炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的研究 被引量：1

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作者 陈乾 王帝 +5 位作者 张定一 贾赛蕾 王丽辉 曹玉净 李鲜 李燕红 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期16-24,共9页

目的探讨炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的影响。方法取70只BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组和造模小鼠。除空白组、假手术组外,各组小鼠均采用盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture,CLP... 目的探讨炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的影响。方法取70只BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组和造模小鼠。除空白组、假手术组外,各组小鼠均采用盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture,CLP)构建脓毒症急性胃肠损伤小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组、炎调方低、中、高剂量组和ROCK抑制剂组。采用HE染色观察小鼠回肠组织病理学改变;ELISA法检测各组小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10水平;免疫组织化学检测观察PCNA、Ki-67的表达;蛋白印迹法检测回肠组织凋亡指标cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白表达;RT-qPCR检测小鼠回肠组织ROCK mRNA、MLC mRNA表达。结果较空白组和假手术组相比,模型组小鼠的Chiu’s病理评分、促炎介质(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平、cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白、ROCK mRNA、MLC mRNA水平升高(P<0.05),而抑炎介质(IL-10)水平和回肠组织中PCNA、Ki-67表达降低(P<0.05)。与模型组比较,炎调方各组随着剂量增加,回肠组织病理学改变均得到不同程度改善,其Chiu’s病理评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平、cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白、ROCK mRNA、MLC mRNA的表达降低(P<0.05),而IL-10水平、回肠组织中PCNA、Ki-67表达升高(P<0.05)。结论炎调方可能通过调控Rho/ROCK信号通路抑制脓毒症急性胃肠损伤小鼠的肠上皮细胞凋亡,从而具有减轻肠道组织炎症反应,最终达到防止肠黏膜组织损伤的作用。 展开更多

关键词 脓毒症急性胃肠损伤 肠上皮细胞凋亡 RHO/ROCK信号通路 炎调方

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基于自噬角度探究A2AR对内毒素诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤的影响 被引量：1

2

作者 陈禺 王小吉 李合 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第9期1636-1642,共7页

目的探究腺苷A2A受体(A2AR)对内毒素脂多糖(LPS)诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤的影响及机制。方法首先将Caco-2细胞分为对照组、LPS组(10μg/ml LPS处理12 h)、A2AR激动剂(CGS21680)组(10μmol/L CGS21680预处理10 min)、CGS21680+LPS... 目的探究腺苷A2A受体(A2AR)对内毒素脂多糖(LPS)诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤的影响及机制。方法首先将Caco-2细胞分为对照组、LPS组(10μg/ml LPS处理12 h)、A2AR激动剂(CGS21680)组(10μmol/L CGS21680预处理10 min)、CGS21680+LPS组(10μmol/L CGS21680预处理10 min、10μg/ml LPS处理12 h),CCK-8法测定各组细胞活力,ELISA法测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的分泌水平,实时荧光定量PCR检测各组细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平,Western blot分析各组细胞中自噬相关蛋白微管相关轻链蛋白3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin1)的蛋白表达水平;再将Caco-2细胞分为对照组、LPS组(10μg/ml LPS处理12 h)、CGS21680+LPS组(10μmol/L CGS21680预处理10 min、10μg/ml LPS处理12 h)、CGS21680+LPS+雷帕霉素(Rapa)组(10μmol/L CGS21680预处理10 min、10μg/ml LPS与5μmol/L Rapa处理12 h),CCK-8法测定各组细胞活力,ELISA法测定各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平。结果与对照组比较,LPS组Caco-2细胞活力显著降低(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平显著升高(P<0.05),细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05),并检测到LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin1蛋白相对表达量显著上调(P<0.05);与LPS组比较,CGS21680+LPS组Caco-2细胞活力显著升高(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平显著降低(P<0.05),细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA相对表达量均显著下调(P<0.05),且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin1蛋白相对表达量显著下调(P<0.05);此外,与CGS21680+LPS组比较,CGS21680+LPS+Rapa组Caco-2细胞活力又显著降低(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平也显著升高(P<0.05)。结论使用A2AR激动剂能够减轻内毒素LPS诱导的Caco-2肠上皮细胞炎性损伤,提高细胞活力,这可能与其抑制自噬水平有关。 展开更多

关键词 腺苷A2A受体 Caco-2肠上皮细胞 炎症性肠病 脂多糖 细胞损伤 自噬

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亮菌多糖对LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤的保护作用及机制探讨 被引量：3

