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谷氨酸脱羧酶(GAD)的研究进展 被引量:24
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作者 许建军 江波 许时婴 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期132-133,131,共3页
谷氨酸脱羧酶(GAD,EC4.1.1.15)是生物体内广泛存在的一种酶,有重要的生理学作用,能催化谷氨酸脱羧生成重要的抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)。GAD用于医疗和食品中具有很大潜力,本文综述了GAD的研究进展和应用。
关键词 谷氨酸脱羧酶(gad) γ-氨基丁酸(GABA)
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大肠杆菌L-谷氨酸脱羧酶定点突变及其酶学性质初步研究 被引量:5
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作者 毕金丽 刘娅 +2 位作者 王建平 史吉平 柳鹏福 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期162-167,共6页
L-谷氨酸脱羧酶(L—glutamate decarboxylase,GAD)是生物法生产GABA的关键酶,但是野生型L-谷氨酸脱羧酶的最适pH过低,这限制了它的工业应用。本文对编码来源于大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的gadB基因进行了定点突变,分别构建了表达野生型... L-谷氨酸脱羧酶(L—glutamate decarboxylase,GAD)是生物法生产GABA的关键酶,但是野生型L-谷氨酸脱羧酶的最适pH过低,这限制了它的工业应用。本文对编码来源于大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的gadB基因进行了定点突变,分别构建了表达野生型GadB和突变型GadBAHT的基因工程菌。在获得高表达的基础上,对两个酶的最适温度、最适pH、温度稳定性和pH稳定性进行了系统研究,证实了突变酶GadBAHT在保持了与野生型相当的催化活性的前提下,表现出更广泛的pH适应能力,在pH3.4~6.2的范围内,仍能保持50%以上的催化活性。突变酶更能适应工业生产的需要,降低生产成本,对于实际应用具有重要价值。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶 定点突变 酶学性质 重组大肠杆菌
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籼稻GAD基因的克隆、序列分析及其植物表达载体构建 被引量:1
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作者 黄志伟 许明 +2 位作者 林忠辉 蔡小玲 郑金贵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1079-1085,共7页
【目的】克隆籼稻谷氨酸脱羧酶(GAD)基因的全长cDNA,并进行序列分析和植物表达载体构建,为改良水稻的营养保健品质奠定基础。【方法】根据已知植物GAD基因的保守区域设计引物,以高GABA籼稻品系"新-9-4"的胚芽为材料,利用RT-PC... 【目的】克隆籼稻谷氨酸脱羧酶(GAD)基因的全长cDNA,并进行序列分析和植物表达载体构建,为改良水稻的营养保健品质奠定基础。【方法】根据已知植物GAD基因的保守区域设计引物,以高GABA籼稻品系"新-9-4"的胚芽为材料,利用RT-PCR和RACE技术克隆GAD基因的全长cDNA;扩增其编码序列,构建双T-DNA植物表达载体。【结果】扩增获得长1962bp的籼稻GAD基因全长cDNA(OsiGAD),包含1479bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。OsiGAD与已报道的水稻GAD基因OsGAD1、OsGAD2、OsGAD3的核苷酸序列同源性分别为67.1%、69.4%、98.3%,推导氨基酸序列的同源性分别为77.6%、70.1%、100.0%。OsiGAD蛋白序列具有磷酸吡哆醛结合位点和与钙调蛋白结合的C端延伸区域;构建了其具有水稻胚乳特异表达特性的双T-DNA植物高效表达载体pCDMAR-OsiGAD-hpt,选择标记基因和OsiGAD基因分别位于此载体的两个不同T-DNA区。【结论】克隆获得的籼稻GAD基因OsiGAD长1962bp,并成功构建了其双T-DNA植物高效表达载体。 展开更多
关键词 籼稻 谷氨酸脱羧酶(gad) γ-氨基丁酸(GABA) 基因克隆 序列分析 载体构建
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羟基马桑毒素及其衍生物对粘虫体内GAD和GABA-T活性的影响
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作者 杜薇薇 李孟楼 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期149-152,共4页
