产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床及分子流行病学特征比较

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作者 殷丽军 卢露 +2 位作者 何磊燕 武娜娜 王传清 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期556-562,共7页

目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试... 目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试验及多位点序列分型(MLST)分析,比较产NDM-1和产KPC-2的CRKP临床及分子流行病学特征。结果2017—2020年共收集164株CRKP菌株,其中96株携带bla NDM-1,68株携带bla KPC-2,产NDM-1的CRKP主要分布在新生儿科室,产KPC-2的CRKP以非新生儿科室居多,两组在标本来源、患者年龄、科室分布和预后情况方面比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);产NDM-1的CRKP菌株以ST 17型和ST 278型为主,分别为40.63%、18.75%;而产KPC-2的CRKP菌株以ST 11为主,达73.53%。产KPC-2的CRKP分离株对头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、呋喃妥因和磷霉素的耐药率均高于产NDM-1的CRKP分离株,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论产NDM-1和产KPC-2的CRKP菌株在临床及分子流行病学方面均存在差异,产KPC-2的CRKP菌株表现出更严重的耐药性,感染KPC-2 CRKP的患者预后较差,应引起临床和感控的重视。 展开更多

关键词 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 kpc-2 NDM-1 ST 11 ST 17 CRKP 流行病学特征

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新型抗KPC-2型碳青霉烯酶纳米抗体的筛选与鉴定

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作者 张鑫 王辉 许剑锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1259-1264,共6页

目的:产KPC-2型肺炎克雷伯菌可引起β-内酰胺类抗生素、碳青霉烯类抗生素产生耐药性。通过噬菌体展示技术从抗KPC-2纳米抗体文库中筛选与KPC-2特异性结合的纳米抗体,为产KPC-2型肺炎克雷伯菌耐药性的检测和诊断提供技术支持。方法:利用... 目的:产KPC-2型肺炎克雷伯菌可引起β-内酰胺类抗生素、碳青霉烯类抗生素产生耐药性。通过噬菌体展示技术从抗KPC-2纳米抗体文库中筛选与KPC-2特异性结合的纳米抗体,为产KPC-2型肺炎克雷伯菌耐药性的检测和诊断提供技术支持。方法:利用重组KPC-2免疫双峰骆驼,从骆驼的外周血淋巴细胞中提取RNA,逆转录为cDNA,通过两轮嵌套式PCR扩增出纳米抗体片段,构建抗体文库,并通过噬菌体展示技术筛选特异性纳米抗体。通过HPLC和OCTET分别进行表位分析和亲和力测定。结果:构建了一个库容为5.47×10^(8)cfu/ml且插入有效片段不低于81.25%的纳米抗体文库;并建立抗KPC-2纳米抗体的免疫淘选方法;获得了2个不同CDR3区的纳米抗体K2和K5,亲和力分别为6.0 nmol/L和4.8 nmol/L。且在KPC-2上具有2个非竞争性结合表位。结论:成功淘选出2个不同表位的特异性纳米抗体,有望替代传统抗体用于肺炎克雷伯菌耐药性疾病的检测和诊断。 展开更多

关键词 纳米抗体 噬菌体展示技术 kpc-2型碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌

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广东省东莞地区发现1株泛耐药产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌 被引量：6

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作者 张丽 张小兵 +6 位作者 杨维青 黄娟 张丽华 张菊芬 朱学海 朱凯欣 周静 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期465-468,共4页

目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制和治疗对策。方法细菌鉴定采用VITEK2全自动细菌鉴定系统,药敏试验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(改良Hodge试验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查感染患者... 目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制和治疗对策。方法细菌鉴定采用VITEK2全自动细菌鉴定系统,药敏试验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(改良Hodge试验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查感染患者的诊疗情况。结果常规药敏试验显示,该菌株对阿米卡星敏感,对其他抗菌药物均耐药;Hodge试验阳性,PCR检测到KPC-2基因,序列测定与GenBank 11844849序列一致。患者经拔除气管插管,入住隔离病房,加强支持治疗后,1个月内未检测到泛耐药肺炎克雷伯菌。结论加强泛耐药肺炎克雷伯菌监测,提高对泛耐药菌的认识有助于感染疾病的治疗和预防。 展开更多

