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食品中金黄色葡萄球菌的等温多自配引发扩增(IMSA)方法优化与应用
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作者 郭振 曾春梅 +4 位作者 谢玉锋 李莎 吴观凤 张庆发 宋淑婷 《湖北农业科学》 2025年第9期168-172,共5页
基于nuc基因设计特异性引物,通过设置不同温度、孵育时间、酶用量等条件进行梯度试验,优化等温多自配引发扩增(Isothermal multiple self-matching-initiated amplification,IMSA)方法的反应体系,并对其特异性、灵敏度进行评估,同时与PC... 基于nuc基因设计特异性引物,通过设置不同温度、孵育时间、酶用量等条件进行梯度试验,优化等温多自配引发扩增(Isothermal multiple self-matching-initiated amplification,IMSA)方法的反应体系,并对其特异性、灵敏度进行评估,同时与PCR方法对比。结果表明,IMSA方法的反应体系在63℃反应温度、45 min孵育时间、16 U/管Bst DNA聚合酶、4.0 mmol/L Mg^(2+)、2.0 mmol/L dNTPs和1.2 mol/L甜菜碱条件下可获得最佳扩增效率与特异性。在生鲜牛奶、肉制品和果蔬制品3类样品的检测中,IMSA方法与PCR方法的阳性符合率和阴性符合率均达100%,Kappa值均为1.00(P<0.01),表明2种检测方法对3类样品中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的检测结果完全一致。基于IMSA方法的金黄色葡萄球菌快速检测方法在食品检测中具有高特异性、高灵敏度和良好的实用性,为食品安全检测提供了一种高效、可靠的手段。 展开更多
关键词 食品 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 等温多自配引发扩增(imsa)方法 优化 应用
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一种用IMSA100实现的雷达数字稳频系统 被引量:2
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作者 李宏斌 丁建江 +1 位作者 徐向东 高玉良 《现代雷达》 CSCD 北大核心 1997年第2期88-91,共4页
概述了一种用可级联型横向滤波器IMSA100实现的雷达数字稳频系统及其设计方法。系统利用IMSA100的特点,用数字稳频技术实现了对雷达发射信号的校正。与其它类似系统相比,具有电路结构简单、功能灵活、性能价格比高等优点。
关键词 imsa100 复数卷积 数字稳频技术 雷达
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集成多计算源的软件体系结构:IMSA
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作者 李长云 李赣生 李莹 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第21期20-21,100,共3页
从研究集成网络计算资源成为具有应用逻辑的复合计算出发,设计了一个新型的分布式软件体系结构——IMSA。IMSA以XML显性表达复合计算的组合逻辑,屏蔽了各计算源间的异构性。基于IMSA结构,可以充分利用网络计算能力,快速构造新的应用,同... 从研究集成网络计算资源成为具有应用逻辑的复合计算出发,设计了一个新型的分布式软件体系结构——IMSA。IMSA以XML显性表达复合计算的组合逻辑,屏蔽了各计算源间的异构性。基于IMSA结构,可以充分利用网络计算能力,快速构造新的应用,同时也为集 成企业旧的业务系统提供了新的方法。 展开更多
关键词 计算源 原子计算 复合计算 软件体系结构 XML imsa
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茄科雷尔氏菌IMSA-LAMP检测方法的建立 被引量:2
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作者 袁婷 罗龙辉 +1 位作者 张雪吟 刘吉平 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期89-98,共10页
【目的】桑树青枯病是由茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的一种危害严重的细菌性病害,建立一种快速、灵敏的茄科雷尔氏菌检测方法,对桑树青枯病的有效控制有重要意义。【方法】本研究以茄科雷尔氏菌果胶裂解酶基因(Pectate lyas... 【目的】桑树青枯病是由茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的一种危害严重的细菌性病害,建立一种快速、灵敏的茄科雷尔氏菌检测方法,对桑树青枯病的有效控制有重要意义。【方法】本研究以茄科雷尔氏菌果胶裂解酶基因(Pectate lyase gene)为靶标,基于等温多自配引发扩增技术(Isothermal multiple self-matchinginitiated amplification,IMSA)的引物设计原理,结合环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的反应体系,建立一种快速有效检测茄科雷尔氏菌的IMSA-LAMP法,并对该方法的最佳反应参数进行了筛选。【结果】基于果胶裂解酶基因建立的IMSA-LAMP检测方法在64.5℃条件下,45 min内可完成对阳性样品的特异检测,对茄科雷尔氏菌的模板DNA检测灵敏度达200 fg/μL(对应菌为1×10^(2) CFU/mL);对生产上收集的疑似桑树青枯病病样的检出率为87.5%。【结论】IMSA-LAMP检测方法具有良好的实用性,可为桑树青枯病的快速检测、诊断与防疫提供新的技术支持。 展开更多
