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川楝素经AKT/mTOR通路下调HIF1A表达抑制食管鳞状细胞癌KYSE150细胞的恶性生物学行为 被引量:1
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作者 楚月明 朱茂菲 +4 位作者 蒋杭遇 袁强 李兴 刘康 李林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第7期723-730,共8页
目的:探讨川楝素(TSN)对食管鳞状细胞癌(ESCC)KYSE150细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:通过CCK-8法、克隆形成和EdU实验检测不同浓度TSN(0.062 5、0.125、0.25μmol/L)对KYSE150细胞增殖的影响,流式细胞术、划痕实... 目的:探讨川楝素(TSN)对食管鳞状细胞癌(ESCC)KYSE150细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:通过CCK-8法、克隆形成和EdU实验检测不同浓度TSN(0.062 5、0.125、0.25μmol/L)对KYSE150细胞增殖的影响,流式细胞术、划痕实验和Transwell实验检测TSN对KYSE150细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。通过GEPIA数据库数据分析食管癌组织中低氧诱导因子1α(HIF1A)的表达,q PCR法检测人食管上皮细胞Het-1A和KYSE150细胞,以及TSN处理的各组KYSE150细胞中HIF1A mRNA的表达水平。WB法检测TSN对HIF1A的上游信号通路AKT/mTOR和下游与细胞迁移、侵袭和凋亡相关蛋白表达的影响。结果:经不同浓度TSN处理后,KYSE150细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。HIF1A mRNA在KYSE150细胞中呈高表达(P<0.05),TSN处理后KYSE150细胞中HIF1A mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。TSN能够显著抑制KYSE150细胞中HIF1A及其上游通路关键蛋白p-AKT、p-mTOR及下游迁移、侵袭和凋亡相关蛋白N-cadherin 、vimentin 、Bcl-2 、caspase-3的表达均显著下调,E-cadherin表达上调(P<0.05或P<0.01)。结论:TSN通过AKT/mTOR信号通路下调HIF1A表达,从而抑制KYSE150细胞增殖、迁移、侵袭并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 川楝素 低氧诱导因子1Α 食管鳞状细胞癌 kyse150细胞 增殖 迁移 侵袭 AKT/mTOR通路
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具核梭杆菌感染对食管癌KYSE150细胞紫杉醇化疗抵抗的影响
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作者 张哲源 刘怡文 +7 位作者 付臻 杨海军 代宁涛 李军扩 孙蔚 郭艺博 孔金玉 周福有 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期603-610,共8页
目的:探讨具核梭杆菌(Fn)感染对食管癌细胞紫杉醇(PTX)化疗的影响及其机制。方法:将食管癌细胞KYSE150分为Fn未感染组及Fn感染组(12、24、48和72 h),通过CCK-8及Western blot检测各组细胞的PTX 24 h药物半数抑制浓度(IC_(50))及炎症小体... 目的:探讨具核梭杆菌(Fn)感染对食管癌细胞紫杉醇(PTX)化疗的影响及其机制。方法:将食管癌细胞KYSE150分为Fn未感染组及Fn感染组(12、24、48和72 h),通过CCK-8及Western blot检测各组细胞的PTX 24 h药物半数抑制浓度(IC_(50))及炎症小体NLRP3蛋白表达量。构建NLRP3敲降的食管癌细胞KYSE150-N,然后分为KYSE150组、KYSE150-N组、KYSE150+Fn组和KYSE150-N+Fn组4组。通过Western blot及流式细胞术检测各组细胞系中NLRP3、乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白表达量及肿瘤干细胞(CSCs)百分比;通过平板克隆、成球实验及CCK-8检测各组细胞的体外增殖能力、克隆成球能力及PTX 24 h IC_(50)。将裸鼠分为上述4组,按分组接种细胞。成瘤后每3 d尾静脉注射一次PTX(10 mg/kg),共6次。对比各组裸鼠的成瘤能力和瘤体组织中NLRP3、ALDH1蛋白表达量及CSCs百分比。结果:与Fn未感染组相比,Fn感染组(12、24、48和72 h)KYSE150细胞的PTX 24 h IC_(50)及NLRP3蛋白表达量均增高(P均<0.05)。与KYSE150组相比,KYSE150+Fn组细胞的NLRP3及ALDH1蛋白表达量、CSCs百分比、体外增殖能力、克隆成球能力、PTX 24 h IC_(50)、裸鼠瘤体对PTX的抗性、瘤体内NLRP3与ALDH1蛋白表达量及CSCs百分比均增高(P均<0.05);而KYSE150-N组细胞上述指标均降低(P均<0.05)。与KYSE150+Fn组细胞相比,KYSE150-N+Fn组细胞上述指标均降低(P均<0.05)。结论:Fn可通过激活NLRP3诱导ALDH1高表达、富集CSCs,降低食管癌细胞对PTX的敏感性,促进其恶性增殖。 展开更多
关键词 具核梭杆菌 食管癌 炎症小体NLRP3 肿瘤干细胞 紫杉醇 化疗抵抗 kyse150细胞
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