关键词 泛耐药 kpc-2碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌

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肺炎克雷伯菌携带碳青霉烯酶KPC-2基因环境多态性研究 被引量：4

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作者 沈平华 仉英 蒋晓飞 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期680-684,共5页

目的研究复旦大学附属华山医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌广泛播散初期携帯bla_(KPC-2)的完整基因结构,获得其播散的基因背景。方法收集2006年8月-2009年12月连续不重复的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌42株,进行质粒抽提、bla_(KPC-2)筛选... 目的研究复旦大学附属华山医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌广泛播散初期携帯bla_(KPC-2)的完整基因结构,获得其播散的基因背景。方法收集2006年8月-2009年12月连续不重复的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌42株,进行质粒抽提、bla_(KPC-2)筛选、多位点序列分型(MLST);随后设计一系列PCR引物,基因结构进行完整测序。结果MLST分型显示:34株属于ST11型,5株属于ST423,2株属于ST65,1株属于ST977。主要发现两种携带bla_(KPC-2)基因结构,A型(8/42):Tn1721-bla_(KPC-2)-Tn3;B型(34/42):Tn1721-bla_(KPC-2)-Tn3,且B型结构的两端序列存在差异。结论该组中肺炎克雷伯菌携带bla_(KPC-2)的基因结构存在多态性,Tn1721-bla_(KPC-2)-△Tn3-IS26样结构占优势。研究获得的携带bla_(KPC-2)基因结构及侧翼的完整序列,为进一歩正确认识和理解bla_(KPC-2)的播散模式和机制提供了完整的基因背景。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯类耐药 kpc-2 基因环境

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应用MALDI-TOF MS快速鉴定bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌 被引量：2

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作者 汪华学 张杰 +3 位作者 曹云松 徐阳 应冲涛 郭普 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期217-223,共7页

目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。... 目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。应用聚合酶链反应(PCR)方法筛选携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌。MALDI-TOF MS鉴定菌株并收集携带bla_(KPC-2)基因型和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的质谱图,各自选取其中70株菌株图谱,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra)。采用超级图库鉴定除建库以外的肺炎克雷伯菌,根据耐药表型和PCR结果,判断鉴定结果是否准确。结果共收集295株肺炎克雷伯菌,经耐药表型筛选耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)143株和CSKP 152株。CRKP中鉴定出140株携带碳青霉烯酶基因(134株检出bla_(KPC-2)基因,3株检出blaKPC-18基因,2株检出blaNDM-1基因,1株检出blaIMP基因),3株不携带碳青霉烯酶基因;其中2株同时检出bla_(KPC-2)基因和blaNDM-1基因。根据建库要求,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra);设置error值<0.5,二者重合率达80%;对比图发现,4154.4、8310.7、10880.8、3579、10079.3 m/z五个峰可作为区分携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌和CSKP的特征峰。选取除建库以外的155株肺炎克雷伯菌进行验证,准确率为92.90%(144/155);其中携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌准确率为94.52%(69/73),CSKP准确率为91.46%(75/82)。结论通过MALDI-TOF MS建立Super-Spectra,可快速预测bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌,为临床CRKP感染的诊疗及医院感染防控提供可靠的实验室依据。 展开更多

关键词 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 肺炎克雷伯菌 bla_(kpc-2) 超级图库

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siHybrids分子对耐药肺炎克雷伯菌kpc-2抑制作用研究

6

作者 范芳华 吴国友 +2 位作者 周筱琼 肖震 程璐 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第5期490-494,共5页