关键词 桑树青枯病 imsa-LAMP 茄科雷尔氏菌 果胶裂解酶基因
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FQ-PCR与IMSA检测转基因豆奶外源基因的比较研究 被引量:6
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作者 乐振窍 许泽仰 +2 位作者 张细玲 陈慧国 祖新 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期943-949,954,共8页
为比较实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与等温多自配引发扩增(IMSA)技术检测转基因豆奶中外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度和特异性。合成CaMV35S、NOS以及EPSPS基因的质粒,通过FQ-PCR与IMSA检测定量的质粒,比较质粒灵敏度;按0. 50%、0. ... 为比较实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与等温多自配引发扩增(IMSA)技术检测转基因豆奶中外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度和特异性。合成CaMV35S、NOS以及EPSPS基因的质粒,通过FQ-PCR与IMSA检测定量的质粒,比较质粒灵敏度;按0. 50%、0. 10%、0. 05%以及0. 01%的比例制作转基因豆奶,通过FQ-PCR与IMSA检测转基因大豆标准品制成的豆奶,比较样品灵敏度和特异性。结果表明:IMSA检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的质粒灵敏度分别为31. 01,31. 01,3. 10 cps·μL^(-1),FQ-PCR检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的质粒灵敏度皆为31. 01cps·μL^(-1); IMSA检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的样品灵敏度分别为0. 05%、0. 05%、0. 01%,FQ-PCR检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的样品灵敏度皆为0. 10%; FQ-PCR非特异性检出DP356043的NOS以及MON87701的CaMV35S与EPSPS。说明IMSA方法检测转基因豆奶外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度与特异性优于FQ-PCR。 展开更多
关键词 FQ-PCR imsa 豆奶 外源基因 灵敏度 特异性
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IMSA技术快速检测肠出血大肠杆菌O157:H7方法的建立及应用 被引量:10
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作者 王琪 徐文娟 石盼盼 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第17期263-269,共7页
为了建立和评价一种适合食药监及基层检验部门使用的肠出血性大肠杆菌O157:H7快速检测方法,针对肠出血性大肠杆菌O157:H7特异性rfbE基因,应用等温多自配引发扩增技术(Isothermal Multiple Self-matching-initiated Amplification,IMSA)... 为了建立和评价一种适合食药监及基层检验部门使用的肠出血性大肠杆菌O157:H7快速检测方法,针对肠出血性大肠杆菌O157:H7特异性rfbE基因,应用等温多自配引发扩增技术(Isothermal Multiple Self-matching-initiated Amplification,IMSA),设计引物进行检测。对建立的方法进行特异性试验和灵敏度试验,与荧光定量PCR法进行比对;利用建立的IMSA法确定人工污染样本被检出的最短增菌时间和最低检测灵敏度;使用IMSA法和国标法对24份不同肉制品进行检验,评估两者的一致性。结果表明:该方法仅对肠出血性大肠杆菌O157:H7特异性扩增;IMSA法的灵敏度比qPCR法高,达8.9×10^(2) CFU/mL;人工污染菌种样本最短增菌10 h可以被建立的IMSA法检出,检出限为9.1 CFU/25 g;24份肉制品样本的IMSA法与常规培养法结果一致性为100%。结论:IMSA技术检测肠出血性大肠杆菌O157:H7具有特异性强、灵敏度高、结果快速准确的特点,可在11 h内完成食品中O157:H7的检出,适用于食药监及基层检验部门进行肠出血性大肠杆菌O157:H7的快速检测。 展开更多