3

作者 张梅 吴悦 +3 位作者 苏丽 朱耀东 李平 王婷 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第4期533-538,共6页

目的观察在脂多糖(LPS)诱导的IEC-6肠上皮细胞损伤的情况下,亮菌多糖(ATPS)对细胞活性、闭合素(Occludin)、细胞紧密连接蛋白1(ZO-1)的影响,并探讨ATPS对肠黏膜屏障损伤的保护机制。方法利用LPS构建的IEC-6肠上皮细胞体外损伤模型,将细... 目的观察在脂多糖(LPS)诱导的IEC-6肠上皮细胞损伤的情况下,亮菌多糖(ATPS)对细胞活性、闭合素(Occludin)、细胞紧密连接蛋白1(ZO-1)的影响,并探讨ATPS对肠黏膜屏障损伤的保护机制。方法利用LPS构建的IEC-6肠上皮细胞体外损伤模型,将细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+ATPS组、LPS+Matrine组(阳性对照),使用普通显微镜和MTT法观察细胞的活性;免疫荧光和流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western blot检测膜蛋白ZO-1和跨膜蛋白Occludin的表达水平。同时Western blot检测与介导细胞凋亡密切相关的内质网应激(ERS)通路上磷酸化蛋白激酶R样内质网调节激酶(p-PERK)、磷酸化真核细胞翻译起始因子(p-eIF2α)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、内质网应激相关蛋白(CHOP)以及调节肠黏膜损伤重要分子β-抑制蛋白1(Arrb1)的表达水平。结果与对照组、LPS组比较,随着ATPS的浓度增加,LPS+ATPS组中细胞的活性越多且免疫荧光和流式检测也表明细胞的凋亡率减少;Occludin、ZO-1的表达水平增多,明显高于LPS组;与LPS组相比,LPS+ATPS组中p-PERK、p-eIF2α、GRP78、CHOP及Arrb1蛋白的水平降低。结论ATPS可通过抑制Occludin、ZO-1的破坏来保护LPS介导的肠上皮细胞炎性损伤,其机制可能与介导细胞凋亡的内质网应激蛋白以及调节肠黏膜损伤的重要分子Arrb1有关。 展开更多

关键词 iec-6肠上皮细胞损伤 脂多糖 亮菌多糖 紧密连接

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白术、黄芪、党参促进IEC-6细胞损伤后的快速修复 被引量：39

4

作者 宋厚盼 谢梦洲 +2 位作者 胡志希 黄惠勇 蔡雄 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1170-1175,共6页

目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表... 目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表皮生长因子(EGF)及其阻断剂AG1478对迁移模型进行评价;最后考察三味中药对IEC-6细胞迁移的作用效果。结果 (1)细胞的最佳接种密度为1×105个/m L;(2)宜在划痕后8 h计算细胞迁移率;(3)1%血清浓度为最适宜浓度;(4)EGF明显促进了IEC-6细胞迁移,AG1478明显抑制了细胞迁移;(5)白术、黄芪、党参提取物均可促进IEC-6细胞迁移。结论益气健脾中药可促进胃肠黏膜损伤后的快速修复过程,其机制是否与影响EGFR信号通路有关有待进一步研究。 展开更多

关键词 胃肠黏膜损伤 iec-6细胞 细胞迁移模型 表皮生长因子(EGF) 白术 黄芪 党参

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角质细胞生长因子对肠上皮细胞辐射损伤的防护作用 被引量：9

5

作者 王小华 周舟 +4 位作者 朱光旭 楼淑芬 冉新泽 程天民 余争平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期713-716,共4页

目的　探讨角质细胞生长因子 (KGF)的辐射防护作用与机制 ,为应用KGF防护肠道辐射损伤提供实验依据。方法　应用正常及不同剂量γ射线损伤的肠上皮细胞 (IEC 6) ,通过在培养体系中加入不同剂量的KGF后检测细胞增殖活性的变化以及凋亡细... 目的　探讨角质细胞生长因子 (KGF)的辐射防护作用与机制 ,为应用KGF防护肠道辐射损伤提供实验依据。方法　应用正常及不同剂量γ射线损伤的肠上皮细胞 (IEC 6) ,通过在培养体系中加入不同剂量的KGF后检测细胞增殖活性的变化以及凋亡细胞百分率 ,作为KGF辐射防护效应和细胞辐射敏感性变化的指标。结果　正常培养的IEC 6细胞 ,KGF呈剂量依赖型促细胞增殖作用 ;10Gy照射后KGF促细胞增殖作用显著减弱。KGF预处理能显著降低IEC 6细胞辐射敏感性 ,其IP50 ( 50 %增殖抑制照射量 )从对照( 15.3± 0 .6)Gy降至 ( 12 .2± 0 .4 )Gy。结论　KGF具有促肠上皮细胞增殖作用 ,其辐射防护作用表现为降低细胞辐射敏感性 ,抑制辐射诱导的细胞凋亡可能是其作用机制之一。 展开更多