目的:本研究采用RNA干扰技术和合成小分子抑制剂的方法,研究si Hybrids分子对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯杆菌耐药性的影响。方法:通过对临床分离的48株肺炎克雷伯杆菌进行药敏实验,初步筛选并收集了耐碳青霉烯类抗生素的菌株;进一步利用PC... 目的:本研究采用RNA干扰技术和合成小分子抑制剂的方法,研究si Hybrids分子对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯杆菌耐药性的影响。方法:通过对临床分离的48株肺炎克雷伯杆菌进行药敏实验,初步筛选并收集了耐碳青霉烯类抗生素的菌株;进一步利用PCR检测,筛选出携带碳青霉烯酶基因kpc-2的耐药株。利用si Hybrids技术,针对kpc-2设计合成si Hybrids杂合分子,对肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因kpc-2进行特异性沉默后,通过荧光定量PCR实验检测si Hybrids沉默靶基因kpc-2的体外表达水平,并通过联合抑菌实验验证si Hybrids分子提高抗生素抗菌活性乃至逆转细菌耐药性的效果。结果:合成的小分子siHybrids可以使耐药肺炎克雷伯杆菌kpc-2基因的表达下调,并且与碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南、厄他培南分别联合使用,可使肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美罗培南、厄他培南由耐药转为敏感。结论:si Hybrids可以特异地抑制耐药肺炎克雷伯杆菌kpc-2基因的表达,通过干扰产碳青霉烯酶基因kpc-2造成肺炎克雷伯杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药性的逆转。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯杆菌 碳青霉烯酶 kpc-2 siHybrids分子

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高毒力肺炎克雷伯菌中KPC-2型碳青霉烯酶对细菌毒力的影响 被引量：6

7

作者 祝俊英 魏清 +2 位作者 沈震 袁挺 李敏 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期697-702,共6页

目的了解高毒力肺炎克雷伯菌获得KPC-2型碳青霉烯酶后对细菌毒力的影响。方法收集3株碳青霉烯类敏感的高毒力肺炎克雷伯菌野生株(hvKP)作为实验菌株并调查其临床信息,采用PCR方法检测其毒力基因、荚膜血清分型及ST分型等。采用过表达实... 目的了解高毒力肺炎克雷伯菌获得KPC-2型碳青霉烯酶后对细菌毒力的影响。方法收集3株碳青霉烯类敏感的高毒力肺炎克雷伯菌野生株(hvKP)作为实验菌株并调查其临床信息,采用PCR方法检测其毒力基因、荚膜血清分型及ST分型等。采用过表达实验将blaKPC-2克隆至pHSG396质粒并转化至hvKP野生株构建blaKPC-2转化株,采用血清抵抗试验和生物膜实验比较hvKP野生株和blaKPC-2转化株对血清中杀菌物质的抵抗能力及生物被膜形成能力,低速度离心沉降实验及糖醛酸测定比较二者黏液性及荚膜多糖含量,荧光定量PCR检测荚膜多糖结构基因及调控基因转录水平表达情况。结果3株hvKP野生株中1株为ST23 K1型,所检测的10种毒力基因均为阳性。另外2株均为ST65 K2型,毒力基因rmpA、rmpA2、iroB、iutA、ybtS、entB、mrkD均为阳性,magA、allS及kfu均为阴性。与hvKP野生株相比,blaKPC-2转化株对血清中杀菌物质的抵抗能力明显下降,生物被膜形成能力明显下降,细菌黏液性下降,荚膜多糖含量下降,荚膜多糖结构基因及调控基因转录水平下降。结论hvKP野生株获得KPC-2型碳青霉烯酶后可导致细菌荚膜多糖产生减少,可能导致细菌毒力降低。 展开更多

关键词 高毒力肺炎克雷伯菌 毒力 kpc-2型碳青霉烯酶 荚膜多糖

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首次在猪源多重耐药肺炎克雷伯ST11型菌中发现blaKPC-2和fosA3基因 被引量：1

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作者 Zhang Wan-jiang Zhu Yao Wang Chang-zhen 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1082-1082,共1页

