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赤点石斑鱼MHC IA基因的克隆与表达多态性分析 被引量:6
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作者 沈铭辉 郑乐云 +1 位作者 杜佳莹 王军 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期103-108,共6页
采用RACE技术,成功克隆获得赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)非特异性免疫因子MHC IA基因的4个cDNA全序列,序列全长为1 680bp,含有3′UTR、启动子、多肽结合区(α1)、IGC区(α2)、跨膜区、胞质区和5′UTR区,编码区大小为1 074~1 080bp,... 采用RACE技术,成功克隆获得赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)非特异性免疫因子MHC IA基因的4个cDNA全序列,序列全长为1 680bp,含有3′UTR、启动子、多肽结合区(α1)、IGC区(α2)、跨膜区、胞质区和5′UTR区,编码区大小为1 074~1 080bp,共编码357~359个氨基酸,推测蛋白质分子质量约41.66ku.氨基酸序列分析发现赤点石斑鱼MHC IA分子具有经典MHC蛋白分子的空间结构,在多肽结合区则存在极其丰富的变异.利用Real time PCR和SSCP技术研究了赤点石斑鱼MHC IA的组织表达特异性和表达多态性,发现其在头肾、心、肝等12个组织器官中均能有效表达,在头肾,脾,胸腺等免疫组织表达量不仅高,表达多态性也异常丰富,而在与外界环境接触较多的鳃、肌肉、肠等组织表达较弱.此外,根据MHC IIB分子中相对保守的IGC区氨基酸序列构建了脊椎动物的系统进化树,也表明了该分子的IGC区氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好标记. 展开更多
关键词 赤点石斑鱼 MHC ia基因 多态性
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cry Ia基因小麦高效表达载体的构建 被引量:5
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作者 侯文胜 郭三堆 路明 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第6期121-124,共4页
 利用在禾谷类作物中表达效率较高的启动子Ubi对含目的基因cryIa的现有载体进行了改造,并引入了筛选标记基因bar,为提高目的基因的表达水平,还在目的基因5′端引入了Ω和Kozak序列,3′端引入了poly(A)序列。成功构建了适用于小麦的抗...  利用在禾谷类作物中表达效率较高的启动子Ubi对含目的基因cryIa的现有载体进行了改造,并引入了筛选标记基因bar,为提高目的基因的表达水平,还在目的基因5′端引入了Ω和Kozak序列,3′端引入了poly(A)序列。成功构建了适用于小麦的抗虫基因植物表达载体pGU4ABBar,该载体含有顺向连接的Ubi-cryIa及Ubi-bar基因表达盒,可用于基因枪、花粉管通道法等介导的小麦遗传转化,人工合成的苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因cryIa可以编码对鳞翅目昆虫具有毒杀作用的蛋白。 展开更多
关键词 CRY ia基因 小麦 高效表达载体 启动子 质粒
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转Cry1Ia基因抗虫大豆对鳞翅目靶标害虫的抗性分析 被引量:5
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作者 单大鹏 王晓云 +3 位作者 洪志鹏 王子叶 冯广慧 孟凡立 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1-9,共9页
以转Cry1Ia基因抗虫大豆株系KE1为试验材料,分析其遗传稳定性及鳞翅目靶标害虫抗性,计算实验室内和田间环境下,甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、黏虫和大豆食心虫叶面积损失率、幼虫平均校正死亡率、平均体重抑制百分率和虫食率。结果表明,KE1株系... 以转Cry1Ia基因抗虫大豆株系KE1为试验材料,分析其遗传稳定性及鳞翅目靶标害虫抗性,计算实验室内和田间环境下,甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、黏虫和大豆食心虫叶面积损失率、幼虫平均校正死亡率、平均体重抑制百分率和虫食率。结果表明,KE1株系中目的基因Cry1Ia和标记基因Bar在T3~T5代中连续三代稳定遗传。KE1对靶标害虫斜纹夜蛾(S.litura)、甜菜夜蛾(S.exigua)、粘虫(M.separata)和大豆食心虫(Leguminivora glycinivorella Matsumura)等鳞翅目表现抗虫,对照植株垦农18表现感虫,说明在垦农18中Cry1Ia基因表达可提高受体垦农18对鳞翅目害虫抗虫水平。 展开更多
关键词 转Cry1ia基因大豆 鳞翅目害虫 抗性鉴定
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绵羊高繁殖力候选基因BMPR-IA的研究 被引量:6
