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局部应用腺苷A2a受体拮抗剂对慢性高眼压大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶(GS)和L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响 被引量:4
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作者 李勇 闵颖君 +2 位作者 郎莉莉 钟一声 张润琦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第7期615-618,共4页
目的观察腺苷A2a受体拮抗剂对慢性高眼压大鼠视网膜中谷氨酰胺合成酶(glutamamin synthetase,GS)和L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(L-glutamate-L-aspartate transporter,GLAST)表达的影响,探讨其在高眼压下的视神经保护机制。方法 Sprague ... 目的观察腺苷A2a受体拮抗剂对慢性高眼压大鼠视网膜中谷氨酰胺合成酶(glutamamin synthetase,GS)和L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(L-glutamate-L-aspartate transporter,GLAST)表达的影响,探讨其在高眼压下的视神经保护机制。方法 Sprague Dawley雄性大鼠共66只,均通过巩膜上静脉结扎法制作大鼠慢性高眼压模型,选取右眼作为造模眼,左眼作为对照眼,其中12只于造模后1周、2周和3周测量眼压,观察比较双眼眼压变化情况。余54只随机分为3组,眼局部分别应用SCH442416滴眼液、ZM241385滴眼液和载体滴眼液滴术眼,分别为SCH442416滴眼液组、ZM241385滴眼液和载体滴眼液组,连续滴用3周后采用Real-time PCR和Western blot方法检测视网膜GS和GLAST mRNA和蛋白的表达变化。结果造模后1周、2周和3周造模眼眼压均明显高于对照眼,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。滴用SCH442416滴眼液或ZM241385滴眼液3周后,慢性高眼压大鼠视网膜中GS和GLAST mRNA表达与载体滴眼液组相比均明显升高,差异均具有统计学意义(均为P<0.05);而SCH442416滴眼液组和ZM241385滴眼液组大鼠视网膜中GS和GLAST mRNA的表达,两组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。同时,SCH442416滴眼液组或ZM241385滴眼液组大鼠视网膜中GS和GLAST蛋白表达与载体滴眼液组比较均明显升高,差异均具有统计学意义(均为P<0.05);而SCH442416滴眼液组和ZM241385滴眼液组大鼠视网膜中GS和GLAST蛋白的表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论巩膜上静脉结扎能建立大鼠高眼压模型,方法稳定可靠。腺苷A2a受体拮抗剂SCH442416和ZM241385对慢性高眼压大鼠视网膜中GS和GLAST的表达具有调控作用,两种不同的拮抗剂作用似乎无明显差异。 展开更多
关键词 腺苷 高眼压 谷氨酰胺合成酶 l-谷氨酸-l-转运体
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谷氨酸-天冬氨酸转运体在豚鼠耳蜗的分布 被引量:1
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作者 纪育斌 王锦玲 +2 位作者 邱建华 刘顺利 陈福权 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2005年第2期115-117,i002,共4页
目的 研究谷氨酸 -天冬氨酸转运体 (glutamate -aspartatetransporters,GLAST)在正常豚鼠耳蜗内的分布 ,为探讨GLAST在防止耳蜗谷氨酸 (Glu)神经毒性中的作用提供形态学基础。方法 选取健康红目豚鼠 6只 ,采用免疫组织化学方法 ,以山... 目的 研究谷氨酸 -天冬氨酸转运体 (glutamate -aspartatetransporters,GLAST)在正常豚鼠耳蜗内的分布 ,为探讨GLAST在防止耳蜗谷氨酸 (Glu)神经毒性中的作用提供形态学基础。方法 选取健康红目豚鼠 6只 ,采用免疫组织化学方法 ,以山羊抗GLAST抗体为标记物 ,观察正常豚鼠耳蜗中GLAST的表达及分布。结果 在正常豚鼠耳蜗的内、外毛细胞 ,内、外毛细胞周围的支持细胞 ,螺旋神经节细胞 ,血管纹边缘细胞和螺旋缘上皮 ,均有GLAST阳性表达。结论 GLAST在正常豚鼠耳蜗内主要分布于内、外毛细胞 ,内、外毛细胞周围的支持细胞 ,螺旋神经节细胞、血管纹边缘细胞和螺旋缘上皮 ,其功能尚需进一步的研究。 展开更多
关键词 谷氨酸-转运体 耳蜗 免疫组化 豚鼠
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谷氨酸/天冬氨酸转运体抗体对豚鼠听性脑干反应及毛细胞形态的影响