1996年首次在美国加利福尼亚州发现了肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC),从此以后,产KPC的肺炎克雷伯菌株(KPC-Kp)就在全世界广泛传播。由于KPC-Kp的多重耐药特征及其引起感染后的高死亡率,KPC-Kp的出现和快速传播给人类的健康带来了前所未... 1996年首次在美国加利福尼亚州发现了肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC),从此以后,产KPC的肺炎克雷伯菌株(KPC-Kp)就在全世界广泛传播。由于KPC-Kp的多重耐药特征及其引起感染后的高死亡率,KPC-Kp的出现和快速传播给人类的健康带来了前所未有的挑战。此外,人源高致病力KPC-Kp的发现,使我们进一步加深了对KPC-Kp重要性的认识。Kp虽然广泛分布在健康动物的肠道,偶尔也会引起不同种属动物的非侵袭性感染,例如奶牛的乳房炎等。然而,与人源Kp相比,动物源Kp一直被认为是一种机会病原菌,它引起的感染和耐药性相关研究一直没有引起科研人员的重视。 展开更多

关键词 磷霉素 kpc-2 BLA fosA3 耐药基因 动物源 碳青霉烯类耐药 多重耐药

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积雪草酸联合亚胺培南对产KPC-2耐药肠杆菌的体外抗菌作用 被引量：1

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作者 张卫 伍国强 +3 位作者 廖远军 许竞文 邹宜诺 周永林 《中国动物检疫》 CAS 2023年第8期94-102,共9页

碳青霉烯类抗生素是目前临床上用于治疗肠杆菌严重感染的最后防线药物。然而随着肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPCs)等的出现和流行,碳青霉烯类药物治疗广泛耐药肠杆菌(carbapenem resistant Enterobacteriaceae,CRE)感染面临巨大挑战。KPCs... 碳青霉烯类抗生素是目前临床上用于治疗肠杆菌严重感染的最后防线药物。然而随着肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPCs)等的出现和流行,碳青霉烯类药物治疗广泛耐药肠杆菌(carbapenem resistant Enterobacteriaceae,CRE)感染面临巨大挑战。KPCs家族中以KPC-2为主要流行类型,其可水解几乎所有β-内酰胺类抗生素。因此针对KPC-2开展抑制剂筛选迫在眉睫。本研究通过酶活性抑制试验、抑菌试验、细菌细胞膜通透性测定和细胞毒性检测等开展了KPC-2抑制剂的筛选及其活性验证。结果显示:中药活性成分积雪草酸可显著抑制KPC-2水解β-内酰胺类抗生素的生物学活性(P <0.05,IC50=4.38μg/mL),从而可有效增强亚胺培南等碳青霉烯类抗生素的体外抑菌作用和杀菌作用。同时,积雪草酸可增强亚胺培南对细菌细胞膜的损伤作用。此外,积雪草酸(≤32μg/mL)对不同来源细胞的细胞毒性较低,这有利于进一步开发其作为碳青霉烯类抗生素佐剂并投入临床使用。综上,本研究为CRE感染治疗提供了新的可行策略和先导化合物。 展开更多

关键词 积雪草酸 kpc-2 亚胺培南 协同抗菌

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阿拉丘沙门菌的遗传特征及耐药基因初步研究

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作者 刘玥 许学斌 +4 位作者 胡屹 顾其芳 刘诚 袁政安 陈敏 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第2期164-170,共7页