关键词 KGF iec-6 细胞凋亡 辐射防护 肠上皮细胞

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过氧化氢诱导肠上皮干细胞DNA氧化损伤模型的建立 被引量：7

6

作者 蔡善荣 郑树 +1 位作者 张苏展 彭佳萍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2006年第4期366-369,376,共5页

目的：探索建立过氧化氢诱导肠上皮细胞DNA氧化损伤模型，以便在体外进一步研究DNA氧化损伤在大肠癌发生发展中的作用。方法：过氧化氢以RPM11640培养基稀释成100、50、10、5、μmol／L5个浓度，以RPMI1640培养荆作空白对照。作用人胎... 目的：探索建立过氧化氢诱导肠上皮细胞DNA氧化损伤模型，以便在体外进一步研究DNA氧化损伤在大肠癌发生发展中的作用。方法：过氧化氢以RPM11640培养基稀释成100、50、10、5、μmol／L5个浓度，以RPMI1640培养荆作空白对照。作用人胎肠上皮干细胞不同时间（10min、30min、1h、1．5h、12h、24h）后，以MTT法检测细胞生存状况，以免疫组织化学方法检测DNA特异性氧化损伤产物8-羟-2-脱氧鸟苷（8-OhdG），用SPSS10．0软件以线性回归方法检验肠上皮干细胞在不同时间的生存率变化趋势。结果：MTT活性检测结果表明，在10～30min时，各浓度过氧化氢作用后的细胞活性较高，为60％～80％，但随时间推移，细胞活性下降，至24h，降至30％左右，时间趋势检验表明，除100、50μmol／L过氧化氢组和空白对照组外，其余各组的生存率随过氧化氢作用时间的延长，生存率下降，时间趋势差异具统计学意义。过氧化氢作用时间在10～30min内，100、50μmol／L组的细胞活性明显低于1～10μmol／L组20％左右，但在1．0h以上各组，虽然过氧化氢浓度不同，但在同一作用时间内细胞活性无明显差别。过氧化氢处理肠上皮细胞15min后进行8-OhdG免疫组织化学检测，结果除对照组阴性外，其余各组肠上皮细胞在不同浓度过氧化氢作用后的胞核及胞浆染色均呈棕褐色，为阳性。结论：过氧化氢能诱导肠上皮细胞发生DNA氧化损伤，肠上皮细胞DNA氧化损伤模型的条件以1～10μmol／L过氧化氢作用10～30min为宜。 展开更多

关键词 DNA损伤/药物作用 细胞 培养的 DNA氧化损伤 肠上皮干细胞 过氧化氢 8-OHDG

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放射损伤小肠上皮内淋巴细胞的变化及其对肠上皮细胞影响的实验研究 被引量：4

7

作者 徐辉 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期68-69,共2页

放射损伤小肠上皮内淋巴细胞的变化及其对肠上皮细胞影响的实验研究Ｅｆｅｃｔｓｏｆｉｏｎｉｚｉｎｇｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎｍｕｒｉｎｅｓｍａｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓａｎ... 放射损伤小肠上皮内淋巴细胞的变化及其对肠上皮细胞影响的实验研究Ｅｆｅｃｔｓｏｆｉｏｎｉｚｉｎｇｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎｍｕｒｉｎｅｓｍａｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓａｎｄｉｔｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｉｎ... 展开更多

关键词 放射损伤 肠上皮细胞 肠源性感染 粘膜免疫 细胞因子 上皮内淋巴细胞 细胞增殖 细胞毒力 基因表达 iec-6 TNF-a TGF-β

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辐射小鼠肠上皮细胞损伤相关基因的初步鉴定 被引量：3

8

作者 王军平 胡川闽 +1 位作者 粟永萍 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期387-389,共3页