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作者 纪育斌 王锦玲 +1 位作者 邱建华 刘顺利 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期566-569,共4页
目的研究谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate-aspartate transporter,GLAST)抗体对豚鼠耳蜗听性脑干反应(ABR)和耳蜗毛细胞形态的影响。方法健康豚鼠20只随机分为实验组和对照组,每组10只。实验组耳蜗鼓阶内灌注GLAST抗体,对照组灌注人工... 目的研究谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate-aspartate transporter,GLAST)抗体对豚鼠耳蜗听性脑干反应(ABR)和耳蜗毛细胞形态的影响。方法健康豚鼠20只随机分为实验组和对照组,每组10只。实验组耳蜗鼓阶内灌注GLAST抗体,对照组灌注人工外淋巴液,观察两组术后3、6、9天ABR反应阈、耳蜗基底膜铺片和透射电镜的形态学改变。结果实验组术后第3天ABR波形消失,术后第9天无恢复;对照组术后第3天8只动物ABR波形消失,术后第6天和第9天全部动物引出ABR波形,平均阈值分别为62.50±5.25、47.50±6.18dBSPL,差异有统计学意义(P<0.05)。随着GLAST抗体灌注后时间延长,实验组内、外毛细胞及纤毛出现不同程度缺失,透射电镜显示内、外毛细胞及神经末梢胞浆、线粒体空化,细胞核染色质边集等凋亡早期征象。对照组的损伤较轻,与ABR阈值改变相一致。结论耳蜗内GLAST抗体灌注后出现耳蜗毛细胞、神经末梢的损伤及ABR波形消失,提示GLAST抗体阻断耳蜗Corti器中的GLAST,导致谷氨酸的神经毒性表达。 展开更多
关键词 谷氨酸/转运体 耳蜗 豚鼠
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谷氨酸转运体基因多态性与犬行为性状的关联性分析
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作者 徐黎 叶俊华 +4 位作者 杨前勇 马长书 付平峰 李德贵 杨利国 《中国工作犬业》 2010年第3期28-32,共5页
兴奋性氨基酸是广泛存在于哺乳类动物中枢神经系统的正常兴奋性神经递质,参与突触兴奋传递,学习记忆形成以及与多种神经变性疾病有关。EAA包括谷氨酸(Glu)、天冬氦酸(Asp)、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)、亮氨酸等等。其中谷氨酸是... 兴奋性氨基酸是广泛存在于哺乳类动物中枢神经系统的正常兴奋性神经递质,参与突触兴奋传递,学习记忆形成以及与多种神经变性疾病有关。EAA包括谷氨酸(Glu)、天冬氦酸(Asp)、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)、亮氨酸等等。其中谷氨酸是中枢神经系统内含量最高的氨基酸。目前有学者认为在中枢神经系统(CNS)损伤中,兴奋性氦基酸与抑制性氨基酸的失衡,对激发兴奋毒性起一定作用,故是造成脑损伤的因素之一。 展开更多
关键词 谷氨酸转运体 关联性分析 基因多态性 N-甲基-D- 兴奋性神经递质 中枢神经系统 兴奋性 性状
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昆虫来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶突变体的酶学性质表征 被引量:1
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作者 叶文琪 薛岚 +3 位作者 王超 崔文璟 周哲敏 刘中美 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期63-67,共5页
选取突变体K49R进行分离纯化、酶学性质表征,并进行全细胞催化合成β-丙氨酸,旨在研究红粉甲虫来源的L-天冬氨酸-α-脱羧酶(L-aspartate-α-decarboxylase,ADC)的酶学性质,并为生物法制备β-丙氨酸提供理论与技术支持。突变体K49R最适pH... 选取突变体K49R进行分离纯化、酶学性质表征,并进行全细胞催化合成β-丙氨酸,旨在研究红粉甲虫来源的L-天冬氨酸-α-脱羧酶(L-aspartate-α-decarboxylase,ADC)的酶学性质,并为生物法制备β-丙氨酸提供理论与技术支持。突变体K49R最适pH为6.5,在pH 6.0~7.0之间保持稳定;最适温度为42℃,热稳定性较野生型提高1.7倍;底物亲和力大幅提高,催化效率是野生型的1.8倍。在培养基中添加10 g/L葡萄糖可以有效提高重组菌的生物量,以及重组酶的可溶性表达量;在全细胞催化合成β-丙氨酸体系中,添加磷酸吡哆醛(pyridoxal-5-phosphate,PLP)可以缩短反应时间,提高催化效率。该研究开发了具有工业化潜力的工程菌,建立了绿色、高效的β-丙氨酸生物合成法,为β-丙氨酸生物合成的产业化奠定了重要基础。 展开更多
关键词 Β-丙 l --α-脱羧酶 红粉甲虫 热稳定性 全细胞催化
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GFAP、GLAST及GLT-1在颞叶内侧癫痫患者海马胶质细胞中的表达 被引量:2
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作者 卢军 曾其昌 +2 位作者 王琴 黄亚辉 彭琼 《海南医学院学报》 CAS 2016年第4期392-395,共4页