目的 基于阿拉丘沙门菌分离株的全基因组分析,初步探讨其遗传特征及耐药基因分布。方法 收集并鉴定5株来自不同来源(人源与非人源)的阿拉丘沙门菌,对其进行表型和血清型验证、抗菌药物敏感性测定以及全基因组测序分析。利用全球公开数... 目的 基于阿拉丘沙门菌分离株的全基因组分析,初步探讨其遗传特征及耐药基因分布。方法 收集并鉴定5株来自不同来源(人源与非人源)的阿拉丘沙门菌,对其进行表型和血清型验证、抗菌药物敏感性测定以及全基因组测序分析。利用全球公开数据库的阿拉丘沙门菌基因组数据,对这些菌株的毒力基因、耐药基因和质粒复制子进行预测,并构建系统发育树以探讨其遗传背景。结果 我国阿拉丘沙门菌的首例报告出现于2015年的上海,临床特征主要为腹泻,菌株主要集中在东部和南部沿海地区。本次研究的5株菌株中,4株归属于序列型ST2061,1株归属于ST1298。所有菌株对大多数临床常用抗菌药物敏感。全基因组分析结果显示,2株ST2061菌株携带bla KPC-2基因,1株ST1298菌株携带fosA7基因。在全球阿拉丘沙门菌群体的5个遗传进化群(C1~C5)中,本研究的ST2061克隆位于C1群,与英国菌株高度同源;而ST1298克隆位于C4群,为携带磷霉素耐药基因fosA7的全球流行克隆。结论 本研究初步呈现我国阿拉丘沙门菌分离株的遗传和耐药特征,提示存在携带bla_(KPC-2)和fosA7基因的菌株出现。为后续在更大范围内开展的分子流行病学监测与溯源分析提供参考,并强调加强阿拉丘沙门菌耐药性监测的重要性。 展开更多

关键词 阿拉丘沙门菌 bla kpc-2 fosA7 系统发育进化

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2016-2018年东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药表型、耐药机制和分子流行病学分析 被引量：7

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作者 郭主声 吕飞 +7 位作者 谢树金 黄亚 林偲思 徐宝华 冯剑波 冯森 何芬 周谋清 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期798-805,共8页

目的通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和bla_(KPC... 目的通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和bla_(KPC-2)基因环境,为临床寻找控制和治疗该致病菌的更优方案提供参考。方法回顾性收集2016年1月—2018年12月东莞市人民医院、东莞东华医院、康华医院、东莞市中医院和东莞市妇幼保健院等十三所医院的住院患者的CRE菌株进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验。以美罗培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最小抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌目细菌进行初筛;采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA双纸片协同试验和CIM试验检测CRE产酶情况;聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测并鉴定CRE的碳青霉烯类耐药基因(bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(DHA)、bla_(CTX-M)和bla_(CMY)),以及CRKP的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和孔蛋白(OmpK35、OmpK36和OmpK37);通过Junction PCR、Mapping PCR和Crossing PCR检测bla_(KPC-2)基因环境;使用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分离株在标本和科室中的分布与耐药情况,以及碳青霉烯酶基因在科室中的分布情况。结果从37217株肠杆菌目细菌中共检出131株CRE(占0.35%),其中肺炎克雷伯菌79株(占60.31%)、大肠埃希菌21株(占16.03%)和阴沟肠杆菌12株(占9.16%);检出CRE的临床科室主要为ICU(66株,占50.38%);在检出CRE的标本中,位于前3位分别是痰液标本(56株,占42.75%)、尿液标本(21株,占16.03%)、伤口分泌物标本(12株,占9.16%);CRE对目前临床中常使用的抗菌药物表现出高耐药性,仅对阿米卡星耐药率较低,为21.38%。检测104株CRE(包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌)发现的碳青霉烯酶有KPC-2型(57,54.81%)、NDM-1型(7株,6.73%)和NDM-5型(2株,1.92%);其中,CRKP主要为ST11型(49株,占62.03%),其次为ST1型(25株,占31.65%);ompK35(75株,占94.94%)、ompK36(77株,占97.47%)和ompK37(79株,占100%)发生突变的占比高;bla_(KPC-2)的基因环境主要为B1型突变型(38株,占48.10%),其次为A型突变型(14株,占17.72%)。结论2016—2018年东莞地区临床CRE检出率为0.35%,耐药性强,其中,CRKP主要为ST11型,主要流行的是KPC-2型,其基因环境为B1型突变型,而且孔蛋白突变占比极高,这提示东莞地区bla_(KPC-2)基因主要通过质粒进行传播,并且孔蛋白突变在CRE中发挥重要作用,院内感染医务工作者应根据该菌科室分布、耐药情况和耐药机制等特点,采取合理有效的预防和治疗方法。 展开更多