为了探明羟基马桑毒素及其衍生物(T1、T2、T3、T4)对粘虫神经系统的影响以及快速检测对比分析新合成的药物对试虫神经递质γ-氨基丁酸(GABA)相关酶谷氨酸脱羧酶(GAD)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性的影响,通过胃毒和离体2种处理方式... 为了探明羟基马桑毒素及其衍生物(T1、T2、T3、T4)对粘虫神经系统的影响以及快速检测对比分析新合成的药物对试虫神经递质γ-氨基丁酸(GABA)相关酶谷氨酸脱羧酶(GAD)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性的影响,通过胃毒和离体2种处理方式提取粗酶液并采用分光光度法对试虫酶活性进行测定。结果表明,经羟基马桑毒素及其衍生物处理后试虫的GAD酶活受到了抑制,而GABA-T活性被提高,这2种酶影响着试虫体内GABA的含量。离体测定的结果与胃毒处理后试虫体内酶活的变化相似,因此可以采用离体处理方法快速检测新药物对试虫的活性。 展开更多
关键词 羟基马桑毒素 粘虫 谷氨酸脱羧酶(gad) γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T) 活性测定
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巨胚水稻W025糙米浸水后γ-氨基丁酸含量变化的研究 被引量:44
5
作者 刘玲珑 江玲 +6 位作者 刘世家 周时荣 张文伟 王春明 陈亮明 翟虎渠 万建民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1265-1270,共6页
富含γ-氨基丁酸(GABA)的降血压功能水稻正受到越来越多的关注。W025是通过化学诱变和杂交选育而成的水稻新品系,具有巨胚特征,遗传分析表明巨胚基因受单隐性基因控制。进一步研究W025和其原始品种金南风浸水后γ-氨基丁酸(GABA)含量及... 富含γ-氨基丁酸(GABA)的降血压功能水稻正受到越来越多的关注。W025是通过化学诱变和杂交选育而成的水稻新品系,具有巨胚特征,遗传分析表明巨胚基因受单隐性基因控制。进一步研究W025和其原始品种金南风浸水后γ-氨基丁酸(GABA)含量及其合成关键酶———谷氨酸脱羧酶活性的动态,并用半定量RT-PCR检测了2个谷氨酸脱羧酶转录本在浸水过程的表达变化。结果表明,(1)GABA主要集中在胚部,浸水后W025的GABA积累量显著高于金南风。(2)随着浸水时间延长,谷氨酸脱羧酶(GAD)的活性呈逐渐增加趋势,W025胚部的酶活性显著高于金南风。GAD活性的变化与GABA的积累呈显著正相关,表明浸水后种胚GABA的积累与谷氨酸脱羧酶的催化反应有关。(3)2个谷氨酸脱羧酶基因OsGAD1与OsGAD2在W025和金南风之间没有转录水平的差异。提示可能存在其他的谷氨酸脱羧酶基因对浸水后GABA的积累起关键作用。 展开更多
关键词 水稻 巨胚 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶
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谷氨酸脱羧酶抗体和胰岛细胞抗体在IDDM诊断中的价值 被引量:4
6
作者 修玲玲 余斌杰 +5 位作者 梁奕铨 程桦 曾龙驿 姚斌 肖海鹏 许善真 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期51-53,共3页
用放射免疫法测定79例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)和53例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)病人的血清谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体,用ELISA法测定IDDM组的胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素抗体(IAA)。结果ID... 用放射免疫法测定79例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)和53例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)病人的血清谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体,用ELISA法测定IDDM组的胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素抗体(IAA)。结果IDDM组GAD抗体的阳性率为46.8%,初发IDDM(病程不超出1年)与病程超出1年的GAD抗体阳性率分别是62.9%和34.1%。NIDDM及正常对照组未见阳性的GAD抗体。ICA和IAA阳性率分别为49.4%、24.3%。GAD和ICA两项同时测定的阳性率达73.7%。提示GAD与ICA结合使用,可以提高IDDM的检出率。 展开更多
关键词 谷氨酸羧酶 IDDM 抗体 胰岛细胞 糖尿病