目的:寻找肠上皮细胞辐射损伤相关基因，探讨辐射致肠上皮损伤的分子发生机制。方法:用mRNA差异显示技术比较研究12Grr射线辐射损伤前后小鼠小肠上皮细胞间基因表达的异同，分离并克隆差异表达基因片段，斑点杂交验证其表达特异性.结果... 目的:寻找肠上皮细胞辐射损伤相关基因，探讨辐射致肠上皮损伤的分子发生机制。方法:用mRNA差异显示技术比较研究12Grr射线辐射损伤前后小鼠小肠上皮细胞间基因表达的异同，分离并克隆差异表达基因片段，斑点杂交验证其表达特异性.结果:寻找并成功地克隆到一条辐射损伤特异表达基因片段RS2。结论:RS2所代表的基因有可能为新发现的历上次辐射损伤相关基因。 展开更多

关键词 肠上皮细胞 辐射损伤 MRNA 克隆

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不同浓度Mg-6Zn合金浸提液对肠上皮细胞凋亡及其相关基因Caspase-3表达的影响 被引量：3

9

作者 王啸虎 陈义钢 +6 位作者 于嵩 王志刚 张小农 赵常利 张绍翔 阎钧 郑起 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第8期47-51,共5页

研究不同浓度Mg-6Zn合金浸提液对大鼠肠上皮细胞IEC-6的凋亡及凋亡相关基因Caspase-3表达的影响。将Mg-6Zn合金制成不同浓度(20%和40%)的浸提液体外培养大鼠肠上皮细胞IEC-6,并以含10%胎牛血清的高糖DMEM(Dulbecco′s modified Eagle′s... 研究不同浓度Mg-6Zn合金浸提液对大鼠肠上皮细胞IEC-6的凋亡及凋亡相关基因Caspase-3表达的影响。将Mg-6Zn合金制成不同浓度(20%和40%)的浸提液体外培养大鼠肠上皮细胞IEC-6,并以含10%胎牛血清的高糖DMEM(Dulbecco′s modified Eagle′s medium)培养基作为阴性对照。采用噻唑蓝(MTT)法通过计算细胞相对增殖率检测不同浓度合金浸提液对IEC-6细胞的毒性作用;采用流式细胞仪检测不同浓度合金浸提液对IEC-6细胞凋亡的影响;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测不同浓度合金浸提液对IEC-6细胞凋亡相关基因Caspase-3mRNA表达的影响。实验结果表明,20%和40%两种浓度的镁合金浸提液在体外培养IEC-6细胞第七天时细胞毒性分级分别为0级和1级,属于无毒性,符合医用材料细胞毒性分级的合格标准。40%和20%浓度镁合金浸提液中,IEC-6细胞的凋亡比例及Caspase-3活化度相对于对照组都增高,差异有统计学意义(P<0.05),40%浓度组中,IEC-6细胞的凋亡比例及Caspase-3活化度相对于20%浓度组增高,差异有统计学意义(P<0.05),说明Mg-6Zn合金浸提液在一定范围内处于较高浓度时易诱导IEC-6细胞的凋亡及Caspase-3的表达,且随浓度升高影响越大。 展开更多

关键词 Mg-6Zn合金 肠上皮细胞 凋亡 CASPASE-3

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酿酒酵母培养物对内毒素诱导的鹅肠上皮细胞炎性损伤的缓解作用 被引量：4

10

作者 闫乐艳 邵春荣 +2 位作者 李悦 闫俊书 奚雨萌 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期7392-7401,共10页