关键词 耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 多位点序列分型 孔蛋白 bla_(kpc-2) 基因环境

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中国2017-2019年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及流行克隆特征 被引量：26

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作者 龙华婧 邱芳华 +3 位作者 刘道利 周意 吴嘉怡 何仰芬 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1008-1015,共8页

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)在我国流行的克隆及分子流行病学特征,为临床追踪、实时监控CRKP医院感染及防控提供实际数据支持。方法通过文献检索收集2017-2019年全国CRKP菌株相关文献,纳入可提供菌株采集地,采用聚合酶链反... 目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)在我国流行的克隆及分子流行病学特征,为临床追踪、实时监控CRKP医院感染及防控提供实际数据支持。方法通过文献检索收集2017-2019年全国CRKP菌株相关文献,纳入可提供菌株采集地,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测耐药基因和多位点序列分型(MLST)分析得出ST型别的文献进行回顾分析,并使用BioNumerics创建最小生成树。结果最终纳入40篇文献,共2094株CRKP菌株,分布在全国6个地区(东北、华北、华东、华南、华中、西南)共15个省市,其中1631株(77.89%)CRKP携带产KPC酶耐药基因,检出亚型主要为KPC-2型(1014株,62.17%)。2094株CRKP共检出12种耐药基因,其中KPC耐药基因在6个地区的检出占比均超过50%。859株CRKP经MLST,主要优势序列型别为ST11型(659/859,76.72%),且在全国6个地区均有分布。产KPC-2酶的ST11型菌株(581/659,88.16%)为我国流行的最主要类型。结论携带耐药基因的CRKP菌株在全国散播流行迅速,目前已遍布全国6个地区,应建立应对CRKP的综合防控措施,避免CRKP在医院内暴发流行。 展开更多

关键词 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 kpc-2 ST11 流行 克隆 耐药基因

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碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌耐药机制及分子流行病学研究 被引量：24

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作者 储雯雯 刘周 +1 位作者 杨凯 管世鹤 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期809-813,共5页

目的探讨临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药基因及分子流行病学研究。方法收集并鉴定临床分离非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌株44株。采用Vitek 2compact全自动微生物鉴定药敏分析仪鉴定进行常规药敏试验,改良Hodge试验检测KPC... 目的探讨临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药基因及分子流行病学研究。方法收集并鉴定临床分离非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌株44株。采用Vitek 2compact全自动微生物鉴定药敏分析仪鉴定进行常规药敏试验,改良Hodge试验检测KPC型碳青霉烯酶,EDTA协同法检测金属β-内酰胺酶,聚合酶链反应(PCR)法检测细菌携带的耐药基因。肠杆菌基因间重复性共有序列ERIC-PCR对菌株进行同源性分析,了解其分子流行病学特征。结果44株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类、青霉素类、头孢菌素类和氨曲南等抗菌药物显示了较高的耐药性。改良Hodge试验阳性41株,金属酶检测试验结果均为阴性。PCR结果显示,临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌以KPC-2型为主,共42株。ERIC-PCR将44株肺炎克雷伯菌分为14型,以Ⅰ型为主,共18株,集中于重症监护室(ICU)和神经外科。结论分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物表现出高水平耐药;其耐药机制主要是该类细菌产KPC-2碳青霉烯酶,ICU与其它科室的患者频繁转诊治疗可能是导致碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌在全院范围播散流行的主要原因。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 ERIC-PCR kpc-2

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产KPC铜绿假单胞菌的耐药分子机制及其临床分布 被引量：6

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作者 陈勇 史利宁 +7 位作者 胡毓安 曹进 孙宁 姚新月 张静 王颖 范明 王卫萍 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第6期575-579,共5页

