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嗜水气单胞菌β-hemA重组菌表达产物ISCOMs的研制 被引量:14
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作者 方勤美 林天龙 +2 位作者 龚晖 杨金先 刘晓东 《福建农业学报》 CAS 2004年第4期238-242,共5页
嗜水气单胞菌β-hemA重组菌PCB的培养上清液经硫酸铵梯度沉淀粗提毒素蛋白质,并在pH2.5的柠檬酸缓冲液里酸化处理以暴露其疏水区,经Mega-10裂解后与QuilA结合制备ISCOMMs,电镜下可观察到30~40nm的多面体的笼格状颗粒结构。经鳗鱼... 嗜水气单胞菌β-hemA重组菌PCB的培养上清液经硫酸铵梯度沉淀粗提毒素蛋白质,并在pH2.5的柠檬酸缓冲液里酸化处理以暴露其疏水区,经Mega-10裂解后与QuilA结合制备ISCOMMs,电镜下可观察到30~40nm的多面体的笼格状颗粒结构。经鳗鱼的免疫保护试验证实.ISCOMs组(每尾40~80μg)保护率高达100%,同剂量的溶血素+弗氏佐剂组可达62.5%,未加佐剂的溶血素只有50%。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 免疫刺激复合物(iscoms) 免疫
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BSA-ISCOMs对大黄鱼免疫机能及抗病力的影响 被引量:3
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作者 陈秀霞 黄殿盛 +3 位作者 柯翎 许斌福 方冬兰 龚晖 《福建农业学报》 CAS 2013年第3期201-205,共5页
利用免疫刺激复合物(ISCOMs)非特异免疫增强作用和可经黏膜呈递的特点,将BSA制备成ISCOMs(BSA-ISCOMs),大黄鱼连续口服免疫10d。免疫后第15d和30d采血,测血清部分非特异性免疫指标。结果显示,免疫后第15d,试验组血清SOD、补体C3、总蛋... 利用免疫刺激复合物(ISCOMs)非特异免疫增强作用和可经黏膜呈递的特点,将BSA制备成ISCOMs(BSA-ISCOMs),大黄鱼连续口服免疫10d。免疫后第15d和30d采血,测血清部分非特异性免疫指标。结果显示,免疫后第15d,试验组血清SOD、补体C3、总蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),γ-干扰素高于对照组,但差异不显著(P>0.05),溶菌酶则显著低于对照组(P<0.05);免疫后第30d,除溶菌酶外,试验组各指标与对照组差异不显著(P>0.05)。免疫完成后第30d,创伤弧菌(Vibrio vulnificus)攻毒结果显示,对照组死亡率100%,试验组死亡率26.7%,相对免疫保护率为73.3%。因此,口服BSA-ISCOMs在一定药效期限内能有效提高大黄鱼的免疫机能,增强抗病能力。 展开更多
关键词 牛血清白蛋白(BSA) 免疫刺激复合物(iscoms) 大黄鱼 非特异性免疫
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BSA-ISCOMs对欧洲鳗鲡免疫效应及抗细菌性病原的效果研究 被引量:1
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作者 陈秀霞 龚晖 +3 位作者 许斌福 郑在予 池洪树 陈永聪 《应用海洋学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期558-564,共7页
为证实免疫刺激复合物(ISCOMs)的非特异免疫增强作用,将牛血清白蛋白(BSA)制备成ISCOMs(BSA-ISCOMs).将欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)随机分为3组,分别用BSA-ISCOMs、BSA和磷酸盐缓冲液(PBS,对照组)腹腔注射免疫.二次免疫完成后第30d采血... 为证实免疫刺激复合物(ISCOMs)的非特异免疫增强作用,将牛血清白蛋白(BSA)制备成ISCOMs(BSA-ISCOMs).将欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)随机分为3组,分别用BSA-ISCOMs、BSA和磷酸盐缓冲液(PBS,对照组)腹腔注射免疫.二次免疫完成后第30d采血,测血清部分非特异性免疫指标,剩余鳗鲡分别用创伤弧菌(Vibrio vulnificus)和嗜水气单胞菌(Aeromona hydrophila)攻毒.结果显示,BSA-ISCOMs组的血清溶菌酶活力显著高于BSA组和对照组(p≤0.05);超氧化物歧化酶(SOD)和补体C3活力与对照组无显著差异(p>0.05).攻毒结果显示,BSA-ISCOMs组的存活率显著高于BSA组和对照组(p≤0.05),对创伤弧菌和嗜水气单胞菌攻击的相对免疫保护率分别为43.3%和51.7%.表明BSA-ISCOMs能有效增强欧洲鳗鲡对主要病原创伤弧菌和嗜水气单胞菌的抗病能力. 展开更多
关键词 海洋生物学 免疫刺激复合物 欧洲鳗鲡 免疫效应 细菌性病原 溶菌酶
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ISCOMs作为粘膜免疫佐剂在避孕疫苗构建中的作用研究