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作者 桑林华 储明星 +2 位作者 王金玉 方丽 叶素成 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期852-857,共6页
以骨形态发生蛋白受体IA(bone morphogenetic protein receptor IA,BMPR-IA)基因为候选基因,采用PCR-SSCP技术检测该基因在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊、湖羊)以及低繁殖力绵羊品种(多赛特羊、特克塞尔羊、德国肉用美利奴羊)中的单核苷... 以骨形态发生蛋白受体IA(bone morphogenetic protein receptor IA,BMPR-IA)基因为候选基因,采用PCR-SSCP技术检测该基因在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊、湖羊)以及低繁殖力绵羊品种(多赛特羊、特克塞尔羊、德国肉用美利奴羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明:在小尾寒羊中检测到AA、AB两种基因型,在湖羊中只检测到一种基因型BB,而在低繁殖力的3个绵羊品种中只检测到一种基因型AA。统计结果表明:小尾寒羊A等位基因频率为0.964,B等位基因频率为0.036。测序结果表明:BB型与AA型相比有6处核苷酸发生了突变。独立性检验表明:小尾寒羊与低繁殖力绵羊品种间基因型分布差异不显著(P>0.05),而湖羊与小尾寒羊、低繁殖力绵羊品种间基因型分布差异极显著(P<0.001)。AB基因型小尾寒羊平均产羔数比AA基因型多0.15只,但差异不显著(P>0.05)。研究表明:BMPR-IA基因不是小尾寒羊和湖羊高繁殖力的主效基因。 展开更多
关键词 绵羊 高繁殖力 骨形态发生蛋白受体ia基因 PCR—SSCP
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苏云金芽胞杆菌cry1Ia17基因克隆、表达的研究 被引量:1
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作者 张庆丽 李海涛 +1 位作者 赵勇 高继国 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期93-97,共5页
根据cry1I类基因的全长序列设计引物,以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BtMX2的总DNA为模板扩增出片段长为2.1kb的cry1I的全长基因,插入大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pEB,转化大肠杆菌Rosetta菌株,诱导表达出81ku... 根据cry1I类基因的全长序列设计引物,以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BtMX2的总DNA为模板扩增出片段长为2.1kb的cry1I的全长基因,插入大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pEB,转化大肠杆菌Rosetta菌株,诱导表达出81ku的蛋白,编码的蛋白由720个氨基酸组成,该蛋白等电点为6.09,为弱酸性蛋白。与已知cry1Ia9基因的氨基酸一致性为99%,相差2个氨基酸。该基因的登录号为GU989199,已被国际基因命名委员会正式命名为cry1Ia17。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 cry1ia基因 克隆 表达
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苏云金芽胞杆菌cry1Ia32基因克隆和原核表达的研究 被引量:1
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作者 宋萍 南宫自艳 +2 位作者 张杰 王立宇 王勤英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期48-52,共5页
根据GenBank中cry1I类基因序列设计特异性引物,以Bt SC-13菌总DNA为模板PCR扩增得到2 151bp的cry1Ia全长基因。该基因编码蛋白由717个氨基酸组成,相对分子量为80.9kDa,等电点为6.57,编码蛋白与Cry1Ia1(CAA44633)亲缘关系最高达99.03%的... 根据GenBank中cry1I类基因序列设计特异性引物,以Bt SC-13菌总DNA为模板PCR扩增得到2 151bp的cry1Ia全长基因。该基因编码蛋白由717个氨基酸组成,相对分子量为80.9kDa,等电点为6.57,编码蛋白与Cry1Ia1(CAA44633)亲缘关系最高达99.03%的序列同源性,该蛋白被Btδ-内毒素国际命名委员会正式命名为Cry1Ia32(登录号为JX944039)。cry1Ia32基因通过表达载体pET-21b在大肠杆菌中高效表达分子量为81kDa的蛋白,诱导表达的Cry1Ia32蛋白对棉铃虫和甜菜夜蛾的2龄幼虫具有较高杀虫活性,LC50值分别为0.025mg/mL和0.011mg/mL,为抗虫转基因植物研究提供了新的基因。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 CRY1 ia32基因 基因表达 杀虫活性
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