G1)、0.25%(G2)、0.5%(G3)、0.75%(G4)和1.0%(G5)L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-AG)的5种等氮饲料,每个处理3个重复... 将初始体质量(0.42±0.05)g的杂交鲟(Acipenser schrenckii♀×A.baerii♂)仔鱼饲养在室内循环水养殖系统中,投喂添加0(G1)、0.25%(G2)、0.5%(G3)、0.75%(G4)和1.0%(G5)L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-AG)的5种等氮饲料,每个处理3个重复,每个重复1500尾鱼,研究L-AG水平对杂交鲟体成分和十二指肠形态的影响。56d的养殖结果表明:饲料中添加0.25%和5.0%L-AG对全鱼粗蛋白含量影响不显著(P>0.05),但添加0.75%和1.0%L-AG显著提高了全鱼粗蛋白含量(P<0.05)。添加0.25%~1.0%L-AG对全鱼水分、粗脂肪和灰分含量影响不显著(P>0.05)。与对照组相比,添加0.25%~1.0%L-AG对肠道绒毛高度、微绒毛高度和肌层厚度均未产生显著影响(P>0.05)。结果表明:外源补充0.75%~1.0%L-AG可显著提高杂交鲟仔鱼粗蛋白含量,但添加0.25%~1.0%L-AG对十二指肠形态不产生显著影响。 展开更多
关键词 杂交鲟 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺 体成分 十二指肠形态
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酶法产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺重组大肠杆菌pepD/pepN基因的敲除及其发酵优化 被引量：4
7
作者 刘沛沛 张震宇 +1 位作者 孙付保 周豪 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期7-14,共8页
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,L-Ala-L-Gln),是目前国内外公认的L-谷氨酰胺载体,在临床医学和营养学等领域有广泛应用。为了减少丙谷二肽在生物酶法生产过程中菌体对其降解,利用λRed同源重组系统,敲除大肠杆菌中肽酶D和... L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,L-Ala-L-Gln),是目前国内外公认的L-谷氨酰胺载体,在临床医学和营养学等领域有广泛应用。为了减少丙谷二肽在生物酶法生产过程中菌体对其降解,利用λRed同源重组系统,敲除大肠杆菌中肽酶D和氨肽酶对应的编码基因。与野生型菌株相比,双敲除突变菌株的全细胞酶活提高了0.29倍。对该菌株进行摇瓶发酵优化,得到最优培养基为(g/L):葡萄糖12、酵母提取物10、胰蛋白胨10、(NH_4)_2SO_4 1、KH_2PO_4 3、K_2HPO_4 1、MgSO_4 0.2;最优发酵温度为27℃;最佳反应条件为:Gln 200 mmol/L、Ala-Ome·HCl 200 mmol/L,反应p H 8.5,反应温度25℃。在最优条件下发酵36 h,丙谷二肽产量达到了14.51g/L反应液,是优化前的4.74倍。 展开更多
关键词 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺 大肠杆菌 生物酶法 基因敲除 λ RED同源重组 发酵优化
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺对低氧胁迫后军曹鱼幼鱼生长性能、血清生化与抗氧化指标的影响 被引量：6
8
作者 温震威 黄建盛 +6 位作者 陈有铭 李豫 黄鉴鹏 欧光海 谢瑞涛 蒋鑫涛 陈刚 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期2503-2513,共11页
本试验旨在为探究L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Ala-Gln)对低氧胁迫后军曹鱼幼鱼生长性能、血清生化与抗氧化指标的影响。以低氧胁迫14 d后的军曹鱼幼鱼[(105.16±6.01)g]为研究对象,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。4组试验鱼分别投... 本试验旨在为探究L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Ala-Gln)对低氧胁迫后军曹鱼幼鱼生长性能、血清生化与抗氧化指标的影响。以低氧胁迫14 d后的军曹鱼幼鱼[(105.16±6.01)g]为研究对象,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。4组试验鱼分别投喂Ala-Gln添加量为0(对照组)、0.5%、1.0%、1.5%配制4种等氮等脂的试验饲料,并分别于试验第7、14、28天采集血清进行指标测定。结果显示:1)与对照组相比,在饲喂14与28 d时,1.0%组和1.5%组的增重率和特定生长率显著升高(P<0.05),饲料系数显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,在饲喂28 d时,1.0%组和1.5%组血清中甘油三酯和总胆固醇含量显著降低(P<0.05),所有添加Ala-Gln组血清中葡萄糖、总蛋白和白蛋白含量显著升高(P<0.05),1.5%组血清中谷草转氨酶与谷丙转氨酶活性显著升高(P<0.05)。3)与对照组相比,在饲喂28 d时,1.0%组和1.5%组血清中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高(P<0.05),血清丙二醛含量显著降低(P<0.05)。以上结果表明,饲料中添加1.0%Ala-Gln可提高军曹鱼幼鱼血清中TP和ALB的含量以及减少血清中TC和TG的堆积,提高生长性能与抗氧化能力,改善低氧胁迫所带来的氧化损伤。 展开更多
关键词 l-丙氨酰-l-谷氨酰胺 军曹鱼 低氧胁迫 生长性能 血清生化指标 抗氧化能力
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