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IL-23p19单克隆抗体通过调节Th17/Treg平衡缓解MRL/lpr狼疮小鼠肾炎
1
作者
成炜
宋赛哲
+3 位作者
沈宇
刘翠平
常新
武剑
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第7期620-628,共9页
目的利用MRL/lpr狼疮样小鼠模型,观察白细胞介素23p19亚基(IL-23p19)单克隆抗体的治疗作用。方法选用8周的雌性MRL/lpr小鼠共36只,随机分为6组。分别是PBS组(空白对照)、IgG组(同型IgG)、地塞米松(DEX)组(阳性对照)、IL-23p19单克隆抗...
目的利用MRL/lpr狼疮样小鼠模型,观察白细胞介素23p19亚基(IL-23p19)单克隆抗体的治疗作用。方法选用8周的雌性MRL/lpr小鼠共36只,随机分为6组。分别是PBS组(空白对照)、IgG组(同型IgG)、地塞米松(DEX)组(阳性对照)、IL-23p19单克隆抗体共分为3个浓度梯度治疗组:LD(1 mg/kg低浓度)、MD(3 mg/kg中浓度)、HD(10 mg/kg高浓度)治疗组。从小鼠12周龄时开始药物干预,尾静脉注射给药。尿蛋白检测试纸检测小鼠尿蛋白含量;ELISA检测小鼠血清中抗dsDNA抗体的含量;全自动生化分析检测仪检测小鼠血清肌酐及尿素氮含量;HE染色法及PAS染色分析肾脏组织病理变化;免疫荧光分析肾脏组织内IgG及C3免疫复合物的沉积情况;流式细胞术检测小鼠脾脏1型辅助T(Th1)、Th2、Th17、滤泡辅助性T(Tfh)细胞和调节性T细胞(Treg)亚群表达;实时定量PCR检测脾脏相关转录因子表达情况。结果IL-23p19单克隆抗体可以减少MRL/lpr小鼠的尿蛋白水平,减少脾脏的肿大,改善肾功能和降低抗dsDNA抗体水平;缓解MRL/lpr小鼠的肾小球肾炎,并降低肾脏免疫复合物沉积;IL-23p19单克隆抗体可显著抑制MRL/lpr小鼠脾脏Th1、Th17细胞比例,上调Treg比例;同时显著下调脾脏转录因子T-bet(T-bet)和视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA水平,上调叉头框P3(FOXP3)mRNA水平。结论IL-23p19单克隆抗体对MRL/lpr小鼠具有显著的治疗效果,可能通过调控Th17/Treg之间细胞的平衡来发挥作用。
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关键词
il-23p19单克隆抗体
MRL/l
p
r狼疮小鼠
免疫表型
狼疮肾炎
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职称材料
兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
2
2
作者
门颖丽
王小龙
+5 位作者
丁聪
王晓东
汲振余
王婷
康巧珍
刘鑫
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期688-692,共5页
目的制备兔抗小鼠白细胞介素23p19(IL-23p19)多克隆抗体。方法利用分子克隆技术构建重组表达质粒p ET-16b-IL-23p19,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE及Western blot法分析鉴定蛋白,...
目的制备兔抗小鼠白细胞介素23p19(IL-23p19)多克隆抗体。方法利用分子克隆技术构建重组表达质粒p ET-16b-IL-23p19,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE及Western blot法分析鉴定蛋白,镍柱亲和层析纯化制备蛋白;以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大白兔,获得抗血清,并利用亲和层析法纯化抗血清,制备兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体;采用ELISA检测抗体效价;Western blot法检测抗体特异性。结果重组表达载体p ET-16b-IL-23p19构建正确且IL-23p19蛋白能够在大肠杆菌BL21(DE3)中有效表达。通过多次IL-23p19蛋白免疫新西兰大白兔,成功制备兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体。ELISA检测确定新西兰大白兔血清效价达1∶256 000,Western blot法证实兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体能特异性识别小鼠IL-23p19蛋白。结论成功制备了兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体,抗体具有高的效价和较好的特异性。
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关键词
il-
23
p
19
原核表达
蛋白纯化
抗体
制备
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职称材料
题名
IL-23p19单克隆抗体通过调节Th17/Treg平衡缓解MRL/lpr狼疮小鼠肾炎
1
作者
成炜
宋赛哲
沈宇
刘翠平
常新
武剑
机构
苏州大学附属第一医院:风湿免疫科
苏州大学附属第一医院:江苏省临床免疫研究所