目的:探讨胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)及谷氨酸转运体1(GLT-1)在颞叶内侧癫痫患者海马胶质细胞中的表达。方珐:选取本院神经外科住院进行前颞叶切除手术治疗的颞叶内侧癫痫患者62例作为研究对象,... 目的:探讨胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)及谷氨酸转运体1(GLT-1)在颞叶内侧癫痫患者海马胶质细胞中的表达。方珐:选取本院神经外科住院进行前颞叶切除手术治疗的颞叶内侧癫痫患者62例作为研究对象,根据切除的海马组织在光镜下的情况分为海马硬化组、海马非硬化纽,检测两组GFAP、GLAST及GLT~1并进行比较。结果:GFAP主要表达在胶质细胞的细胞浆和突出部分,在光镜下表现为星状、蜘蛛状,海马硬化组比海马非硬化组更亮,反应性星形细胞增生肥大,并交织成网状,海马硬化组的GFAP在总海马区、CA1区、CA2区、齿状回表达均高于海马非硬化组,差异具有统计学意义(P〈0.05);GLAsT主要表达在胶质细胞的细胞浆和细胞膜上,海马各区均可见,光镜下CA1区呈现补丁状或斑片状,海马硬化纽GLAsT在CA1区表达减少,而在CA2区表达增多,在齿状回GLAST丢失高于海马非硬化纽,差异具有统计学意义(P〈0.05);GI,T~1主要表达在胶质细胞的细胞膜上,海马硬化组在CA2区椎体神经元之间的GLT-1表达增强,形成了椎体细胞层的“网格”,而海马硬化组在CA1区GLT—1丢失高于海马非硬化组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:癫痫频繁发作后海马胶质细胞反应性过度增生、GLAST及GI.T-1的重新分布可能是颞叶内侧癫痫发病的重要原因。 展开更多
关键词 胶质纤维性蛋白(GFAP) 谷氨酸/转运体(GlAST) 谷氨酸转运体1(GlT-1) 颞叶内侧癫痫 海马 胶质细胞
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脑源性神经营养因子对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞的保护作用 被引量:6
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作者 梁汇珉 李赵伟 +2 位作者 李铮 左中夫 刘学政 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第12期1110-1113,1118,共5页
目的探讨脑源性神经营养因子对糖尿病视网膜Müller细胞的保护作用。方法健康雄性SD大鼠54只,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。随机分为对照组、糖尿病组、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)组。含0.1... 目的探讨脑源性神经营养因子对糖尿病视网膜Müller细胞的保护作用。方法健康雄性SD大鼠54只,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。随机分为对照组、糖尿病组、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)组。含0.1 g·L^(-1)BSA的PBS平衡盐溶液制备BDNF注射液。BDNF组大鼠于糖尿病模型建成4周后开始注射BDNF注射液,对照组和糖尿病组注射等剂量的PBS平衡盐溶液。8周后,利用免疫荧光及Western blot检测胶质细胞谷氨酸转运体(L-glutamate/L-aspartate transporter,GLAST)、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)及神经元标记物SYN(synaptophysin)的表达量,谷氨酸含量测定试剂盒检测视网膜中谷氨酸的含量。结果与对照组相比,糖尿病组GLAST、GS、SYN表达显著下降,且视网膜谷氨酸含量均明显升高(均为P<0.01),而BDNF组差异均无统计学意义(均为P>0.05);与糖尿病组相比,BDNF组GLAST、GS、SYN表达均升高(均为P<0.01),谷氨酸含量均显著减少(均为P<0.01)。结论糖尿病视网膜病变早期给予外源性BDNF可以提高Müller细胞中GLAST、SYN及GS表达活性,改善Müller细胞功能,并且能使视网膜神经节细胞免受损害,提示BDNF对糖尿病视网膜病变条件下视网膜中的Müller细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 糖尿病视网膜病变 llER细胞 l谷氨酸/l天冬氨酸转运体
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硼替佐米上调fas、bcl2l12、caspase-9和caspase-3基因表达 被引量:1
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作者 卓志红 牧启田 +3 位作者 张乐鸣 欧阳桂芳 张怡 楼燕如 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期883-887,共5页
