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猪生长激素cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：4: 1; 作者白俊杰叶星 +2 位作者李新辉简清罗建仁《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期99-102,共4页; 用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从猪脑垂体总RNA中扩增出编码猪生长激素 (GH)成熟肽基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。序列分析表明 ,克隆的猪GHcDNA长 5 73bp ,不含信号肽序列 ,并在该序列之前加入一起始密码子ATG。将猪GHcDN... 展开更多; 关键词猪生长激素cdna 基因克隆大肠杆菌表达鱼用饲料添加剂促生长作用 RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

黑曲霉葡萄糖淀粉酶cDNA的克隆和序列分析及其在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量：3: 2; 作者李文清罗进贤 +1 位作者张添元何玲《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1992年第2期67-76,共10页; 以poly(A)^+mRNA为模板,噬菌体λgt 10 DNA为载体构建了黑曲霉3758的cDNA的文库。用编码黑曲霉葡萄糖淀粉酶329—418位氨基酸的DNA顺序(456bp)作探针从该文库中筛选葡萄糖淀粉酶cDNA。采用原位噬菌斑杂交法获得11个阳性噬菌斑,从其中6... 展开更多; 关键词黑曲霉葡萄糖淀粉酶 cdna克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定被引量：4: 3; 作者宋小双聂盼 +1 位作者马永鹏刘堰《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期93-97,共5页; 根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoRI和BamHⅠ对... 展开更多; 关键词大肠杆菌表达系统白细胞介素-2突变体克隆表达载体pBV220; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白介素6受体功能区片段在E．coli中的表达: 4; 作者段聚宝王嘉玺 +2 位作者邹民吉王利红马贤凯《生物化学杂志》 CSCD 1995年第5期535-540,共6页; 通过ＤＮＡ体外重组技术，以ｐＥＴ－３ｂ为表达载体，构建了重组表达质粒ｐＥＴ－６Ｒ（Ｂ）和ＰＥＴ－６Ｒ（Ｂ）４，分别编码２８ｋＤ的ｈＩＬ－６Ｒ配基结合区片段及其５３ｋＤ的二联体蛋白，并为酶切分析和ＤＮＡ序列分析所证实。... 展开更多; 关键词白细胞介素6 受体表达大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪生长激素cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：4: 1; 作者白俊杰叶星李新辉简清罗建仁; 机构中国水产科学研究院珠江水产研究所热带亚热带鱼类选育与养殖农业部重点开放实验室; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期99-102,共4页; 基金农业部"九五"重点渔业科技项目 !(95 B 96 0 2 0 8 0 2 ) 中国水产科学研究院重点基金! (99 0 8 0 2 )资助项目; 文摘用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从猪脑垂体总RNA中扩增出编码猪生长激素 (GH)成熟肽基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。序列分析表明 ,克隆的猪GHcDNA长 5 73bp ,不含信号肽序列 ,并在该序列之前加入一起始密码子ATG。将猪GHcDNA定向克隆至原核表达载体pBV2 2 0 ,构建成重组猪GH基因表达载体pBVpGH7。SDS PAGE和薄层扫描分析表明 :经 42℃诱导 ,pBVpGH7在大肠杆菌中可表达一分子量约 2 2 0 0 0的特异蛋白 ,表达量约占细胞总蛋白的 2 0 .5 %。; 关键词猪生长激素cdna 基因克隆大肠杆菌表达鱼用饲料添加剂促生长作用 RT-PCR; Keywords porcine GH cdna, gene cloning, E. coli expression; 分类号 S963.73 [农业科学—水产养殖] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名黑曲霉葡萄糖淀粉酶cDNA的克隆和序列分析及其在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量：3: 2; 作者李文清罗进贤张添元何玲; 机构中山大学生物学系/生物工程中心; 出处《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1992年第2期67-76,共10页; 基金国家"七五"重点科技攻关项目资助; 文摘以poly(A)^+mRNA为模板,噬菌体λgt 10 DNA为载体构建了黑曲霉3758的cDNA的文库。