本试验旨在研究酿酒酵母培养物(YC)对内毒素(LPS)诱导的原代鹅肠上皮细胞炎性损伤的缓解作用。试验利用混合酶消化法成功获得原代鹅肠上皮细胞,通过1μmol/L LPS处理建立肠上皮细胞炎性损伤模型;并分别选取浓度为100、300和500 mg/L的Y... 本试验旨在研究酿酒酵母培养物(YC)对内毒素(LPS)诱导的原代鹅肠上皮细胞炎性损伤的缓解作用。试验利用混合酶消化法成功获得原代鹅肠上皮细胞,通过1μmol/L LPS处理建立肠上皮细胞炎性损伤模型;并分别选取浓度为100、300和500 mg/L的YC溶液预处理细胞,分析YC对LPS诱发的炎性损伤的缓解作用。试验采用CCK-8法测定细胞活性,实时荧光定量PCR检测炎性因子及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路基因表达,荧光探针法分析细胞活性氧(ROS)浓度,并通过测定抗氧化酶活性评价细胞氧化应激状态。结果表明:1μmol/L LPS可诱导肠上皮细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)基因相对表达量显著上调(P<0.05),同时显著或极显著上调Toll样受体2A(TLR2A)(P<0.01)、Toll样受体4(TLR4)(P<0.01)、髓样分化因子88(MyD88)(P<0.05)、NF-κB(P<0.01)等NF-κB信号通路基因相对表达量;而使用300和500 mg/L浓度的YC预处理可抑制LPS诱导的炎症反应,减少ROS生成。同时,300 mg/L的YC预处理还可显著缓解LPS引起的细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性下降(P<0.05),降低细胞丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量(P<0.05)。由此可见,YC可调节鹅肠上皮免疫平衡,缓解炎性损伤,还可通过提高肠上皮细胞对氧自由基的清除能力及抗氧化能力,保护肠上皮细胞的正常功能。 展开更多

关键词 酿酒酵母培养物 内毒素 鹅肠上皮细胞 炎性损伤 抗氧化功能

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肠缺血再灌注时肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡与肺损伤 被引量：4

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作者 尹晓林 金丽娟 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第4期339-341,共3页

目的 观察肠缺血再灌注中肺损伤与肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的关系及其可能的发生机制。方法 Wistar大鼠，肠系膜上动脉夹闭后松夹造成肠缺血再灌注。不同时间点活杀动物，测肺通透指数、肺泡灌洗液（BALF）和血浆中NO、IL-2含量，分离肺泡... 目的 观察肠缺血再灌注中肺损伤与肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的关系及其可能的发生机制。方法 Wistar大鼠，肠系膜上动脉夹闭后松夹造成肠缺血再灌注。不同时间点活杀动物，测肺通透指数、肺泡灌洗液（BALF）和血浆中NO、IL-2含量，分离肺泡Ⅱ型上皮细胞，观察凋亡率。结果与结论 肠缺血再灌注可能引起肺损伤；肠缺血再灌注后肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率上升，再灌注30 min 达高峰；缺血再灌注后血、BALF中NO、IL-2增加；肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率与肺通透指数显著相关，BALF中IL-2水平与肺通透指数、肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率显著相关。 展开更多

关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 肠缺血 再灌注损伤 细胞凋亡

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急性缺血缺氧大鼠肠上皮细胞线粒体ATPase6基因的表达研究 被引量：1

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作者 柏干荣 陆松敏 等 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1113-1113,共1页

关键词 急性缺血缺氧 失血性休克 肠上皮细胞 线粒体 ATPase6基因 基因表达 大鼠

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杜仲总黄酮对H_2O_2诱导的IEC-6细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1

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作者 张才超 袁带秀 +4 位作者 李玲 李悦 秦璐 程力 胡倩 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第10期1106-1109,共4页

目的:研究杜仲总黄酮对H2O2诱导IEC-6细胞氧化损伤的保护作用。方法:利用H2O2致IEC-6细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率;采用微量酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,观察细胞的损伤程度;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,WST-1法... 目的:研究杜仲总黄酮对H2O2诱导IEC-6细胞氧化损伤的保护作用。方法:利用H2O2致IEC-6细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率;采用微量酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,观察细胞的损伤程度;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与H2O2处理组相比,杜仲总黄酮各剂量组能使细胞存活率明显升高(P<0.01),细胞培养液中LDH的漏出量减少,细胞内MDA含量降低,SOD活性明显升高(P<0.05)。结论:杜仲总黄酮对H2O2诱导的IEC-6细胞氧化损伤具有明显的保护作用。 展开更多

关键词 杜仲总黄酮 H2O2 iec-6细胞 氧化损伤

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DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

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作者 李之喆 俞华林 刘建军 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第1期29-33,共5页