目的:探讨硼替佐米诱导慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡及新基因bcl2l12在其中的作用。方法:MTT比色法观察硼替佐米对K562细胞的生长抑制作用;Annexin-V标记和线粒体跨膜电位(Δψm)分析细胞凋亡;RT-PCR方法检测0、6、12和24hfas、b... 目的:探讨硼替佐米诱导慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡及新基因bcl2l12在其中的作用。方法:MTT比色法观察硼替佐米对K562细胞的生长抑制作用;Annexin-V标记和线粒体跨膜电位(Δψm)分析细胞凋亡;RT-PCR方法检测0、6、12和24hfas、bcl2l12、bcl-2、bim、bax、caspase-3和caspase-9基因表达变化。结果:硼替佐米抑制K562细胞生长呈时间和剂量依赖性,24h和48h半数抑制浓度分别为161.41nmol/L和96.33nmol/L;硼替佐米诱导K562细胞凋亡,12h Annexin-V阳性细胞就开始增高,并呈时间依赖性,Δψm减低;RT-PCR显示fas、bcl2l12、caspase-3和caspase-9表达增高,但bcl-2、bim和bax表达无明显改变。结论:硼替佐米可以抑制K562生长并诱导凋亡,上调fas、bcl2l12,使线粒体膜电位下降,激活caspase-9和caspase-3基因,促使DNA发生断裂可能是其诱导凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 硼替佐米 K562细胞 基因 bcl2l12 半胱蛋白酶类
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Preparation and enantiosorption of L-aspartic acid pillared hydrotalcites
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作者 彭霞辉 黄可龙 《Journal of Central South University of Technology》 EI 2007年第4期520-523,共4页
L-aspartic acid (Asp) pillared hydrotalcites were prepared by direct reaction of the L-Asp anion with layered double hydroxides (LDHs). The obtained samples were characterized by X-ray diffractometry (XRD), Four... L-aspartic acid (Asp) pillared hydrotalcites were prepared by direct reaction of the L-Asp anion with layered double hydroxides (LDHs). The obtained samples were characterized by X-ray diffractometry (XRD), Fourier transform infrared (FTIR), and thermogravimetric and differential thermal analysis (TG/DTA). The results show that the initial interlayer carbonate ions can be completely replaced by the L-Asp anion under the controlled conditions. The pillared hydrotalcites have a crystallized supramolecular structure and thermal stability. The L-Asp pillared LDHs were used in the enantiosorption of enantiopure phenylalanine (Pile), the results suggest that L-Asp pillared LDHs exhibit an excellent enantiosorption capability for D-Phe, and the adsorption isotherm fits Freundlich equation. 展开更多
关键词 l-aspartic acid HYDROTAlCITES PREPARATION enantiosorption PHENYlAlANINE
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DYRK1A参与急性髓系白血病细胞阿糖胞苷耐药的机制研究
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作者 冯佳巍 于洪娟 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第3期648-652,共5页