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酶法制备D-谷氨酸和γ-氨基丁酸的工艺研究 被引量:7
7
作者 吴晓燕 钱绍松 +2 位作者 李加友 陈然 焦庆才 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期889-892,共4页
考察了大肠杆菌AS1.505的L谷氨酸脱羧酶对L谷氨酸的专一脱羧作用,分析了转化体系温度、pH值等因素对L谷氨酸脱羧酶活力的影响。实验结果表明最佳工艺为:温度37℃,转化体系pH值4.8,菌体浓度6g/L,吐温800.15g/L,菌龄14h,底物浓度50g/L。L... 考察了大肠杆菌AS1.505的L谷氨酸脱羧酶对L谷氨酸的专一脱羧作用,分析了转化体系温度、pH值等因素对L谷氨酸脱羧酶活力的影响。实验结果表明最佳工艺为:温度37℃,转化体系pH值4.8,菌体浓度6g/L,吐温800.15g/L,菌龄14h,底物浓度50g/L。L谷氨酸脱羧酶在最适转化条件下比酶活可以达到15036U。1g湿菌体可重复使用3次共转化DL谷氨酸25g,其中L谷氨酸可以完全转化为γ氨基丁酸。D谷氨酸及γ氨基丁酸的总收率可以分别达到理论收率的87%和85%。 展开更多
关键词 l-谷氨酸脱羧酶 酶法转化 D-谷氨酸 Γ-氨基丁酸 工艺研究
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Lactococcus lactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质 被引量:29
8
作者 许建军 江波 许时婴 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2004年第3期79-84,共6页
采用溶菌酶处理、超声破碎、硫酸铵分级、3次DEAE SepharoseCL 6B层析、SephacrylS 200凝胶过滤等手段,从乳酸菌细胞中分离纯化得到谷氨酸脱羧酶(GAD;EC4.1.1.15).纯化酶的比活力为14.4U/mg,纯化倍数31,回收率3.8%,SDS PAGE得到亚基的... 采用溶菌酶处理、超声破碎、硫酸铵分级、3次DEAE SepharoseCL 6B层析、SephacrylS 200凝胶过滤等手段,从乳酸菌细胞中分离纯化得到谷氨酸脱羧酶(GAD;EC4.1.1.15).纯化酶的比活力为14.4U/mg,纯化倍数31,回收率3.8%,SDS PAGE得到亚基的相对分子质量为65000.L 谷氨酸是测试的18种氨基酸中的惟一作用底物,表明乳酸菌GAD具有高度的底物专一性.酶在pH值3.6~5.4时具有活性,pH值4.7时活性最高,pH值6.0以上时没有活力.耐热性实验表明,pH值4.7条件下处理5h后,60℃时该酶仍能保持80%以上的活性,80℃以上迅速失活,由Lineweaver Burk作图得到的GAD的Km值为1.9mmol/L. 展开更多
关键词 LACTOCOCCUS LACTIS 谷氨酸脱羧酶(gad) 纯化 γ-氨基丁酸(GABA)
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乳酸菌谷氨酸脱羧酶的酶学性质研究 被引量:18
9
作者 刘清 姚惠源 张晖 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期100-104,共5页
本文对一株乳酸菌所产谷氨酸脱羧酶的酶学性质进行了较系统的研究,其中包括酶的热稳定性、pH稳定性及温度、pH和一些化学物质对酶活的影响。结果表明:此酶的最适温度为52℃,最适pH为4.5,米氏常数Km=24mmol。PLP、VB6及Ca2+在一定程度上... 本文对一株乳酸菌所产谷氨酸脱羧酶的酶学性质进行了较系统的研究,其中包括酶的热稳定性、pH稳定性及温度、pH和一些化学物质对酶活的影响。结果表明:此酶的最适温度为52℃,最适pH为4.5,米氏常数Km=24mmol。PLP、VB6及Ca2+在一定程度上都能促进酶活,且在含量小于100μmol时,作用程度为PLP>VB6>Ca2+。乙酸浓度小于0.05mol/L也能提高酶活力。 展开更多
关键词 乳酸菌 谷氨酸脱羧酶 Γ-氨基丁酸 酶学性质
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影响壳聚糖固定化谷氨酸脱羧酶的因素 被引量:3
10
作者 姜启兴 何莎 +2 位作者 张可 于沛沛 夏文水 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2010年第5期15-18,共4页
以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,制备固定化谷氨酸脱羧酶(GAD),并研究固定化反应中各个因素对固定化GAD活力的影响。结果表明,壳聚糖固定化谷氨酸脱羧酶的最佳条件为:戊二醛质量分数3%,处理时间16~24h,处理温度40℃,酶吸附温度4℃、酶... 以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,制备固定化谷氨酸脱羧酶(GAD),并研究固定化反应中各个因素对固定化GAD活力的影响。结果表明,壳聚糖固定化谷氨酸脱羧酶的最佳条件为:戊二醛质量分数3%,处理时间16~24h,处理温度40℃,酶吸附温度4℃、酶吸附时间24h以上,给酶量为70.8mg/g壳聚糖。 展开更多