关键词 肠出血大肠杆菌 O157∶H7 等温多自配引发扩增技术(imsa) rfbE基因 快速检测
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3亿2千万次乘加运算超高速IMSA100开发/实时信号处理系统
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作者 洪刚 《信号处理》 CSCD 北大核心 1989年第2期123-129,共7页
一、概述当前,国际上信号处理技术应用正在各个领域中广泛开展,信号处理方法中大多采用了迭代运算,但这样的处理在通用计算机上实现需要大量时间,而且效率很低,因此不能进入实际工作过程,而专用信号处理机的价值又十分昂贵,为了解决信... 一、概述当前,国际上信号处理技术应用正在各个领域中广泛开展,信号处理方法中大多采用了迭代运算,但这样的处理在通用计算机上实现需要大量时间,而且效率很低,因此不能进入实际工作过程,而专用信号处理机的价值又十分昂贵,为了解决信号处理过程的实时性,世界上许多著名公司如英国lnnos公司、美国Texas公司、Motolala公司等均设计制造了多种高性能信号处理器,其中包括T212,TMS320C25及DSP56000。这些信号处理器的运算速度在每秒1000万次(10MIPS)以上。 展开更多
关键词 信号处理 imsa100 实时信号
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负压驱动皮升级等温核酸精确定量微流控芯片 被引量:2
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作者 吴文帅 丁雄 牟颖 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期351-356,共6页
精准医疗急需更加精确、灵敏、方便快捷的核酸定量方法。设计开发了一种结合双荧光等温扩增的高密度皮升级核酸定量微流控芯片。芯片采用多层软光刻技术制成,有3个反应通道,每通道有40 000个反应小室,共120 576个皮升级反应小室,反应小... 精准医疗急需更加精确、灵敏、方便快捷的核酸定量方法。设计开发了一种结合双荧光等温扩增的高密度皮升级核酸定量微流控芯片。芯片采用多层软光刻技术制成,有3个反应通道,每通道有40 000个反应小室,共120 576个皮升级反应小室,反应小室的密度达7 000/cm^2。芯片利用负压驱动样品精确分配,热凝固油相封闭小室,无需阀门及其他仪器辅助。芯片中嵌入的氟硅烷纳米涂层能有效地阻止反应过程中水蒸气的散失。以乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)质粒作为模板,进行等温多底物自配引发扩增(isothermal multiple self-matchinginitiated amplification,IMSA),测试芯片定量性能。芯片检测模板的动态范围达6个数量级,可检测的最大模板量为36μL中1.13×10~6拷贝数核酸。该装置具有定量精确、灵敏、快捷、操作简单等优势,可用于精准检测。 展开更多
关键词 微流控芯片 负压驱动 等温多底物自配引发扩增 高密度 精确定量
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人乳头瘤病毒16和52型双荧光等温多自配引发扩增的检测方法 被引量:5
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作者 崔玉伟 牟颖 +4 位作者 马莉 丁雄 方宗宇 王焰 吴青青 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1017-1023,共7页
应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术,分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物,并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂,建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法.结果表明... 应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术,分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物,并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂,建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法.结果表明:340μmol/L HNB与1∶10 000SYBR GreenⅠ混合构建的双荧光指示剂在IMSA反应体系中具有明确的指示效果,455nm蓝光激发下阳性反应管双荧光显色为黄绿色,阴性反应管双荧光显色为橘红色;该方法对HPV16和HPV52型检测限分别达60,600拷贝/μL,可特异性检出样品中HPV16和HPV52,与临床检测结果比对无差异. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 人乳头瘤病毒52型 等温多自配引发扩增 双荧光
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