常熟市第二人民医院皮肤科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第7期620-628,共9页
基金
苏州市基础研究试点项目(SSD2024033)
苏州市科技计划项目(SLJ2021009)
+1 种基金
苏州市“科教强卫”青年项目(QNXM2024072)
苏州市科技计划项目(SKY2023085)。
文摘
目的利用MRL/lpr狼疮样小鼠模型,观察白细胞介素23p19亚基(IL-23p19)单克隆抗体的治疗作用。方法选用8周的雌性MRL/lpr小鼠共36只,随机分为6组。分别是PBS组(空白对照)、IgG组(同型IgG)、地塞米松(DEX)组(阳性对照)、IL-23p19单克隆抗体共分为3个浓度梯度治疗组:LD(1 mg/kg低浓度)、MD(3 mg/kg中浓度)、HD(10 mg/kg高浓度)治疗组。从小鼠12周龄时开始药物干预,尾静脉注射给药。尿蛋白检测试纸检测小鼠尿蛋白含量;ELISA检测小鼠血清中抗dsDNA抗体的含量;全自动生化分析检测仪检测小鼠血清肌酐及尿素氮含量;HE染色法及PAS染色分析肾脏组织病理变化;免疫荧光分析肾脏组织内IgG及C3免疫复合物的沉积情况;流式细胞术检测小鼠脾脏1型辅助T(Th1)、Th2、Th17、滤泡辅助性T(Tfh)细胞和调节性T细胞(Treg)亚群表达;实时定量PCR检测脾脏相关转录因子表达情况。结果IL-23p19单克隆抗体可以减少MRL/lpr小鼠的尿蛋白水平,减少脾脏的肿大,改善肾功能和降低抗dsDNA抗体水平;缓解MRL/lpr小鼠的肾小球肾炎,并降低肾脏免疫复合物沉积;IL-23p19单克隆抗体可显著抑制MRL/lpr小鼠脾脏Th1、Th17细胞比例,上调Treg比例;同时显著下调脾脏转录因子T-bet(T-bet)和视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA水平,上调叉头框P3(FOXP3)mRNA水平。结论IL-23p19单克隆抗体对MRL/lpr小鼠具有显著的治疗效果,可能通过调控Th17/Treg之间细胞的平衡来发挥作用。
关键词
il-23p19单克隆抗体
MRL/l
p
r狼疮小鼠
免疫表型
狼疮肾炎
Keywords
il-
23
p
19
monoclonal antibody
MRL/l
p
r lu
p
us mice
immuno
p
henoty
p
e
lu
p
us ne
p
hritis
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
R593.241 [医药卫生—内科学]
R593.2 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
2
2
作者
门颖丽
王小龙
丁聪
王晓东
汲振余
王婷
康巧珍
刘鑫
机构
郑州大学生命科学学院分子免疫实验室
河南省医药科学研究院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期688-692,共5页
基金
重大新药创制科技重大专项(2012ZX09103301-022)
国家自然科学基金(U1204817,81373119,81571526)
河南省教育厅基金(16A180019)
文摘
目的制备兔抗小鼠白细胞介素23p19(IL-23p19)多克隆抗体。方法利用分子克隆技术构建重组表达质粒p ET-16b-IL-23p19,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE及Western blot法分析鉴定蛋白,镍柱亲和层析纯化制备蛋白;以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大白兔,获得抗血清,并利用亲和层析法纯化抗血清,制备兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体;采用ELISA检测抗体效价;Western blot法检测抗体特异性。结果重组表达载体p ET-16b-IL-23p19构建正确且IL-23p19蛋白能够在大肠杆菌BL21(DE3)中有效表达。通过多次IL-23p19蛋白免疫新西兰大白兔,成功制备兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体。ELISA检测确定新西兰大白兔血清效价达1∶256 000,Western blot法证实兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体能特异性识别小鼠IL-23p19蛋白。结论成功制备了兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体,抗体具有高的效价和较好的特异性。
关键词
il-
23
p
19
原核表达
蛋白纯化
抗体
制备
Keywords
il-
23
p
19
p
rokaryotic ex
p
ression
p
rotein
p
urification
antibody
p
re
p
aration
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IL-23p19单克隆抗体通过调节Th17/Treg平衡缓解MRL/lpr狼疮小鼠肾炎
成炜
宋赛哲
沈宇
刘翠平
常新
武剑
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体的制备和鉴定
门颖丽
王小龙
丁聪
王晓东
汲振余
王婷
康巧珍
刘鑫
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
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