目的产KPC铜绿假单胞菌(PA)常为泛耐药菌,增加了临床治疗的难度。探讨产KPC的PA的分子耐药传播机制及其临床分布,为预防和控制耐药菌株的传播以及临床治疗提供理论依据。方法收集东部战区总医院2018年7月至2018年12月临床分离的泛耐药PA... 目的产KPC铜绿假单胞菌(PA)常为泛耐药菌,增加了临床治疗的难度。探讨产KPC的PA的分子耐药传播机制及其临床分布,为预防和控制耐药菌株的传播以及临床治疗提供理论依据。方法收集东部战区总医院2018年7月至2018年12月临床分离的泛耐药PA,16S rRNA测序法进行菌种鉴定;改良CarpaNP法检测碳青霉烯酶的类型;PCR法进行碳青霉烯酶基因检测和质粒同源性分析;高通量全基因组测序技术对其质粒进行测序。结果112株泛耐药PA中有20株菌检出A类碳青霉烯酶,占17.9%,经PCR验证均携带bla KPC基因。其中16株来自ICU病房,占80.0%。质粒全序测定结果显示,质粒全长51.6 kb,有69个开放阅读框(ORFs),平均GC含量59.2%,是一个全新的带bla KPC质粒,它有全新的骨架区和1个新的Tn 1403-based bla KPC-2单元转座子。结论产KPC酶是PA对碳青霉烯类药物耐药的重要原因,PA中出现携带bla KPC-2的耐药质粒,提示这种耐药特性将如同其在肠杆菌科一样在PA中播散。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 bla_(kpc-2) 碳青霉烯酶

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高黏液型肺炎克雷伯菌荚膜血清分型及碳青霉烯类耐药机制研究 被引量：17

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作者 杜芳玲 梅艳芳 +4 位作者 万腊根 魏丹丹 张伟 向天新 刘洋 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期278-285,共8页

目的调查分析高黏液型肺炎克雷伯菌(HMKP)的荚膜血清分型及分子特征,探究其碳青霉烯类耐药获得的可能机制。方法筛选出南昌大学第一附属医院2012-2016年分离的碳青霉烯类耐药-HMKP(CR-HMKP)菌株,采用PCR检测其荚膜血清分型、毒力基因及... 目的调查分析高黏液型肺炎克雷伯菌(HMKP)的荚膜血清分型及分子特征,探究其碳青霉烯类耐药获得的可能机制。方法筛选出南昌大学第一附属医院2012-2016年分离的碳青霉烯类耐药-HMKP(CR-HMKP)菌株,采用PCR检测其荚膜血清分型、毒力基因及耐药相关基因,采用多位点序列分型(MLST)方法及脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法进行细菌的同源性分析,并采用接合试验分析碳青霉烯类耐药基因的传播性。结果 2012-2016年临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌675株,其中筛选出CR-HMKP菌株18株(2.7%),除1株wzi128-K1型、1株wzi206-K57型和2株wzi2-K2型菌株外,其余荚膜分型均为wzi64-K14.64型。PCR及测序结果显示,blaNDM-1 2株,blaKPC-2 17株,qnr S1 18株,blaCTX-M-3 3株,blaCTX-M-14 18株,blaTEM-1 16株,blaSHV-12 17株,rmt B 5株。CR-HMKP菌株均携带有毒力相关基因,其中rmpA(88.9%,16/18)、mag A(5.6%,1/18)、iro N(83.3%,15/18)、aerobactin(27.8%,5/18)、rmpA2(66.7%,12/18)及mrk D(100%,18/18)。CR-HMKP菌株共有3个ST分型,分别为ST11型15株、ST86型2株、ST412型1株。PFGE显示CR-HMKP分为A、B、C 3群,其中B群和C群分别为ST86型和ST412型,而A群均为ST11型。所有携带KPC-2基因的菌株均为ST11型,接合试验显示5株CR-HMKP接合成功,接合率27.8%。结论本研究表明CR-HMKP菌株以wzi64-K14.64荚膜血清分型为主,部分可通过接合获取KPC-2基因而产生并流行。此外,CR-HMKP菌株既可存在于高流行的ST11型,也可携带K1/K2等高毒力荚膜血清分型,应引起高度重视。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 高黏液性 碳青霉烯类耐药 kpc-2 流行