关键词 壳聚糖 谷氨酸脱羧酶 固定化
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大豆谷氨酸脱羧酶分离纯化及酶学性质研究 被引量:9
11
作者 姚琪 张永忠 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期26-30,共5页
对大豆中的谷氨酸脱羧酶(GAD)进行了提取、纯化及酶学性质的研究。采用硫酸铵分级沉淀技术对大豆中GAD进行了纯化,该酶被纯化了4.7倍。纯化后的大豆GAD最适温度为40℃,最适pH为5.9,大豆GAD的热稳定性较差,在80℃几乎失去活性,但该酶在pH... 对大豆中的谷氨酸脱羧酶(GAD)进行了提取、纯化及酶学性质的研究。采用硫酸铵分级沉淀技术对大豆中GAD进行了纯化,该酶被纯化了4.7倍。纯化后的大豆GAD最适温度为40℃,最适pH为5.9,大豆GAD的热稳定性较差,在80℃几乎失去活性,但该酶在pH 5.0~8.0较稳定,能保持很好的酶活。大豆GAD对底物谷氨酸的Km值为19.4 mmol/L。Mg2+、KCl对大豆GAD活性影响不大,但KI、Ag+、SDS对大豆GAD有抑制作用。Ca2+对大豆GAD有激活作用,当Ca2+浓度为1 500μmol/L时,对大豆GAD激活作用最强,相对酶活能达到160%。大豆GAD与其他植物GAD相比存在差异,并证实可被Ca2+激活。 展开更多
关键词 大豆 谷氨酸脱羧酶 酶学性质
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短乳杆菌谷氨酸脱羧酶的生物信息学分析 被引量:3
12
作者 齐育平 孙蕾 +1 位作者 刘琴英 蒋冬花 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期5-11,共7页
以短乳杆菌(Lactobacillus brevis)Lb-2菌株cDNA为模板克隆了谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)基因。采用在线分析工具及相应软件分析预测了GAD基因核苷酸和氨基酸序列的组成、理化性质、信号肽以及高级结构等,并构建系统发... 以短乳杆菌(Lactobacillus brevis)Lb-2菌株cDNA为模板克隆了谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)基因。采用在线分析工具及相应软件分析预测了GAD基因核苷酸和氨基酸序列的组成、理化性质、信号肽以及高级结构等,并构建系统发育树。该基因序列全长1 407 bp,为一个完整的阅读框,编码468个氨基酸。GAD相对分子量理论预测值和等电点分别是53 517.8 u和5.42,没有跨膜区,没有其他亚细胞定位序列,为亲水性蛋白,与植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和德氏乳酸杆菌(Lactobacillus delbrueckii)的GAD进化关系最近。 展开更多
关键词 短乳杆菌 谷氨酸脱羧酶 生物信息学 基因克隆
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超滤离心在双水相萃取大肠杆菌谷氨酸脱羧酶中的应用 被引量:2
13
作者 李海鑫 孙波 +3 位作者 赵晓 樊庆 孙盛 孔庆敏 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期74-77,共4页
建立聚乙二醇(PEG)/磷酸氢二钾(K2HPO4)双水相体系,通过对大肠杆菌(Escherichia coli AS1.505)细胞进行超声波破碎制得谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)酶液,并利用双水相萃取对GAD进行分离纯化,然后,采用超滤离心对双水相上... 建立聚乙二醇(PEG)/磷酸氢二钾(K2HPO4)双水相体系,通过对大肠杆菌(Escherichia coli AS1.505)细胞进行超声波破碎制得谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)酶液,并利用双水相萃取对GAD进行分离纯化,然后,采用超滤离心对双水相上相中的GAD与PEG进行分离并分别回收。实验结果表明,大部分GAD分配于上相,其纯化倍数为55.60,酶活率为97.78%。通过响应面分析,对超滤离心工艺参数进行优化,确定了超滤离心转速为10 000 r/min,离心时间为20 min,混合液的稀释倍数为5倍,此条件下GAD的回收率为81.52%,PEG的回收率为84.41%。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 双水相萃取 超滤 离心 分离 回收
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发芽绿豆生物转化法富集γ-氨基丁酸 被引量:11
14
作者 郝文静 张晓鸣 黄汉荣 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第5期34-38,共5页