目的探讨DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法采用不同浓度H_(2)O_(2)处理SRA01/04细胞,构建氧化损伤模型。取氧化损伤的SRA01/04细胞分为H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+... 目的探讨DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法采用不同浓度H_(2)O_(2)处理SRA01/04细胞,构建氧化损伤模型。取氧化损伤的SRA01/04细胞分为H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+空白质粒转染组和H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组进行转染处理。采用实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测转染后氧化损伤的SRA01/04细胞中ERCC6 mRNA和科凯恩综合征互补B蛋白(CSB)的表达变化。采用免疫印迹实验和EdU染色实验分别检测转染后各组SRA01/04细胞凋亡相关蛋白表达变化和细胞增殖能力。结果当H_(2)O_(2)处理浓度为200μmol·L^(-1)时,SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和CSB蛋白的相对表达量最低,后续转染实验H_(2)O_(2)处理浓度均采用200μmol·L^(-1)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+空白质粒转染组相比,H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和蛋白表达水平均显著增高(均为P<0.05)。进一步实验发现,与另外两组相比,H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞中的促凋亡蛋白Bax表达均明显降低,而抑制凋亡的蛋白Bcl-2表达则均明显增加(均为P<0.05)。EdU染色实验检测结果显示,与H_(2)O_(2)+空白质粒转染组相比,H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞内绿色荧光亮度增高,阳性细胞数量增加,表明SRA01/04细胞的增殖能力增强。结论ERCC6基因可能通过减弱DNA的核苷酸切除修复作用抑制氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖、促进其凋亡从而导致老年性白内障的发生。 展开更多

关键词 老年性白内障 氧化损伤 ERCC6 晶状体上皮细胞

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谷氨酰胺在预防细菌易位和肠上皮细胞损伤中的作用

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作者 Gewd.,PP 花嵘 《肠外与肠内营养》 CAS 1998年第4期237-238,共2页

小肠粘膜的损伤是发生细菌易位的主要机制，而谷氨酰胺在肠粘膜结构与屏障功能的维持中起重要作用。本文通过细胞株、活体肠袢水平的观察来了解谷氨酰胺在减轻细菌易位及肠上皮细胞损伤中的作用。１材料和方法从坏死性肠炎（ＮＥＣ）的... 小肠粘膜的损伤是发生细菌易位的主要机制，而谷氨酰胺在肠粘膜结构与屏障功能的维持中起重要作用。本文通过细胞株、活体肠袢水平的观察来了解谷氨酰胺在减轻细菌易位及肠上皮细胞损伤中的作用。１材料和方法从坏死性肠炎（ＮＥＣ）的婴儿体内分离出的大肠杆菌菌落用在Ｃ... 展开更多

关键词 谷氨酰胺 细菌易位 肠上皮细胞损伤 小肠

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参附对再灌注期间肠粘膜上皮细胞凋亡的抑制作用及机制探讨 被引量：9

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作者 孟庆涛 夏中元 +2 位作者 刘先义 陈向东 熊桂先 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2004年第8期498-500,共3页

目的　探讨大鼠缺血 再灌注期间粘膜上皮细胞凋亡及参附注射液对其影响的可能机制。方法　采用大鼠肠缺血 再灌注模型 ,2 4只大鼠随机分为对照组 (C组 )、缺血 再灌注组 (I R组 )和参附治疗组 (SF组 )。在规定时间检测回肠粘膜上皮细... 目的　探讨大鼠缺血 再灌注期间粘膜上皮细胞凋亡及参附注射液对其影响的可能机制。方法　采用大鼠肠缺血 再灌注模型 ,2 4只大鼠随机分为对照组 (C组 )、缺血 再灌注组 (I R组 )和参附治疗组 (SF组 )。在规定时间检测回肠粘膜上皮细胞Caspase 3、Bcl 2蛋白的表达、凋亡细胞数目及回肠粘膜组织肿瘤坏死因子 (TNF α)水平 ,同时观察病理形态学改变。结果　 (1)I R组凋亡细胞显著增多 ,SF组凋亡细胞数较I R组显著减少而多于C组 (P <0 0 5 )。 (2 )Caspase 3在I R组的表达显著高于SF组和C组 (P <0 0 1) ,SF组与C组差异无显著性。Caspase 3表达与凋亡细胞数目呈正相关 (r =0 914 9,P <0 0 1) ;Bcl 2的表达与Caspase 3的表达呈直线负相关 (r =- 0 9384 ,P <0 0 1)。 (3)TNF α表达 :TNF α的表达在I R组显著高于C组和SF组 (均P <0 0 1) ,SF组与C组差异无显著性。TNF α表达与凋亡细胞数目呈正相关 (r =0 9133,P <0 0 1)。 (4)SF组小肠粘膜病理损伤程度明显小于I R组 (P <0 0 1)。结论　参附注射液通过抑制TNF α、Caspase 3表达同时上调Bcl 2而抑制缺血 再灌注期间肠粘膜上皮细胞的凋亡 ,从而减轻肠粘膜缺血 再灌注损伤。 展开更多