目的:探讨DYRK1A在急性髓系白血病细胞阿糖胞苷(Ara-C)耐药机制中的作用。方法:在THP-1细胞中过表达及沉默DYRK1A基因,观察THP-1细胞对Ara-C敏感性是否发生改变。RT-PCR检测Ara-C转运或代谢过程中相关基因m RNA表达变化。Western blot及... 目的:探讨DYRK1A在急性髓系白血病细胞阿糖胞苷(Ara-C)耐药机制中的作用。方法:在THP-1细胞中过表达及沉默DYRK1A基因,观察THP-1细胞对Ara-C敏感性是否发生改变。RT-PCR检测Ara-C转运或代谢过程中相关基因m RNA表达变化。Western blot及RT-PCR检测调节DYRK1A对Ara-C处理细胞SAMHD1表达的影响。免疫共沉淀技术检测Cyclin L2与DYRK1A及SAMHD1之间的相互作用。结果:过表达DYRK1A组THP-1细胞对Ara-C敏感性下降,而基因沉默组对Ara-C敏感性上升。DYRK1A过表达及沉默不影响Ara-C转运或代谢基因表达。过表达DYRK1A可以增加细胞内SAMHD1的表达,而沉默DYRK1A降低SAMHD1表达。Cyclin L2与DYRK1A及SAMHD1在THP-1细胞内存在相互作用。结论:DYRK1A参与急性髓系白血病细胞Ara-C耐药,其机制可能是通过与Cyclin L2相互作用,增加SAMHD1表达。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 双特异性酪化调节激酶1A 阿糖胞苷耐药 细胞周期蛋白l2 不育ɑ基序结构域和组/残基双联体结构域包涵蛋白1
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碟脉灵注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:11
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作者 王天 徐华丽 +2 位作者 曲绍春 于晓风 睢大员 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期78-81,共4页
目的:观察碟脉灵注射液(DMLI)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:在体大鼠结扎冠状动脉前降支30 min,再灌注24 h造成心肌缺血再灌注模型,计算心肌梗死范围(MIS),测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌型肌酸... 目的:观察碟脉灵注射液(DMLI)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:在体大鼠结扎冠状动脉前降支30 min,再灌注24 h造成心肌缺血再灌注模型,计算心肌梗死范围(MIS),测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌型肌酸激酶同功酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,并测定血浆前列环素(PGI2)及血栓素A2(TXA2) 水平。结果:与再灌模型组比较,DMLI 5、10 mL·kg-1组MIS明显缩小,血清AST、LDH、CK—MB活性及 MDA含量明显降低,SOD及GSH—Px活性明显升高,血浆TXA2水平明显下降,PGI2水平及PGIz/TXA2比值明显增高。结论:DMLI对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显保护作用,可能与其增强抗氧化酶活性,减少自由基对心肌的氧化损伤,纠正PGI2/TXA2失衡等机制有关。 展开更多
关键词 碟脉灵注射液 心肌缺血/药物疗法 再灌注损伤/药物疗法 基转移酶类/血液 脱氢酶/血液l超氧化物歧化酶/血液 自由基
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安神方的抗焦虑作用 被引量:6
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作者 张雪 黄仕营 +2 位作者 张燊 丁秀芳 陈宝田 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期80-84,共5页
目的观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组。采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试... 目的观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组。采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价。行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量;用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少;地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升最明显;模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著;模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异。结论安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达。 展开更多
关键词 安神方 焦虑 高架十字迷宫 谷氨酸 Γ-基丁 Γ-基丁受体 N-甲基-D-受体l
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