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作者 李玉清 梁志清 +2 位作者 何畏 史常旭 李玉艳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第22期1991-1993,共3页
目的 探索有效提高避孕疫苗生殖道粘膜免疫的方法。方法 将合成纯化的 3 5多肽与皂甙QuilA、脂类混合物 (等体积比的磷脂和胆固醇 )以 1∶4∶1比例混合 ,经充分透析后得到 3 5肽 ISCOMs ;将 3 5肽 ISCOMs和 3 5肽 弗氏佐剂混悬物... 目的 探索有效提高避孕疫苗生殖道粘膜免疫的方法。方法 将合成纯化的 3 5多肽与皂甙QuilA、脂类混合物 (等体积比的磷脂和胆固醇 )以 1∶4∶1比例混合 ,经充分透析后得到 3 5肽 ISCOMs ;将 3 5肽 ISCOMs和 3 5肽 弗氏佐剂混悬物分别免疫纯系BALB c雌性小鼠 ,并比较免疫后小鼠生殖道内特异性IgA的动态变化以及小鼠生育力的变化。结果 制备成功的 3 5肽 ISCOMs在电镜下可见明显的、较规则的蜂巢样结构 ;3 5肽 ISCOMs免疫组IgA抗体在第 10周时达最高值 ( 1∶60 0 ) ,约持续 4周左右 ;而 3 5肽 弗氏佐剂组IgA抗体在第 14周时达最高值 ( 1∶3 0 0 ) ,约持续 1周左右 ;3 5肽 ISCOMs免疫后小鼠的受孕率 ( 14 3 % )显著低于 3 5肽 弗氏佐剂免疫组 ( 60 0 % )。结论 ISCOMs可以显著提高抗原在生殖道内的粘膜免疫效应 ,增强抗生育作用 ,是一种极富潜力的粘膜免疫佐剂。 展开更多
关键词 避孕疫苗 iscoms 粘膜免疫 佐剂
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嗜水气单胞菌主要外膜蛋白对欧洲鳗鲡的免疫保护试验 被引量:37
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作者 董传甫 林天龙 +2 位作者 龚晖 欧阳岁东 杨苏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期285-290,共6页
制备出4株分属3个不同血清型嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白(MOMP)免疫刺激复合物(ISCOMs)亚单位疫苗,腹腔注射免疫欧洲鳗鲡,ELISA法测得免疫后第14d和第30d所采集的血清的平均抗体效价在1∶320—1∶1280之间。免疫印迹结果显示,在印迹膜... 制备出4株分属3个不同血清型嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白(MOMP)免疫刺激复合物(ISCOMs)亚单位疫苗,腹腔注射免疫欧洲鳗鲡,ELISA法测得免疫后第14d和第30d所采集的血清的平均抗体效价在1∶320—1∶1280之间。免疫印迹结果显示,在印迹膜上对应的位置均可检测到MOMP的主要蛋白条带。第40d的免疫保护试验表明,免疫欧鳗对TPS-30菌株约100倍半数致死剂量的攻击无免疫保护作用,其中的3组被测免疫欧鳗对TPS-30菌株约10倍半数致死剂量的攻击的免疫保护率皆在80%以上。上述试验结果提示,嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白是重要的保护性抗原,在制备成ISCOMs亚单位疫苗的情况下,较小的剂量免疫一次即可显示出较高的相对免疫保护率,且没有明显的血清型特异性。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 欧洲鳗鲡 外膜蛋白 免疫刺激复合物 共同保护性抗原 人工免疫
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创伤弧菌外膜蛋白免疫刺激复合物对欧洲鳗鲡的免疫保护性分析 被引量:16
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作者 田丁 许斌福 +2 位作者 林能峰 龚晖 林天龙 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期431-435,共5页
创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是一种革兰氏染色阴性、多形性、运动性、有荚膜的嗜盐性细菌,属于弧菌属第5群,主要生长于海水中、鱼类及贝母类等体内[1]。根据寄主范围和生化反应类型的不同,将创伤弧菌分为3个生物型:生物Ⅰ型(产吲哚... 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是一种革兰氏染色阴性、多形性、运动性、有荚膜的嗜盐性细菌,属于弧菌属第5群,主要生长于海水中、鱼类及贝母类等体内[1]。根据寄主范围和生化反应类型的不同,将创伤弧菌分为3个生物型:生物Ⅰ型(产吲哚)[2]、生物Ⅱ型(不产吲哚)[3]以及1999年以色列的研究人员报道的创伤弧菌生物III型。 展开更多
关键词 创伤弧菌 外膜蛋白 欧洲鳗鲡 免疫刺激复合物 免疫保护性
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