关键词 再灌注损伤 肠粘膜上皮细胞 抑制作用 细胞凋亡 参附注射液 肠缺血

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硫芥诱导大鼠小肠上皮细胞凋亡的研究 被引量：3

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作者 赵杰 袁浩 +3 位作者 陈伟忠 胡惠民 朱明学 陈志龙 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期274-277,共4页

目的 :观察硫芥对大鼠小肠上皮细胞 (IEC- 6 )生长的影响及其引起的细胞死亡方式。 方法 :利用透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳定性观察硫芥中毒的 IEC- 6细胞形态变化及 DNA的改变。采用 Cell Death Detection EL ISA试剂盒研究 IEC-6细... 目的 :观察硫芥对大鼠小肠上皮细胞 (IEC- 6 )生长的影响及其引起的细胞死亡方式。 方法 :利用透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳定性观察硫芥中毒的 IEC- 6细胞形态变化及 DNA的改变。采用 Cell Death Detection EL ISA试剂盒研究 IEC-6细胞凋亡量与硫芥浓度之间的关系。 结果 :0 .1～ 10 0 0μm ol/ L硫芥对 IEC- 6细胞的毒性作用与硫芥的浓度和作用时间呈正相关。电镜观察到细胞凋亡的形态学改变 :细胞膜完整 ,染色质固缩并聚集于核膜边缘 ,凋亡小体形成 ;DNA电泳有“DNAL adder”出现。 0 .1～ 10 0μmol/ L硫芥处理的细胞的凋亡量随硫芥浓度的升高而增加 ,超过 10 0μmol/ L测凋亡量反降低。 结论 :硫芥可诱导大鼠小肠上皮 IEC- 6细胞凋亡 ,在低浓度时以凋亡为主 ,高浓度时则出现坏死。 展开更多

关键词 硫芥 小肠上皮iec-6细胞 细胞凋亡 大鼠

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人蛔虫体腔液诱导人肠上皮细胞凋亡的实验研究 被引量：4

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作者 翁培兰 袁铿 +1 位作者 周宪民 彭卫东 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期267-268,258,共3页

关键词 上皮细胞凋亡 实验研究 体腔液 人蛔虫 人肠 粘膜病理改变 感染人数 肠粘膜损伤 形态学改变 病原生物 发育障碍 营养不良 吸收障碍 不良症状 作用机制 切片检查 组织病理 感染者

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益生芽孢杆菌对草鱼肠上皮细胞的黏附及对嗜水气单胞菌的抑制 被引量：4

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作者 孔维光 吴志新 +3 位作者 李思思 赵慧 李锡阁 陈孝煊 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期67-73,共7页

为探讨益生性枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞黏附及对嗜水气单胞菌的抑制作用,以草鱼肠上皮细胞为研究对象,检测了枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞的黏附率、对嗜水气单胞菌的黏附抑制率和对各种生理生化指标的影响。结果显示:枯草芽孢杆菌对草鱼... 为探讨益生性枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞黏附及对嗜水气单胞菌的抑制作用,以草鱼肠上皮细胞为研究对象,检测了枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞的黏附率、对嗜水气单胞菌的黏附抑制率和对各种生理生化指标的影响。结果显示:枯草芽孢杆菌对草鱼肠上皮细胞形态、细胞中四甲基偶氮唑盐(MTT)OD值、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)和谷草转氨酶(GOT)活性等各种生理指标无显著影响,但在孵育3h和6h后分别显著降低了Na+,K+-ATP酶和谷丙转氨酶(GPT)的活性;与嗜水气单胞菌孵育3h后,肠上皮细胞由椭圆变成不规则形态,培养液的死细胞增多,并且在多数时间点上显著降低了MTT OD值以及谷草转氨酶、Na+,K+-ATP酶和谷丙转氨酶的活性,细胞中MTT OD值和细胞上清中乳酸脱氢酶的活性显著提高(P<0.05);枯草芽孢杆菌和嗜水气单胞菌共孵育对肠上皮细胞形态及各种生理指标的影响明显小于嗜水气单胞菌组;黏附抑制实验显示枯草芽孢杆菌可以显著降低嗜水气单胞菌对肠上皮细胞的黏附率。提示枯草芽孢杆菌可以抑制嗜水气单胞菌对草鱼肠上皮细胞的黏附,并减轻嗜水气单胞菌对细胞的损伤。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 嗜水气单胞菌 黏附 细胞损伤 肠上皮细胞 草鱼