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用生物化学方法从植物内生真菌提取液中高通量筛选细菌β-内酰胺酶抑制物 被引量：3

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作者 陈静 周杰 +4 位作者 丁铁林 朱玉洁 陈才法 周生亮 孙东旭 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期321-326,331,共7页

目的采用生物化学方法从植物内生真菌代谢物中筛选细菌β-酰胺酶抑制剂。方法克隆β-内酰胺酶KPC-2、TEM-10和NDM-1基因至表达载体pET28；纯化重组蛋白质，以此为药靶，从植物内生真菌代谢产物库中高通量筛选β-内酰胺酶抑制物；检测效... 目的采用生物化学方法从植物内生真菌代谢物中筛选细菌β-酰胺酶抑制剂。方法克隆β-内酰胺酶KPC-2、TEM-10和NDM-1基因至表达载体pET28；纯化重组蛋白质，以此为药靶，从植物内生真菌代谢产物库中高通量筛选β-内酰胺酶抑制物；检测效应物对β-内酰胺类药物的增效效应。结果成功克隆了3个目的基因，纯化了重组蛋白质至纯度80．95％；从3752种真菌提取液中筛选确定了5个对3种纯化的β-内酰胺酶活性均有抑制的效应物，其中效应物PF000，212能够使美罗培南对3株携带NDM—l基因的临床分离“超级细菌”菌株的最低抑菌浓度降低8～16倍。结论以β-内酰胺酶为药靶，以植物内生真菌代谢物为材料，应用生物化学方法进行高通量筛选，是获得新型β-内酰胺酶抑制物的一条有效途径。 展开更多

关键词 Β-内酰胺酶抑制剂 kpc-2 NDM-1 植物内生真菌 生物化学筛选

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产KPC肺炎克雷伯菌检测方法构建与耐药机制 被引量：3

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作者 马永驰 潘亚萍 +3 位作者 佘婷婷 王丽红 沈继录 操乐杰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第8期1173-1178,共6页

目的探讨产肺炎克雷伯型碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌检测方法以及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制、可能的治疗药物。方法选取K-B法证实的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌36株纳入本研究,使用改良Hodge试验、Carba NP试验对菌株进行... 目的探讨产肺炎克雷伯型碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌检测方法以及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制、可能的治疗药物。方法选取K-B法证实的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌36株纳入本研究,使用改良Hodge试验、Carba NP试验对菌株进行验证,随后采用PCR扩增、产物琼脂糖凝胶电泳实验,并对电泳阳性条带进行基因测序鉴定。结果 K-B法药敏试验显示36株耐碳氢烯类肺炎克雷伯菌,随后行Hodge验证,33株(91.7%)是产KPC肺炎克雷伯菌,对碳氢烯类耐药而对替加环素及米诺环素仍然敏感。对Hodge试验阳性33株再行Carba NP试验确证,其中27株(87.9%)阳性,6株(12.1%)阴性;对Hodge试验阳性33株行PCR扩增及电泳实验,共有27株出现目标条带(340bp)提示阳性,与Carba NP试验结果相一致。对出现目标条带的27株肺炎克雷伯菌再进行KPC-2耐药基因PCR扩增产物测序,均为KPC-2型耐药基因。结论 K-B法药敏试验加随后改良Hodge试验验证对于筛查、发现KPC肺炎克雷伯菌具有较高的符合度,为发现KPC肺炎克雷伯菌有效筛查方法。K-B法药敏试验证实对KPC肺炎克雷伯菌,替加环素等可能是有效治疗的药物之一。Hodge试验检测的KPC肺炎克雷伯菌,存在12.1%(6/33)的假阳性率。Carba NP试验及PCR扩增检测一致性好,具有确证产KPC肺炎克雷伯菌作用。随后的测序研究结果表明检测出的KPC肺炎克雷伯菌均为KPC-2,该型是引起肺炎克雷伯菌对碳青酶烯酶耐药的主要机制。 展开更多

关键词 碳青酶烯酶 肺炎克雷伯菌 Hodge试验 CARBA NP试验 耐药基因

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