应用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯为衍生化试剂测定发芽绿豆中γ-氨基丁酸(GABA)的含量,并对发芽绿豆生物转化法富集GABA的各影响因素进行研究。结果表明:发芽绿豆生物转化反应的最适反应温度为40℃,最适pH为6.0。当谷氨酸钠的浓度为4... 应用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯为衍生化试剂测定发芽绿豆中γ-氨基丁酸(GABA)的含量,并对发芽绿豆生物转化法富集GABA的各影响因素进行研究。结果表明:发芽绿豆生物转化反应的最适反应温度为40℃,最适pH为6.0。当谷氨酸钠的浓度为4mmol/L时,GABA的生成量最高。Ca2+和维生素B6对GABA都具有激活作用,当Ca2+浓度为1.5mmol/L,维生素B6为1.5mmol/L时,其激活作用最强,分别为未激活时的1.25倍和1.89倍。在该条件下反应2h较合适,由最初的几乎检测不到GABA,到最终能达到796.8mg/100g.干基。由于生物酶转化法生产GABA安全,条件温和,无副反应等原因非常适合应用于食品领域。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 发芽绿豆 生物转化 谷氨酸脱羧酶
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发芽粟谷中谷氨酸脱羧酶的主要酶学性质初探 被引量:5
15
作者 白青云 曾波 顾振新 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第3期1268-1270,1272,共4页
[目的]探讨发芽粟谷[Setaria italica(L.)Beauv.]中谷氨酸脱羧酶(GAD)的主要酶学性质。[方法]以发芽粟谷为试材,研究发芽粟谷GAD的活性及其主要酶学性质。[结果]发芽粟谷GAD最适温度为40℃,其耐热性较差,32℃保温1 h后其酶活保持率为86.... [目的]探讨发芽粟谷[Setaria italica(L.)Beauv.]中谷氨酸脱羧酶(GAD)的主要酶学性质。[方法]以发芽粟谷为试材,研究发芽粟谷GAD的活性及其主要酶学性质。[结果]发芽粟谷GAD最适温度为40℃,其耐热性较差,32℃保温1 h后其酶活保持率为86.3%;发芽粟谷GAD最适pH值为5.5,在pH值5.0~5.5范围内酶活保持率在80.0%以上;发芽粟GAD对Glu的Km为22.36mmol/L,Vmax为2.28μmol/min;Ca2+、Mg2+、Li+、PLP和VB6对发芽粟谷GAD活力具有促进作用,而Zn2+、La3+、Cu2+起抑制作用,Mn2+、Na+、Fe2+和EGTA则无显著影响。[结论]该研究可为利用发芽粟谷内源GAD富集GABA提供理论依据。 展开更多
关键词 发芽粟谷 谷氨酸脱羧酶(gad) γ-氨基丁酸(GABA) 酶学性质
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糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体的测定及其意义 被引量:4
16
作者 黄红兰 李凡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期424-425,共2页
目的 :通过对谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD Ab)的测定 ,了解其在糖尿病的诊断、分型和预测中的应用价值。方法 :应用间接ELISA法测定 4 3例Ⅰ型糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶 (GAD)自身抗体 ,并以Ⅱ型糖尿病患者 2 5例及正常人 6 0例作对照。结... 目的 :通过对谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD Ab)的测定 ,了解其在糖尿病的诊断、分型和预测中的应用价值。方法 :应用间接ELISA法测定 4 3例Ⅰ型糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶 (GAD)自身抗体 ,并以Ⅱ型糖尿病患者 2 5例及正常人 6 0例作对照。结果 :Ⅰ型糖尿病患者的GAD Ab阳性率高达 76 74 % (33 4 3) ,Ⅱ型糖尿病患者为 1 6 % (4 2 5 ) ,而正常人无 1例阳性。结论 :GAD Ab对糖尿病的诊断。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 抗体 Ⅰ型糖尿病 诊断
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大鼠脑谷氨酸脱羧酶基因的cDNA克隆及序列分析 被引量:3
17
作者 宋学文 赵崇 +3 位作者 邓彤 蔡军 何炜 张镜宇 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第5期544-546,共3页