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白细胞介素-6对糖尿病小鼠角膜缘干细胞活化的促进作用和角膜上皮愈合的加速作用 被引量：7

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作者 董亚慧 陈鹏 +2 位作者 张真真 冯璐 周庆军 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期423-431,共9页

背景白细胞介素（IL）-6既介导炎症反应过程又在损伤修复中发挥重要作用，但其具体机制及其在糖尿病角膜组织损伤修复中的作用值得探讨。目的探讨IL-6在正常和糖尿病小鼠角膜缘干细胞活化和角膜上皮修复过程中的作用及其机制。方法正常6... 背景白细胞介素（IL）-6既介导炎症反应过程又在损伤修复中发挥重要作用，但其具体机制及其在糖尿病角膜组织损伤修复中的作用值得探讨。目的探讨IL-6在正常和糖尿病小鼠角膜缘干细胞活化和角膜上皮修复过程中的作用及其机制。方法正常6～8周龄C57BL/6小鼠52只，采用随机数字表法随机分为正常对照鼠32只和糖尿病模型鼠20只，采用50 mg/kg链脲佐菌素连续腹腔内注射5 d的方法诱导建立小鼠糖尿病模型。正常对照小鼠和糖尿病模型小鼠均行角膜上皮刮除术，然后分别于刮除后即刻和48 h结膜下注射IL-6或等容量PBS，采用荧光素染色法评价随时间延长的角膜上皮的愈合情况。体外培养小鼠角膜上皮干/祖细胞（TKE2细胞系），采用结晶紫染色法评估不同质量浓度IL-6处理后细胞克隆率（CFE），并与空白对照组进行比较；采用免疫荧光检测法和Western blot法检测细胞和小鼠再生上皮中干细胞标志物ΔNP63、Ki67的表达以及关键转录因子STAT3磷酸化水平；采用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测小鼠角膜再生上皮中IL-6的mRNA及蛋白水平。结果角膜荧光素染色检查显示，正常对照小鼠和糖尿病模型小鼠PBS注射组与IL-6注射组注射后24、48和72 h残留角膜上皮缺损面积占原始缺损面积的百分比随角膜上皮损伤后时间延长均明显缩小，同时间点IL-6注射组角膜上皮缺损面积均明显小于PBS注射组，组间总体差异均有统计学意义（正常对照组：F分组＝19.982，P〈0.01；F时间＝589.350，P〈0.01；糖尿病组：F分组＝25.411，P〈0.01；F时间＝334.807，P〈0.01）。空白对照组及10、20、50、100 ng/ml IL-6处理组CFE分别为（13.23±1.12）%、（15.87±1.30）%、（21.69±1.62）%、（25.33±1.28）%和（18.67±1.54）%，随着IL-6质量浓度的增加CFE逐渐增加，总体比较差异有统计学意义（F＝35.547，P〈0.01）。50 ng/ml IL-6处理5、10、15、30和60 min细胞中ΔNP63、Ki67和p-STAT3蛋白的相对表达量随着处理时间的延长均逐渐增加，各时间点细胞中ΔNP63、Ki67和p-STAT3蛋白的相对表达量均明显高于空白对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。糖尿病组和正常对照组小鼠角膜上皮刮除后24 h的再生上皮中IL-6 mRNA相对表达量分别为0.45±0.21和1.00±0.16，糖尿病组小鼠角膜再生上皮中IL-6 mRNA相对表达量较正常对照组小鼠下降56%，差异有统计学意义（t＝3.42，P＝0.03），糖尿病小鼠角膜上皮刮除后48 h的再生上皮中IL-6蛋白质量浓度为（257±12）ng/μl，明显低于正常对照组小鼠的（323±17）ng/μl，差异有统计学意义（t＝5.60，P〈0.01）。结论IL-6能够通过激活STAT3信号通路促进正常和糖尿病小鼠角膜缘干细胞的活化和增生，进而促进角膜上皮修复，而封闭内源性IL-6则会延迟小鼠角膜上皮的修复。 展开更多

关键词 白细胞介素-6 角膜损伤 细胞增生/药物作用 STAT3转录因子/代谢 损伤修复/药物作用 糖尿病 角膜上皮干细胞 近交系C57BL小鼠

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