用编码黑曲霉葡萄糖淀粉酶329—418位氨基酸的DNA顺序(456bp)作探针从该文库中筛选葡萄糖淀粉酶cDNA。采用原位噬菌斑杂交法获得11个阳性噬菌斑,从其中6个噬菌体中提取DNA进行限制酶切分析和印迹法转移杂交试验,发现这些阳性噬菌体DNA含有不同大小的插入片段,它们都能与DNA探针杂交,表明已克隆了葡萄糖淀粉酶的cDNA。采用单酶切及交叉双酶切法制定了2.1kbcDNA的物理图并对2.1kb片段作了全序列分析。序列分析结果显示,克隆的2.1kb片段含5＇端非编码区,编码葡萄糖淀粉酶的结构基因及3＇端非编码区。克隆的cDNA片段转移至表达载体λgt11,感染大肠杆菌后,产生的噬菌斑转移硝酸纤维素滤膜后与^(125)I标记的抗葡萄糖淀粉酶抗体进行免疫反应,结果证明含2.1kbcDNA的λgt11表现葡萄糖淀粉酶阳性.2.1kb片段也曾转至质粒pPL2,转化大肠杆菌JF1125。细胞裂解物在SDS-PAGE电泳中可看到新的蛋白带。这些结果表明,克隆的黑曲霉葡萄糖淀粉酶cDNA可以在大肠杆菌中表达。; 关键词黑曲霉葡萄糖淀粉酶 cdna克隆; Keywords cloning sequencing expression glucoamylase cdna Aspergillus niger E. coli; 分类号 R392.2 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定被引量：4: 3; 作者宋小双聂盼马永鹏刘堰; 机构西南大学生命科学学院; 出处《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期93-97,共5页; 基金重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2007BB5353); 文摘根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoRI和BamHⅠ对目的基因进行双酶切后,插入大肠杆菌表达载体pBV220,转化宿主菌JM109,经菌落PCR筛选阳性重组子、酶切鉴定,DNA序列分析证实,重组质粒pBV220/IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放阅读框.经42℃热诱导表达,SDS-PAGE电泳显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为15kD的外源蛋白产生,经Western印迹证明为rhIL-2.成功建立了突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因的大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础.; 关键词大肠杆菌表达系统白细胞介素-2突变体克隆表达载体pBV220; Keywords E. coli expression system Interleukin-2 mutant cloning expression vector pBV220; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白介素6受体功能区片段在E．coli中的表达: 4; 作者段聚宝王嘉玺邹民吉王利红马贤凯; 机构军事医学科学院基础医学研究所; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1995年第5期535-540,共6页; 基金国家自然科学基金; 文摘通过ＤＮＡ体外重组技术，以ｐＥＴ－３ｂ为表达载体，构建了重组表达质粒ｐＥＴ－６Ｒ（Ｂ）和ＰＥＴ－６Ｒ（Ｂ）４，分别编码２８ｋＤ的ｈＩＬ－６Ｒ配基结合区片段及其５３ｋＤ的二联体蛋白，并为酶切分析和ＤＮＡ序列分析所证实。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，含有重组表达质粒的菌株可分别表达出２８ｋＤ的蛋白ｒＩＬ６Ｒ－２８和５３ｋＤ的ｒＩＬ６Ｒ－５３。重组蛋白分别占菌体总蛋白的４５％和２９％左右。重组蛋白主要以包涵体形式存在，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明重组蛋白具有ＩＬ－６Ｒ的抗原性。; 关键词白细胞介素6 受体表达大肠杆菌; Keywords Human interleukin 6 receptor, cloning and expression, E. coli, Western blotting; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪生长激素cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达	白俊杰叶星李新辉简清罗建仁	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	黑曲霉葡萄糖淀粉酶cDNA的克隆和序列分析及其在大肠杆菌中的表达(英文)	李文清罗进贤张添元何玲	《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD	1992	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定	宋小双聂盼马永鹏刘堰	《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人白介素6受体功能区片段在E．coli中的表达	段聚宝王嘉玺邹民吉王利红马贤凯	《生物化学杂志》 CSCD	1995	0	在线阅读下载PDF 职称材料