胰岛β-细胞自身抗原蛋白之一是脑中谷氨酸脱羧酶(Glutamicaciddecarboxylase,GAD,EC4.1.1.15)同源物。以双链cDNA为模板,用PCR方法快速克隆了Wistar大鼠脑GAD基因的cD... 胰岛β-细胞自身抗原蛋白之一是脑中谷氨酸脱羧酶(Glutamicaciddecarboxylase,GAD,EC4.1.1.15)同源物。以双链cDNA为模板,用PCR方法快速克隆了Wistar大鼠脑GAD基因的cDNA,将此包括编码593个氨基酸的全长DNA片段重组入pUC质粒并用双脱氧末端终止法测定了全部序列,证明其全长为1779bp.经比较发现Wistar大鼠脑与Russell报导的大鼠脑GAD基因序列,有一处碱基的差别,但并不涉及氨基酸的改变。同时还对用PCR扩增长片段DNA进行了方法学上的探讨。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 基因 CDNA克隆 序列分析
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谷氨酸脱羧酶工程菌的发酵工艺及酶学性质 被引量:5
18
作者 陈争依 刘均忠 +1 位作者 刘茜 焦庆才 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期765-769,共5页
对谷氨酸脱羧酶(GAD)工程菌DM201的发酵及转化条件进行优化,分析了发酵过程中异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)诱导条件、转化体系pH、底物浓度和金属离子等因素对谷氨酸脱羧酶活力的影响。发酵过程中最佳IPTG诱导条件为:浓度0.4mmol/L... 对谷氨酸脱羧酶(GAD)工程菌DM201的发酵及转化条件进行优化,分析了发酵过程中异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)诱导条件、转化体系pH、底物浓度和金属离子等因素对谷氨酸脱羧酶活力的影响。发酵过程中最佳IPTG诱导条件为:浓度0.4mmol/L、时间5h、温度30℃;转化温度45℃,pH=4.0,ρ(L-谷氨酸)≈110g/L,镁离子在50mmol/L和5mmol/L浓度时对谷氨酸脱羧酶酶活有稳定作用,铜锌离子对其酶活的抑制作用显著。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 异丙基-β—D-巯基半乳糖苷诱导 酶活 基因工程 生物工程
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表达谷氨酸脱羧酶重组枯草芽孢杆菌的构建及其发酵条件的优化 被引量:6
19
作者 丁伟 张明俐 +2 位作者 史吉平 柳鹏福 宋礼华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期194-198,共5页
谷氨酸脱羧酶(GAD)是生物合成γ-氨基丁酸(GABA)的关键酶,本研究通过基因工程构建了一株产GAD的重组枯草芽孢杆菌,并对其产GAD的发酵条件进行优化。分别通过单因素法、正交实验、极差分析和响应面法确定了最佳培养基成分(g/L)及发酵条件... 谷氨酸脱羧酶(GAD)是生物合成γ-氨基丁酸(GABA)的关键酶,本研究通过基因工程构建了一株产GAD的重组枯草芽孢杆菌,并对其产GAD的发酵条件进行优化。分别通过单因素法、正交实验、极差分析和响应面法确定了最佳培养基成分(g/L)及发酵条件为:蔗糖23.5,豆粕10、乙酸铵为8.5、磷酸二氢钾4.1、七水硫酸镁0.5,p H7.0,培养温度37℃。在优化条件下GAD酶活达到0.413 U/m L,与优化前的GAD酶活0.143 U/m L相比,酶活提高了188.8%。本研究有助于后续开发枯草杆菌生产γ-氨基丁酸的工艺,以克服现在γ-氨基丁酸生产工艺中,大肠杆菌安全性的问题和乳酸菌成本过高的问题。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 Γ-氨基丁酸 重组枯草芽孢杆菌 发酵条件优化
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谷氨酸脱羧酶发酵工艺的优化 被引量:7
20
作者 杨帆 李江华 +1 位作者 徐岩 房峻 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期107-111,共5页
用大肠杆菌AS1.505进行液态发酵生产谷氨酸脱羧酶并优化培养基,考察了碳源、氮源、复合营养物质、起始pH及发酵时间对酶活的影响,确定最佳产酶培养基组成为:葡萄糖1.0 g/dL,蛋白胨3.0 g/dL,氯化钠0.3 g/dL,磷酸氢二钾0.1 g/dL,硫酸镁0.0... 用大肠杆菌AS1.505进行液态发酵生产谷氨酸脱羧酶并优化培养基,考察了碳源、氮源、复合营养物质、起始pH及发酵时间对酶活的影响,确定最佳产酶培养基组成为:葡萄糖1.0 g/dL,蛋白胨3.0 g/dL,氯化钠0.3 g/dL,磷酸氢二钾0.1 g/dL,硫酸镁0.02 g/dL,L-谷氨酸0.01g/dL,玉米浆1.5 g/dL,生物素30μg/L,麸皮4 g/dL;pH 6.5。在此基础上,设计发酵条件的优化实验。实验结果表明为:250 mL的三角瓶装液量25 mL,37℃,起始pH 6.5,培养18 h达到产酶高峰,产酶活力可达1 290 U/mL。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 优化 发酵
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